evaluación de seis dosis de ectomicorrizas sobre la calidad de
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evaluación de seis dosis de ectomicorrizas sobre la calidad de
UNIVERSIDAD RAFAEL LANDÍVAR FACULTAD DE CIENCIAS AMBIENTALES Y AGRÍCOLAS LICENCIATURA EN CIENCIAS AGRÍCOLAS CON ÉNFASIS EN RIEGOS EVALUACIÓN DE SEIS DOSIS DE ECTOMICORRIZAS SOBRE LA CALIDAD DE PLANTA DE PINO EN VIVERO; SAN FRANCISCO; JUTIAPA TESIS DE GRADO LUIS CARLOS CAMEY VELA CARNET 25598-07 JUTIAPA, JULIO DE 2014 SEDE REGIONAL DE JUTIAPA UNIVERSIDAD RAFAEL LANDÍVAR FACULTAD DE CIENCIAS AMBIENTALES Y AGRÍCOLAS LICENCIATURA EN CIENCIAS AGRÍCOLAS CON ÉNFASIS EN RIEGOS EVALUACIÓN DE SEIS DOSIS DE ECTOMICORRIZAS SOBRE LA CALIDAD DE PLANTA DE PINO EN VIVERO; SAN FRANCISCO; JUTIAPA TESIS DE GRADO TRABAJO PRESENTADO AL CONSEJO DE LA FACULTAD DE CIENCIAS AMBIENTALES Y AGRÍCOLAS POR LUIS CARLOS CAMEY VELA PREVIO A CONFERÍRSELE EL TÍTULO DE INGENIERO AGRÓNOMO CON ÉNFASIS EN RIEGOS EN EL GRADO ACADÉMICO DE LICENCIADO JUTIAPA, JULIO DE 2014 SEDE REGIONAL DE JUTIAPA AUTORIDADES DE LA UNIVERSIDAD RAFAEL LANDÍVAR RECTOR: P. EDUARDO VALDES BARRIA, S. J. VICERRECTORA ACADÉMICA: DRA. MARTA LUCRECIA MÉNDEZ GONZÁLEZ DE PENEDO VICERRECTOR DE INVESTIGACIÓN Y PROYECCIÓN: DR. CARLOS RAFAEL CABARRÚS PELLECER, S. J. VICERRECTOR DE INTEGRACIÓN UNIVERSITARIA: MGTR. LUIS ESTUARDO QUAN MACK VICERRECTOR ADMINISTRATIVO: LIC. ARIEL RIVERA IRÍAS SECRETARIA GENERAL: LIC. FABIOLA DE LA LUZ PADILLA BELTRANENA DE LORENZANA AUTORIDADES DE LA FACULTAD DE CIENCIAS AMBIENTALES Y AGRÍCOLAS DECANO: DR. ADOLFO OTTONIEL MONTERROSO RIVAS VICEDECANA: LIC. ANNA CRISTINA BAILEY HERNÁNDEZ SECRETARIA: ING. REGINA CASTAÑEDA FUENTES DIRECTOR DE CARRERA: MGTR. LUIS MOISÉS PEÑATE MUNGUÍA NOMBRE DEL ASESOR DE TRABAJO DE GRADUACIÓN ING. RONI OSMAN CARRILLO AGUILAR TERNA QUE PRACTICÓ LA EVALUACIÓN MGTR. EDGAR AMÍLCAR MARTÍNEZ TAMBITO MGTR. JULIO ROBERTO GARCÍA MORÁN MGTR. RODOLFO ESTUARDO VÉLIZ ZEPEDA DEDICATORIA A Dios: Por haberme dado la vida y permitirme el haber llegado hasta este momento tan importante de mi formación profesional. Mi madre: Por ser el pilar más importante, por demostrarme siempre su cariño y apoyo incondicional. Mi padre: Que te encuentras en la gloria de Dios, te siento conmigo siempre y aunque nos faltaron muchas cosas por vivir juntos, sé que este momento es tan especial para ti como lo es para mí. Mis hermanos: Por su amistad y apoyo incondicional. Mi novia: Por compartir momentos significativos conmigo y por siempre estar dispuesta a escucharme y ayudarme en cualquier momento. AGRADECIMIENTOS A mi asesor Ing. Agr. Roni Osman Carrillo Aguilar por su valiosa asesoría, revisión y corrección de la presente investigación. A mi catedrático Ing. Agr. Héctor Hugo Ruano Solís por su visión crítica de muchos aspectos cotidianos de la vida, por su rectitud en su profesión como docente, por sus consejos, que me ayudaron a formarme como persona e investigador. A la finca San Francisco, Jutiapa, por permitirme realizar mi trabajo de investigación. INDICE Página RESUMEN……………………………………………………....………………...……………...i SUMMARY…………………………………….………………………………………………….ii I. INDICE………………………………………………………………………………………….1 II. MARCO TEORICO .......................................................................................................2 2.1 EL CULTIVO DEL PINO..........................................................................................2 2.1.2 Descripción botánica ...............................................................................................2 2.1.3 Sistema radicular .....................................................................................................3 2.1.4 Hábitat .....................................................................................................................4 2.1.5 Recolección de semilla y rendimientos....................................................................4 2.1.6 Procesamiento de frutos y semillas .........................................................................5 2.1.7 Calidad física y germinación ....................................................................................5 2.1.8 Manejo de la especie en vivero ...............................................................................5 2.1.9 Problemas fitosanitarios ..........................................................................................5 2.2 CALIDAD DE PLANTA FORESTAL ........................................................................6 2.3 MICORRIZACION ...................................................................................................6 2.3.1 Ciclo biológico de los macromicetes (hongos superiores). ......................................7 2.3.2 Micorrizacion natural ...............................................................................................8 2.3.3 Micorrizacion artificial ..............................................................................................8 2.4 METODOS DE MICORRIZACION ..........................................................................9 2.4.1 Tipos de inóculos.....................................................................................................9 2.4.2 Técnicas de Inoculación ........................................................................................11 2.5 MICORRIZAS........................................................................................................14 2.5.1 Asociación simbiótica de las micorrizas ................................................................14 2.5.2 Tipos de micorrizas ...............................................................................................15 2.5.3 Funciones y beneficios de las micorrizas ..............................................................15 2.5.4 Las ectomirrizas en la planta .................................................................................16 2.5.5 Factores que afectan el desarrollo de una buena micorrización ...........................18 2.6 RIZOBACTERIAS COMO POTENCIALIZADOR EN EL EFECTO DE LAS MICORRIZAS ................................................................................................................ 18 2.7 ESTUDIOS REALIZADOS CON ECTOMICORRIZAS ..........................................18 2.8 BENEFICIOS DE LA ECTOMICORRIZAS EN COMPARACIÓN CON LOS BENEFICIOS DE LOS BIOESTIMULANTES RADICULARES COMERCIALES……..19 III PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA ........................................................................20 3.1 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA Y JUSTIFICACION ....................................20 4.1 GENERAL .............................................................................................................21 4.2 ESPECIFICOS ......................................................................................................21 V. HIPÓTESIS ................................................................................................................21 5.1 HIPÓTESIS ALTERNATIVA..................................................................................21 VI. METODOLOGIA .......................................................................................................22 6.1 LOCALIZACIÓN ....................................................................................................22 6.2 MATERIAL EXPERIMENTAL................................................................................22 6.2.1 Ectomicorrizas .......................................................................................................22 6.3 FACTORES ESTUDIADOS ..................................................................................22 6.4 DESCRIPCIÓN DE LOS TRATAMIENTOS…………………………………………….23 6.4.1 Aplicación de los tratamientos………………………………………………………….24 6.5 DISEÑO EXPERIMENTAL ....................................................................................24 6.6 MODELO ESTADISTICO ......................................................................................25 6.7 UNIDAD EXPERIMENTAL ....................................................................................25 6.8 CROQUIS DE CAMPO .........................................................................................25 6.9 MANEJO DEL EXPERIMENTO ............................................................................26 6.9.1 Selección de semilla ..............................................................................................26 6.9.2 Elaboración de sustrato base ................................................................................26 6.9.3 Llenado de bolsas……………………………………………………...………………..27 6.9.4 Siembra .................................................................................................................27 6.9.5 Riego .....................................................................................................................27 6.9.6 Fertilización ...........................................................................................................27 6.9.7 Control de malezas................................................................................................27 6.9.8 Control de plagas y Enfermedades .......................................................................28 6.10 VARIABLES DE RESPUESTA............................................................................28 6.11 ANALISIS DE LA INFORMACION ......................................................................30 6.11.1 Análisis estadístico……………………………………………………………………30 6.11.2 Análisis económico .............................................................................................30 VII. RESULTADOS Y DISCUSION…………………………………………………………..31 7.1 PORCENTAJE DE COLONIZACIÓN .......................................................................31 7.2 PESO SISTEMA RADICULAR…………………………………………………………...32 7.3 DIÁMETRO DE TALLO……………………………………………………………………33 7.4 ALTURA DE PLANTA……………………………………………………………………..36 7.5 TIEMPO DE SIEMBRA A CAMPO DEFINITIVO PARA CADA TRATAMIENTO……………………………………………………………………………39 7.6 ANÁLISIS FINANCIERO………………………………………………………………….41 VIII. CONCLUSIONES…………………………………………………………………………42 IX. RECOMENDACIONES……………………………………………………………………43 X. BIBLIOGRAFIA ..........................................................................................................44 XI ANEXOS ....................................................................................................................48 INDICE DE CUADROS Página Cuadro 1. Clasificación taxonómica del pino oocarpa………………….…………………...2 Cuadro 2. Codificación y descripción de los tratamientos evaluados…………………....23 Cuadro 3. Concentración de esporas de ectomicorrizas por tratamiento………………..24 Cuadro 4. Efecto de las diferentes dosis de ectomicorrizas sobre el porcentaje de colonización en el sistema radicular……………………….31 Cuadro 5. Efecto de las diferentes dosis de ectomicorrizas sobre el peso húmedo del sistema radicular…………………………………..……….32 Cuadro 6. Efecto de las diferentes dosis de ectomicorrizas sobre el diámetro de tallo a los 30 días después de la siembra, promedios de la lectura No. 2………………………………………...……..…...33 Cuadro 7. Efecto de las diferentes dosis de ectomicorrizas sobre el diámetro de tallo a los 120 días después de la siembra, promedios de la lectura No. 8………………………………………….……..….35 Cuadro 8. Efecto de las diferentes dosis de ectomicorrizas sobre la altura de planta a los 45 días después de la siembra, promedios de la lectura No. 3……………………………………………….……36 Cuadro 9. Efecto de las diferentes dosis de ectomicorrizas sobre la altura de planta a los 120 días después de la siembra, promedios de la lectura No. 8………………………………………….……..….38 Cuadro 10. Costo Fijo, Costo Variable, Costo Total, Venta, Ingreso Bruto, Ingreso Neto, Precio de Rentabilidad y Relación Beneficio/Costo por tratamiento, de 4,444 plantas (cantidad de plantas necesarias para la siembra de una hectárea en campo definitivo) de P. oocarpa en la etapa de vivero…………………………………………………………….………41 Cuadro 11. Datos de número de raíces no colonizadas y colonizadas………….………48 Cuadro 12. Datos y medias de porcentaje de colonización………………………….……50 Cuadro 13. Datos y medias de peso sistema radicular en gramos…………….………...51 Cuadro 14. Lectura No. 1, diámetro de tallo en milímetros………………………..………52 Cuadro 15. Lectura No. 2, diámetro de tallo en milímetros………………………..………53 Cuadro 16. Lectura No. 3, diámetro de tallo en milímetros………………………..………54 Cuadro 17. Lectura No. 4, diámetro de tallo en milímetros……………………..…………55 Cuadro 18. Lectura No. 5, diámetro de tallo en milímetros…………………………..……56 Cuadro 19. Lectura No. 6, diámetro de tallo en milímetros…………………..……………57 Cuadro 20. Lectura No. 7, diámetro de tallo en milímetros……………..…………………58 Cuadro 21. Lectura No. 8, diámetro de tallo en milímetros……………………..…………59 Cuadro 22. Lecturas en los cuatro meses de la etapa de vivero de los promedios de diámetro de tallo por tratamiento en milímetros……………………………………………………………………..…..59 Cuadro 23. Lectura No. 1, altura de planta en centímetros………………………….……60 Cuadro 24. Lectura No. 2, altura de planta en centímetros……………………….………61 Cuadro 25. Lectura No. 3, altura de planta en centímetros……………………….………62 Cuadro 26. Lectura No. 4, altura de planta en centímetros…………………….…………63 Cuadro 27. Lectura No. 5, altura de planta en centímetros………………………….……64 Cuadro 28. Lectura No. 6, altura de planta en centímetros……………………….………65 Cuadro 29. Lectura No. 7, altura de planta en centímetros……………………….………66 Cuadro 30. Lectura No. 8, altura de planta en centímetros………………………….……67 Cuadro 31. Lecturas en los cuatro meses de la etapa de vivero de los promedios de altura de planta por tratamiento en centímetros…………………………………………………….………………….67 Cuadro 32. ANDEVA para la variable de respuesta porcentaje de colonización…………………………………………………………………….…68 Cuadro 33. ANDEVA para la variable de respuesta de peso sistema radicular………………………………………………………………………..….68 Cuadro 34. ANDEVA de la lectura No. 2 (30 días después de la siembra), para la variable de respuesta diámetro de tallo…………….…….69 Cuadro 35. ANDEVA de la lectura No. 8 (120 días después de la siembra), para la variable de respuesta diámetro de tallo….……………….69 Cuadro 36. ANDEVA de la lectura No. 3 (45 días después de la siembra), para la variable de respuesta altura de planta……………………70 Cuadro 37. ANDEVA de la lectura No. 8 (120 días después de la siembra), para la variable de respuesta altura de planta…………………...70 Cuadro 38. Ordenamiento de medias y comparador para la prueba de TUKEY de la variable de respuesta, porcentaje de colonización…………………………………...………..………………………..71 Cuadro 39. Ordenamiento de medias y comparador para la prueba de TUKEY de la variable de respuesta, peso del sistema radicular en gramos………………………………………...………….………...71 Cuadro 40. Ordenamiento de medias y comparador para la prueba de TUKEY de la lectura No. 2 (30 días después de la siembra), para la variable de respuesta diámetro de tallo en milímetros……….……………………………………………….……………72 Cuadro 41. Ordenamiento de medias y comparador para la prueba de TUKEY de la lectura No. 8 (120 días después de la siembra), para la variable de respuesta diámetro de tallo en milímetros…………………………………………….……….………………72 Cuadro 42. Ordenamiento de medias y comparador para la prueba de TUKEY de la lectura No.3 (45 días después de la siembra), para la variable de respuesta altura de planta en centímetros……………………………………………………….…………...73 Cuadro 43. Ordenamiento de medias y comparador para la prueba de TUKEY de la lectura No.8 (120 días después de la siembra), para la variable de respuesta altura de planta en centímetros………………………………………….………………………...73 Cuadro 44. RESULTADOS, PRUEBA DE TUKEY de la variable de respuesta porcentaje de colonización………………………….……………...74 Cuadro 45. RESULTADOS, PRUEBA DE TUKEY de la variable de respuesta peso del sistema radicular en gramos…………………………….74 Cuadro 46. RESULTADOS, PRUEBA DE TUKEY de la lectura No. 2 (30 días después de la siembra) para la variable de respuesta, diámetro de tallo en milímetros……………………………………75 Cuadro 47. RESULTADOS, PRUEBA DE TUKEY de la lectura No. 8 (120 días después de la siembra) para la variable de respuesta, diámetro de tallo en milímetros……………………………………75 Cuadro 48. RESULTADOS, PRUEBA DE TUKEY de la lectura No. 3 (45 días después de la siembra) para la variable de respuesta, altura de planta en centímetros………………………..………….76 Cuadro 49. RESULTADOS, PRUEBA DE TUKEY de la lectura No. 8 (120 días después de la siembra) para la variable de respuesta, altura de planta en centímetros……………………………..…….76 Cuadro 50. Interpolación y extrapolación de los promedios de la Lectura No. 7 y No. 8 de la variable altura de planta en centímetros, desde el día 105 al día 125 después de la siembra……………………………..…………………………………………..77 Cuadro 51. Costo de producción de 4,444 plantas de Pino oocarpa en etapa de vivero, en aldea San Francisco, Jutiapa…………………...…..78 Cuadro 52. Presupuesto para el tratamiento testigo absoluto………………….………...79 Cuadro 53. Presupuesto para el tratamiento contraste (enraizador bioestimulante)…………………………………………………………………...80 Cuadro 54. Presupuesto para el tratamiento dosis de ectomicorrizas a razón de 1.88 gramos/planta………………………………………...……….81 Cuadro 55. Presupuesto para el tratamiento dosis de ectomicorrizas a razón de 2.50 gramos/planta………………………….……...……...……….82 Cuadro 56. Presupuesto para el tratamiento dosis de ectomicorrizas a razón de 3.13 gramos/planta………………………………………...……….83 Cuadro 57. Presupuesto para el tratamiento dosis de ectomicorrizas a razón de 3.75 gramos /planta…………………………..…………………….84 Cuadro 58. Presupuesto para el tratamiento dosis de ectomicorrizas a razón de 4.38 gramos/planta………………………………………...……….85 Cuadro 59. Presupuesto para el tratamiento dosis de ectomicorrizas A razón de 5 gramos/planta………………………………………………..…...86 INDICE DE FIGURAS Página Figura 1. Partes del sistema radicular…………………………………………………….......4 Figura 2. Raíces micorrizadas y no micorrizadas………………………………………17 Figura 3. Porcentaje de colonización por tratamiento. Letras diferentes indican diferencias significativas según prueba de medias (Tukey 0.05 qα)…………………………………………….…………………..……31 Figura 4. Peso húmedo del sistema radicular por tratamiento. Letras Diferente indican diferencias significativas según prueba de medias (Tukey 0.05 qα) …………….…………………………..………..…….33 Figura 5. Diámetro de tallo por tratamiento a los 30 días después de la siembra (lectura No.2). diferencias significativas Letras según diferentes prueba indican de medias (Tukey 0.05 qα)………………………...……………………………………………34 Figura 6. Diámetro de tallo por tratamiento a los 120 días después de la siembra (lectura No.8). Letras diferentes indican diferencias significativas según prueba de medias (Tukey 0.05 qα).………………………………………………..………...…………35 Figura 7. Altura de planta por tratamiento a los 45 días después de la siembra (lectura No.3). Letras diferentes diferencias significativas según prueba indican de medias (Tukey 0.05 qα)…………………………………………………………………….37 Figura 8. Altura de planta por tratamiento a los 120 días después de la siembra (lectura No.8). Letras diferentes diferencias significativas según indican prueba de medias (Tukey 0.05 qα)……………………….……………………………………………38 Figura 9. Grafico tiempo de siembra a campo definitivo para cada tratamiento, en base a los 25 centímetros de altura de planta que necesita la planta de P. oocarpa para la siembra a campo definitivo………………………………………………………………....39 Figura 10. Imagen del experimento al momento de la siembra…………………………..87 Figura 11. Imagen del experimento en la etapa de germinación de la semilla…………………………………………………………………………...….87 Figura 12. Imagen del experimento a los 30 días después de la siembra………………87 Figura 13. Imagen del experimento a los 60 días después de la siembra………………88 Figura 14. Imagen del experimento a los 90 días después de la siembra………………88 Figura 15. Imagen del experimento a los 120 días después de la siembra……………………………………………………………………………..89 Figura 16. Imagen preparación de los tratamientos para ser aplicados…………………89 Figura 17. Imagen de una raíz ectomicorrizada observada en el Estereomicroscopio………………………………………………………………..90 Figura 18. Imagen del sistema radicular de una planta lista para ser pesada e imagen de la balanza analítica utilizada……………………….……90 Figura 19. Imagen de las muestras de las raíces de los distintos tratamientos ya identificadas listas para ser observadas en el estereomicroscopio y pesadas en la balanza analítica……………...91 Figura 20. Observación en el estereomicroscopio de las raíces colonizadas y no colonizadas por las ectomicorrizas……………...………..91 EVALUACIÓN DE SEIS DOSIS ECTOMICORRIZAS SOBRE LA CALIDAD DE PLANTA DE PINO EN VIVERO, SAN FRANCISCO, JUTIAPA. RESUMEN El objetivo principal de la presente investigación fue evaluar el efecto de seis dosis de los hongos ectomicorrícicos, Pisolithus tinctorius y Scleroderma citrinum sobre la calidad de Pinus oocarpa, en vivero, bajo las condiciones ambientales de la aldea San Francisco, Jutiapa, Guatemala. Las dosis de inoculante evaluadas por planta fueron: 1.88 gramos, 2.50 gramos, 3.13 gramos, 3.75 gramos, 4.38 gramos y 5 gramos. Las variables de respuesta analizadas fueron: porcentaje de colonización, peso del sistema radicular, diámetro de tallo, altura de planta, tiempo de siembra a campo definitivo y relación beneficio costo. Luego de analizar los resultados se concluye que la dosis ectomicorrízica de 5 gramos por planta incorporados al sustrato previo a la siembra de la semilla, incrementa la calidad de pino respecto al testigo absoluto, en un: 29% de peso fresco del sistema radicular, 14% en el diámetro de tallo a los 30 días después de la siembra y 11.5% en la altura de la planta a los 45 días después de la siembra. También utilizando dicha dosis la planta se anticipa en el vivero siete días para la siembra a campo definitivo, obteniendo al final de la etapa de vivero: 82.3321% de colonización sobre la raíz, 0.789 gramos de peso del sistema radicular, 26.37 centímetros de altura de planta, 2.35 milímetros de diámetro de tallo. Esta dosis nos da una rentabilidad de 64%, pero entre todas las dosis evaluadas, la más rentable es el testigo absoluto con un 204%. i EVALUATION OF SIX DOSES OF ECTOMYCORRHIZA ON THE QUALITY OF PINE UNDER NURSERY CONDITIONS, SAN FRANCISCO, JUTIAPA SUMMARY The main objective of this research was to evaluate the effect of six doses of ectomycorrhiza fungi, Pisolithus tinctorius and Scleroderma citrinum on the quality of Pinus oocarpa, under nursery and environmental conditions in San Francisco, Jutiapa, Guatemala. The inoculum doses evaluated per plant were: 1.88 grams, 2.50 grams, 3.13 grams, 3.75 grams, 4.38 grams, and 5 grams. The analyzed response variables were: colonization percentage, root system weight, stem diameter, plant height, time to plant in the field, and benefit-cost relationship. After analyzing the results, it is concluded that the ectomycorrhiza of 5 grams per plant incorporated into the substratum prior to planting the seed increases the pine quality compared to the absolute check by about 29% regarding fresh weight of the root system, 14% regarding stem diameter 30 days after planting, and 11.5% regarding plant height 45 days after the planting. In addition to the above, the plant can be transplanted from the nursery to the field seven days before, obtaining the following results at the end of the nursery phase: 82.3321% of colonization on the root, 0.789 grams of root system weight, 26.37 centimeters of plant height, and 2.35 millimeters of stem diameter. This dose yields a profitability of 64%, but among the evaluated doses, the most profitable is the check with 204%. ii I. INTRODUCCION En Guatemala, según el estudio de la dinámica de cobertura forestal 2006-2010 realizado por el Instituto Nacional de Bosques, Consejo Nacional de Áreas Protegidas, Universidad del Valle de Guatemala y la Universidad Rafael Landívar (2,012), la República de Guatemala contaba con una cobertura de bosque equivalente 3,722,595 hectáreas para el año 2,010, lo que representa un 34.2% del país, el dato revisado para el año 2,006 es de 3,868,708 hectáreas de cobertura forestal, lo cual equivale al 35.5% del territorio Nacional, para todo el periodo de dicho estudio a nivel nacional se estima que se produjo una pérdida de 500,219 hectáreas de cobertura nacional, durante el mismo periodo de tiempo se estima una ganancia de bosque de 354,107 hectáreas, lo que refleja una pérdida neta de 146,112 hectáreas de bosque, obtenemos que se ha perdido un 3.78% con respecto al bosque que existía a nivel nacional en el año 2006. Se puede observar una perdida acelerada versus una lenta recuperación de los recursos forestales, por lo tanto no hay un equilibrio en el manejo de dichos recursos en un país con un gran potencial forestal. En el departamento de Jutiapa, los silvicultores desconocen sobre las micorrizas y sus beneficios, los pocos productores de plantas forestales de la región que utilizan micorrizas en los viveros manejan este hongo benéfico de una forma empírica e ineficiente. Por lo que es necesaria la implementación de técnicas de inoculación de micorrizas adecuadas que garanticen la colonización de las raíces de las plantas forestales. Las plantas micorrizadas tienen mayores probabilidades de sobrevivir en campo definitivo disminuyendo así el número de plantas muertas en el trasplante, por lo tanto se mejora la calidad de la planta forestal aumentando así la eficiencia en las reforestaciones. Con el fin de contribuir a mejorar esta situación, el presente trabajo tuvo como objetivo determinar la eficiencia micorrícica de las cepas de hongos Pisolithus tinctorius y Scleroderma citrinum aplicados a diferentes dosis y su implicación en la mejora del crecimiento y desarrollo de plantas de Pinus oocarpa en la etapa de vivero. Para ello, se tomaron datos cuantitativos como porcentaje de colonización, peso fresco del sistema radicular, altura, diámetro del tallo, tiempo para trasplante a campo definitivo, las cuales se compararon con un tratamiento contraste (bioestimulante radicular) y un testigo absoluto. Los datos se analizaron por medio de un análisis de varianza, con un nivel de significancia de 0.01 y 0.05, así como la prueba múltiple de medias de Tukey. La investigación se inicio en el mes de diciembre del año 2011 y culmino en el mes de junio del año 2012, en la aldea San Francisco, Jutiapa, Guatemala. Con este estudio, se ofrece una alternativa para el mejoramiento de viveros forestales y contribuir a la reforestación y mejora de plantaciones en el departamento de Jutiapa. 1 II. MARCO TEORICO 2.1 EL CULTIVO DEL PINO 2.1.1 Clasificación taxonómica Cuadro 1. Clasificación taxonómica del pino oocarpa. Categorías taxonómicas Reino División Clase Orden Familia Género Especie (Paiz, 1994). Definición por categoría Plantae Pinophyta Pinopsida Pinales Pinaceae Pinus Pinus oocarpa 2.1.2 Descripción botánica Árbol monoico, de copa irregular con ángulo de ramificación variable, ramas finas y relativamente ralas. Alcanza alturas de hasta 45 mts y 0.60 mts de diámetro. En condiciones medioambientales óptimas, puede lograr crecimientos anuales de 1 a 1.5 mts en altura y de 0.18 a 0.20 mts en diámetro. Las hojas son acículas de 0.14 a 0.25 mts de largo y hasta 1.5 mm de ancho, con 3 a 8 canales resiníferos normalmente septales, de color verde brillante, erguidas, gruesas y ásperas, con los bordes finamente aserrados, unidas en grupos de cinco. Las vainas de los fascículos son persistentes, oscuras de 15 a 25 mm de largo, Los estróbilos masculinos son estaminados, de 1 a 3 cms de largo por 1 cm de ancho y los estróbilos femeninos si son de mayor tamaño y se producen en el extremo de las ramas en cantidad mucho mejor que los masculinos (Montesinos, 1995). La madera presenta una ligera diferencia entre albura y duramen. La albura de color amarillo cremoso y el duramen café pálido. Textura fina, con brillo de mediano a alto, veteado pronunciado, con anillos de crecimiento visibles. Su peso específico varía de 0.51 a 0.55 g/ cm3, moderadamente pesada. Es fácil de preservar, secar y trabajar. Moderadamente resistente a la pudrición blanca y café y resistente al ataque de termitas. Es utilizada en construcción en general, muebles, ebanistería, molduras, paredes interiores, artesanías y papel. Las flores son pequeñas, inflorescencias terminales en la parte superior de la copa, y las masculinas en las ramas inferiores. Los frutos son conos ovoides, de 5 a 10 cm de largo y de 5 a 8 cms de diámetro, a veces más largos, de color café oscuro, lustroso, con escamas leñosas. Se agrupan de 2 a 3 en las ramas. 2 Las semillas son pequeñas, triangulares, de color café oscuro, de 4 a 7 mm de longitud; con alas de 10 a 12 mm de largo, articulares y engrosadas en la base, donde se unen a la semilla. Poseen de 5 a 7 cotiledones (Paiz, 1994). 2.1.3 Sistema radicular Según Meléndrez (2010), la raíz del pino es de tipo típica, radicular, pivotante, axonomorfa (es cuando la raíz principal es mucho más grande que las secundarias), porque se origina de la radícula del embrión y tiene forma definida en donde se observa un eje principal y de él, salen los ejes secundarios. Tiene un profundo eje o raíz principal con abundantes ramificaciones o raíces secundarias, es un órgano subterráneo en las coníferas, especializado en: Fijación de la planta al substrato, absorción de agua y sustancias disueltas, transporte de agua y solutos a las partes aéreas. A continuación se definen las zonas de la raíz: a) Caliptra, cofia o pilorriza: protege al meristemo evitando el contacto con partículas sólidas del suelo y evitando lesiones. A pesar de que continuamente se forman nuevas células en la parte profunda de la caliptra, ésta no aumenta de tamaño porque las células externas se desprenden, se descaman, por gelificación de las laminillas medias. Las células externas juegan el papel de lubricante que facilita la penetración de la raíz en el suelo. Entre la caliptra y la protodermis las paredes se vuelven mucilaginosas, facilitando la separación de la caliptra de los lados de la raíz en crecimiento se encuentra en el ápice protegiendo al meristemo apical (Meléndrez, 2010). b) Zona de crecimiento o alargamiento: Zona glabra de 1-2 mm longitud. c) Zona pilífera: Región de los pelos absorbentes. d) Zona de ramificación: Región sin pelos, donde se forman las raíces laterales. Se extiende hasta el cuello, que la une al tallo. El extremo de la raíz está revestido de mucigel, envoltura viscosa constituida por mucílago (polisacáridos), que la protege contra productos dañinos, previene la desecación, es la interface de contacto con las partículas del suelo y proporciona un ambiente favorable a los microorganismos (Meléndrez, 2010). . 3 Figura 1. Partes del sistema radicular. 2.1.4 Hábitat Su rango latitudinal varía entre los 600 a 1,200 msnm, con precipitaciones mínimas anuales de 650 mm y una época seca de cinco a seis meses, con temperaturas de 13 a 23 °C. En condiciones naturales se encuentra creciendo sobre suelos erosionados, delgados, arenosos, bien drenados, ácidos a neutros pH de 4.5 a 6.8, de baja fertilidad, derivados de materiales de origen volcánico antiguo, con un alto contenido de cuarzo (Montesinos, 1995). 2.1.5 Recolección de semilla y rendimientos La maduración de los conos generalmente ocurre después de la polinización (de enero a marzo), eso facilita la apertura de los conos por la presencia de altas temperaturas (época seca). La maduración de los conos no es uniforme sino escalonada. La época de mayor diseminación ocurre de marzo a mayo en América Central. Los conos aun cerrados deben ser recolectados directamente del árbol, cuando presentan una coloración medio verde a café canela. Se cortan, con tijeras podadoras, las ramas conteniendo los conos, evitando el daño a las ramas frágiles. Un cono contiene aproximadamente 36 semillas y un árbol contiene en promedio 112 conos. Los rendimientos usuales varían de 0.25 a 0.50 kg de semillas por árbol (Paiz, 1994). 4 2.1.6 Procesamiento de frutos y semillas Después de recolectados los conos son transportados en sacos de yute a un lugar donde puedan ser extendidos sobre lonas a la sombra para permitir su postmaduración. Luego se secan los conos al sol en tarimas. Una vez abiertos se extraen las semillas golpeándolas. La semilla pasa a una desaladora y luego la mezcla de semillas, alas y basura son pasadas a una limpiadora con el objeto de eliminar las impurezas. Finalmente se homogeniza el lote y se seca a un nivel de humedad adecuado para su almacenamiento, exponiendo las semillas al sol y removiéndolas constantemente (Salazar y Boshier, 1989). 2.1.7 Calidad física y germinación Generalmente un kilogramo contiene típicamente entre 40,000 y 78,000 semillas. Se han reportado porcentajes de germinación de 70 y 90% y porcentajes de pureza de 90 a 99%. La germinación es epigea y se inicia a los siete días después de la siembra y finaliza a los 17 días. Se reportan porcentajes de germinación superiores a 80%. Las semillas son ortodoxas y pueden almacenarse por 5 a 10 años a 3 a 4ºC y humedad del 6 a 9% en recipientes herméticos. A temperatura ambiente, la semilla permanece viable por 4 a 6 semanas (Salazar y Boshier, 1989). 2.1.8 Manejo de la especie en vivero Las semillas pueden sembrarse directamente en bolsas plásticas, con 1 a 2 semillas por bolsa, o en bancales germinadores. Durante este periodo se requiere sombra permanente; utilizando para ello las acículas de pino. Aunque las semillas no requieren tratamientos pregerminativos, se pueden sumergir en agua por 12 a 24 horas antes de la siembra, para acelerar la germinación. El riego debe de ser diario durante el proceso de germinación y transplante, que se hace a los 22 días. Luego se cambia el régimen a un día de por medio, hasta que las plántulas alcancen 25 cm, altura adecuada para ser llevadas al campo. El sustrato debe de tener tres partes de tierra y una de arena (Salazar, et al., 1989). 2.1.9 Problemas fitosanitarios En análisis fitosanitarios a lotes de semillas se reportan hongos como: Trichothecium roseum (50%), Asrpergillus flavus (15%), Penicillium sp. (3%), Pestalotiopsis sp. (10%) Phomopsis sp. (6%). Los frutos en el árbol son atacados por Cronartium conigenun, hongo que puede causar pérdidas en la cosecha de semillas. En los viveros son comunes los hongos que causan mal del talluelo (damping – off) y fusariosis, como tratamiento preventivo es recomendable realizar una adecuada desinfección y desinfestación del sustrato a utilizar en el vivero (Paiz, 1994). 5 2.2 CALIDAD DE PLANTA FORESTAL Es la capacidad que tiene una plántula para desarrollarse y generar una planta con vitalidad propia, como resultante esta la integración de numerosas características fisiológicas y morfológicas en la planta obtenidas en vivero, que controlan las posibilidades de desarrollo y crecimiento posterior de las plantas en campo definitivo (Gonzales, 2001). El éxito de una plantación forestal empieza en el vivero. El material vegetal es responsable en el largo plazo del cumplimiento de los objetivos trazados en un proyecto forestal. La fase de vivero resulta esencial por ser el punto de partida, además de ser el único momento en el que es posible realizar un control sobre algunas variables del proceso que afectan a la producción de planta de calidad (Landis, 1998). Desde los punto de vista anterior se pude resumir que calidad de planta forestal es la relación directa de la calidad morfológica (medible por estándares de altura, diámetro del fuste del tallo, parte aérea, sistema radicular), con la calidad biológica (basada en el porcentaje de colonización de la micorriza) que actúan en conjunto con la finalidad de obtener el mejor desarrollo vegetativo en la planta forestal (Rodríguez, 2001). Es evidente que la capacidad de pegue de un planta forestal en campo definitivo es gracias al crecimiento de las raíces, por lo tanto hay que potenciar el sistema radicular para dotarlo de una arquitectura y una capacidad de almacenamiento de reservas (Ortega, 2001). 2.3 MICORRIZACION Según Mikola (2005), define que es la inoculación natural o artificial de hongos a las raíces de las plantas. Bran (1998), presenta las siguientes ventajas: a) aumento del área del suelo en contacto físico con la micorriza (raíz e hifas); b) aumento de la movilidad, a través de las hifas del hongo, de los minerales del suelo en las regiones próximas a la raíz; c) incremento de la actividad biológica de la rizosfera, acelerando los procesos de mineralización y reciclaje de nutrientes. Micorrizacion, es la inoculación controlada de las especies de hongos directamente a los viveros forestales. Existen tres tipos de inoculo, suelo con propagulo infectado de alguna especie, esporas de hongos y los micelios. Mikola (2005), menciona que se han desarrollado métodos y técnicas específicas para la micorrizacion que no necesitan conocimientos extraordinarios, para los viveristas. 6 Consisten en prácticas como la infección espontanea provocada, donde se utiliza la tierra vegetal como inoculo, plantas micorrizales, cultivos puros y cuerpos fructíferos. Dentro de las técnicas de micorrizacion más comunes y que son factibles a nuestro medio. Entre las que se tiene contemplado están: a) sustrato biológico; b) germinación de semillas en plantaciones establecidas o en bosques naturales de coníferas; c) utilización de hojarasca de confieras; e) utilización de restos de hifas o esporas del hongo. Las micorrizas tienen una gran importancia como auxiliares eficaces de las especies forestales. Por un lado una mejora en las condiciones nutricionales de las plantas con el correspondiente aumento de crecimiento (altura, diámetro de tallo); y por otro la planta adquiere defensas físicas y químicas que la protegen de la acción de los agentes patógenos (Urizar, Flores y Rodríguez, 2000). En pinos, es importante una inoculación temprana de micorrizas en el vivero, así la micorrizacion contribuiría a la planta de pino en una forma importante cuando se establezcan en campo definitivo, ya que en condiciones naturales la micorriza puede ser baja o nula o simplemente las especies de hongos presentes en el suelo no sean compatibles con la especie (Carrillo, 1999). Rodríguez (2001), manifiesta que el número de muertes de plantas por causas abióticas o bióticas, tras ser colocadas en el campo, es muy bajo en el caso de plantas micorrizadas, lo que induce a pensar en una protección debida a la micorrización. 2.3.1 Ciclo biológico de los macromicetes (hongos superiores). Según Mikola (2005), en todos los macromicetes distinguimos dos partes distintas: micelio y carpóforo: a) El micelio, formado por una serie de filamentos o hifas, en general de color blanco, que vive bajo tierra entre el humus o rodeando raíces, sobre hojas o madera muerta o incluso otros hongos, plantas o animales. Constituye la parte vegetativa del hongo. Estos filamentos o hifas crecen radial e indefinidamente en todas las direcciones, formando en algunos casos círculos completos que fueron denominados "corros de brujas" debido a su fructificación espontanea y misteriosa. b) El carpóforo o vulgarmente llamado seta. En el extremo de los micelios se desarrolla el cuerpo fructífero o carpóforo, formado en su mayoría por tejido estéril. Solo una pequeña parte del carpóforo es fértil, la zona conocida como "himenio", que corresponde con las láminas, los tubos, los aguijones, y, en ciertos casos, con una superficie lisa o ligeramente arrugada. 7 En el himenio se producen las esporas que permiten la difusión de la especie. Cuando las esporas maduran cae sobre el sustrato que puede ser el adecuado o no. En la mayoría de los casos las esporas se pierden por no encontrar unas condiciones adecuadas. Si todo le es favorable germina, produciendo un filamento finísimo (filamento primario) que al entrar en contacto con otro producido simultáneamente por otra espora con signo sexual contrario (en el mismo carpóforo se forman esporas de los distintos sexos que posea la especie) se fusionan y forman un nuevo filamento (filamento secundario) y el conjunto de filamentos o hifas recibe el nombre de micelio. De este micelio o cuerpo vegetativo del hongo se desarrolla finalmente el cuerpo fructífero, el carpóforo, que vemos en el exterior y que recogemos. Un solo carpóforo produce decenas de millares de esporas que caen cuando están maduras y si concurren las condiciones necesarias comienza un nuevo ciclo (Mikola, 2005). 2.3.2 Micorrizacion natural La micorrizacion natural, como su nombre lo indica se da naturalmente, ya que dependiendo a la especie se dará la micorrizacion sin ninguna necesidad de inoculación, ya que son micorrizogenos que son nativos o que ya están inoculadas en la semilla, entre estas especies esta el Ciprés (Mikola, 2005). Los hongos al carecer de clorofila, no pueden formar sus elementos nutritivos utilizando la energía de la luz solar, como ocurre con las plantas verdes, por lo cual se ven obligados a vivir a expensas de otros organismos, si el micelio está íntimamente unido a las raíces de ciertas plantas formando una verdadera simbiosis, que favorece tanto al hongo como a la planta, decimos que esta simbiosis la constituyen las "micorrizas". En la simbiosis micorriza el hongo obtiene el exceso de azucares de reserva, básicamente almidón, de las raíces de las plantas. Sin embargo a su vez permite a la planta, a través de la unión del micelio a las raíces aumentar enormemente la extensión del aparato radical (Mikola, 2005). 2.3.3 Micorrizacion artificial Según Mikola, (2005), existen especies, que no tienen esa capacidad de simbiosis natural, o que son especies exóticas que necesitan ser inoculadas artificialmente, para esta práctica es de mucha importancia la elección del hogo a trabajar, por lo que se debe de tomar en cuenta lo siguiente: Su actitud para formar micorrizas. Su capacidad para favorecer el crecimiento de la planta. Su resistencia a otras micorrizas, evitando ser desplazado. Su aptitud a formar nuevas micorrizas en las raíces recién formadas. 8 La micorrizacion artificial de especies forestales obtenidas mediante reproducción vegetativa, es una línea de investigación que se debe considerar como un paso más en los procesos de micorrización de especies forestales. Mediante la reproducción vegetativa por estaquilla, se logra el mantenimiento de los genotipos de la planta de la que proceden dichas estaquillas. De esta forma se pueden conservar caracteres tales como, producción de frutos o madera, resistencia a enfermedades, etc. Así se puede, mediante la micorrización posterior de las estaquillas ya enraizadas, lograr un gran número de plantas en un corto tiempo, con un gran interés en los genotipos a considerar (Mikola, 2005). 2.4 METODOS DE MICORRIZACION Según Mikola (2005), por lo general, los hongos micorrizogenos no son exigentes en cuanto a sus especies hospedantes. Si se introduce una especie arbórea en una nueva zona sin sus simbiontes micorrizales ordinarios, puede en un principio desarrollar micorrizas con algunos hongos de la región; más tarde, sin embargo, esos hongos son sustituidos por simbiontes más específicos, que son introducidos deliberadamente o que llegan incidentalmente. 2.4.1 Tipos de inóculos a) El inóculo bruto Se utiliza tanto en hongos endomicorrícicos como ectomicorrícicos y consiste básicamente en suelo impregnado con propagulos de una especie o ecotipo determinado de hongo (esporas, micelio, raíces con vesículas y arbusculos, etc.) y se caracteriza por su grado de infectividad suele ser elevado y su manipulación sencilla, lo que le confiere un considerable interés de aplicabilidad (Mikola, 2005). En el caso de los hongos endomicorricicos, se utilizan suelos de diversas texturas o sustratos (turbas), mezclados con arena, o arcilla expandida con algo de materia orgánica, esterilizándose antes de incorporar los propagulos del hongo deseado y la planta hospedante. La imposibilidad de cultivar estos hongos en el laboratorio y por lo tanto de producir micelio puro en cantidades significativas, debido a su obligado biotropismo de dependencia respecto al hospedante hace que se reproduzca en contenedores junto a la planta (Mikola, 2005). La utilización de hongos ectomicorrícicos se utiliza entre plántulas producidas en bolsas de plástico y cultivos a raíz desnuda. En el primero el suelo forestal es mezclado con otros suelos más o menos arenosos y esta mezcla se lleva para el cultivo de las plantas. En el segundo, la tierra se vierte sobre el propio suelo del vivero con que se mezcla. 9 Este método aparte de acarrear repetidas extracciones de tierra en el momento, hecho que choca con la idea generalizada de conservación del suelo, presenta problemas de tipo biológico como son la posible introducción de malas hierbas y también de patógenos que afectan a la salubridad del vivero, además de ser la cantidad y la calidad de inoculo introducida desconocida y tremendamente variable de unos años a otros .Es por eso que además en la micorrizacion controlada con hongos formadores de ectomicorrizas se utilizan en otros tipos de inoculos (Mikola, 2005). b) El inóculo esporal Se trata de suspensiones de esporas en agua destilada estéril y cuyas esporas se obtienen a partir de las esporas de los hongos, o bien a partir de fragmentos de himenio o gleba (según las especies utilizadas) triturados con agua. Para preparar estas suspensiones es suficiente recoger carpoforos maduros (no putrefactos), limpiarlos con un pequeño cepillo para quitarles la posible tierra que lleve adherida, trocearlos y directamente triturarlos con una batidora domestica, con agua destilada y estéril hasta obtener una suspensión homogénea (Mikola, 2005). Una vez obtenida la suspensión, la aplicación del inoculo esporal puede realizarse directamente sobre las plántulas mediante cualquier sistema que nos permita distribuir más o menos homogéneamente las disoluciones. Se deberán realizar varias tandas de inoculación (3 o 4 veces), espaciadas entre sí unas dos semanas, para asegurar la correcta micorrizacion de las plántulas. Inmediatamente después de cada una de estas aplicaciones es importante regar las plántulas durante unos minutos, a fin de que las esporas que hayan quedado adheridas a la parte aérea de la planta caigan pronto sobre el sustrato, donde deben germinar (Mikola, 2005). Conviene realizar el tratamiento en el momento de la siembra o en el de la germinación de las semillas, para dar tiempo a las esporas que también germinen y desarrollen su micelio y las dosis totales de aplicación variaran según la especie hospedante. Este sencillo método de micorrizacion controlada en vivero puede ser aplicado fácilmente por los viveristas, pues no requiere tecnología sofisticada, sino unos mínimos conocimientos micologicos para seleccionar bien las especies fúngicas adecuadas, aunque tiene sus inconvenientes, como son la estacionalidad de la fructificaciones de los hongos o la viabilidad temporal del propio inoculo aunque los porcentajes de micorrizacion con el hongo deseado son muy altos, ya que la cantidad de propagulos incorporados al sustrato son suficientemente elevadas (Mikola, 2005). c) El inóculo miceliar Consiste en la producción de inoculos en el propio laboratorio; el cual se puede obtener a partir de varias fuentes: por aislamiento de cultivos de tejidos fúngicos extraídos directamente de los carpoforos, por germinación In Vitro de esporas, o por cultivo del micelio a partir de la propia estructuras micorricicas. 10 Su fabricación puede resultar complicada para la persona no iniciada en la manipulación de técnicas microbiológicas y es el que mayor esfuerzo requiere por los viveristas, aunque es más efectivo en cuanto al tiempo y porcentaje de micorrizacion y el más seguro en cuanto a introducción de otros organismos no deseados, etc. (Mikola, 2005). 2.4.2 Técnicas de Inoculación Se describe varias técnicas entre ellas están: a) La tierra vegetal como inóculo La tierra vegetal de los montes naturales, plantaciones o viveros es el tipo más ampliamente utilizado de inoculo. Las técnicas para aplicar el inoculo de tierra vegetal varían según las practicas de vivero. Si las plantitas se cultivan en tierra natural, la primera inoculación se suele efectuar extendiendo una capa delgada de tierra micorrizal de 1 a 2 cm de espesor, que se mezcla con la tierra superficial. Ordinariamente no se requieren luego mas inoculaciones (Mikola, 2005). La tierra vegetal como inoculo micorrizal tiene sus ventajas y sus inconvenientes. Entre las ventajas principales se cuenta la gran facilidad y seguridad con que se puede efectuar la inoculación. Puede resultar difícil mantener los hongos en condición viable durante un largo transporte; en cambio, cuando se ha introducido ya el inoculo, puede propagarse y distribuirse rápidamente. Cuando el vivero se halla cerca de plantaciones existentes, pueden utilizarse grandes cantidades de inoculo, lo que garantiza una rápida y pareja infección de todas las plantitas. Cuando el inoculo procede de masas naturales o de plantaciones sanas y florecientes, contiene una población equilibrada de las diferente especies de hongos micorrizogenos, siempre que, desde luego, no hayan muerto algunas especies durante el transporte. La tierra micorrizante de los viveros es a su vez un elemento muy homogéneo para inocular nuevos semilleros o incluso nuevos viveros. El desmesurado volumen, de la tierra vegetal necesaria para la inoculación, es tal vez el mayor inconveniente técnico del método. También hay razones biológicas por las que el ejemplo de inoculo detiene indiscriminadamente todas las especies fúngicas y otros organismos del lugar de donde se toma. Puede contener también parásitos y enfermedades (Mikola, 2005). El riesgo de introducir enfermedades es bastante ligero cuando la tierra se lleva de masas naturales sanas a viveros de la misma zona. Es mucho mayor el riesgo que se corre en el traslado de tierra de un vivero a otro al poderse introducir al mismo tiempo los hongos causantes de la pudrición de las plantitas y otras plagas de los viveros. El traer tierra de otros países siempre entra el peligro de introducir nuevas enfermedades. 11 Se presenta una gran dificultad para llevar inoculo micorrizal a muchos países. Para protegerse contra las enfermedades de las plantas y de los animales, la mayoría de los países establecen reglamentos de cuarentena por los que se prohíbe o restringe la importación de tierra vegetal no estéril. En realidad, la primera introducción de inoculos micorrizales en varias zonas se efectuó ilegalmente. Tal vez eso explique el por qué existe tan escasa información sobre la introducción de la infección micorrizal en muchos países (Mikola, 2005). b) Plantas micorrizales Según el método indonesio, las plantitas micorrizales o arbolillos madre se plantan a intervalos de 1 m en las eras. Al siguiente año se plantan plantitas que tengan de 6 a 8 semanas en torno a esos árboles madre con un espaciamiento de 10 x 10 cm. El color verde sano y el comienzo del crecimiento son indicios claros de que la infección se ha extendido de los arbolillos madre a las plantitas que los rodean (Mikola, 2005). Se afirma que la utilización de arbolillos madre es la única forma posible de inocular plantitas de Pinus merkusii en los viveros; han fallado los ensayos de tierra vegetal micorrizal tomada de las plantaciones de pino (Mikola, 2005). La primera introducción de infección micorrizal en muchos países se ha verificado en las raíces de plantitas vivas. Estas pueden también utilizarse para la preservación de la infección micorrizal. El empleo de plantitas micorrizales parece ser un método muy seguro de inoculación; incluso se afirma que ha dado resultado en algunos casos en que había fallado el inoculo de tierra vegetal. Como inconveniente, cabe mencionar el progreso a veces lento de la infección derivada de los arbolillos madre. En cuanto al riesgo de introducción de enfermedades, las plantitas micorrizales pueden ser más seguras que los inoculos de tierra. El estado sanitario de las plantitas en maceta puede controlarse mejor que grandes cantidades de tierra no esterilizada (Mikola, 2005). c) Cultivos puros En el plano teórico, el empleo de cultivos puros de hongos micorrizogenos seria con mucho el mejor método de inoculación. En la inoculación por cultivos puros, pueden elegirse las especies de hongos y eliminarse así todo riesgo de introducción de enfermedades (Mikola, 2005). No obstante, para un satisfactorio empleo de cultivos puros, tendría que saberse que especies fúngicas son los simbiontes más beneficiosos y cuales los menos eficaces, la forma de cultivar las especies superiores para producir suficientes cantidades de inoculo y el modo de efectuar la inoculación en las condiciones practicas de vivero o de campo. En todos esos aspectos, los conocimientos son todavía muy deficientes y, por consiguiente, en silvicultura se ha practicado poco la inoculación de cultivos puros. 12 En cambio, en muchos tipos de experimentos científicos se han utilizado ampliamente los cultivos puros. La técnica austriaca consiste en que el hongo Boletus plorans se cultiva primeramente en una solución nutriente de Moser en frascos Erlenmeyer. De los frascos los micelios se trasladan a la misma solución en tanques de 10 litros, que son aireados durante 2 o 3 horas diarias. Después de 3 o 4 meses, se vacía el líquido con los micelios en frascos de 5 litros con una mezcla esterilizada de vermiculita y turba triturada, añadiéndose una cantidad suficiente de la misma solución nutriente para humedecer el sustrato (Mikola, 2005). Una humedad y una aireación suficientes son elementos importantes para el crecimiento de los hongos. El Boletus plorans crecerá por todo el sustrato en unos meses, al cabo de los cuales el inoculo estará listo para su empleo. Del laboratorio al vivero, el inoculo es enviado en bolsas de polietileno de un tiempo no mayor de tres días antes del trasplante. El inoculo se aplica en una proporción de 3 a 4 litros por metro cuadrado y se le hace penetrar un poco en el suelo superficial, plantándose inmediatamente la plantita en la era inoculada (Mikola, 2005). El éxito de la inoculación depende también de las propiedades físicas y químicas de la tierra del vivero; en otras palabras, no basta simplemente con introducir el hongo en el suelo, sino que las condiciones han de ser adecuadas para su crecimiento. Una buena aireación, una moderada acidez, un alto contenido de materia orgánica, y la aplicación de fertilizantes fosfóricos, favorecen el crecimiento y la capacidad infectiva de Boletus ploran. La inoculación se repite, a ser posible, en cada repicado, independientemente de que la tierra haya sido inoculada antes o no. La mayor dificultad que presenta el método austriaco de inoculación es la enorme cantidad de inoculo necesario (3 litros por metro cuadrado, es equivalente a 30 metros cúbicos por hectárea) (Mikola, 2005). La inoculación de cultivo puro es el único método aceptable para estudios de rigor científico y se usa principalmente en experimentos realizados en condiciones asépticas. Sin embargo, las posibilidades de su uso práctico en el campo son todavía bastante limitadas (Mikola, 2005). d) Esporas y cuerpos fructíferos Es la inoculación micorrizica empleando esporas o cuerpos fructíferos de hongos micorrizogenos. Se recogen esporoforos nuevos y se trituran y mezclan superficialmente. En el plano teórico, el método de emplear esporas para la inoculación presenta muchas ventajas, especialmente para el envió del inoculo a grandes distancias (Mikola, 2005). 13 El peso y el volumen del inoculo seria pequeñísimo y el riesgo de introducción de enfermedades podría reducirse al mínimo. Si las esporas de los hongos micorrizogenos permanecen vivas y viables durante todo un año, incluso en condiciones secas, como se ha informado el método sería realmente fácil e interesante. En los programas de forestación por siembra directa, sería una solución ideal. Pero actualmente es poco lo que se sabe sobre la germinabilidad de las esporas de diferentes especies y sobre los factores que influyen en la germinación para poder recomendar la inoculación por esporas o esporoforos a escala de campo (Mikola, 2005). 2.5 MICORRIZAS Se derivan de las voces griegas mico = hongo y rhiza = raíz, es la asociación simbiótica entre un hongo y las raíces de la planta. Las micorrizas son hongos que viven colonizando el interior y exterior (ectomicorrizas y endomicorrizas) de las raíces de absorción de las plantas, para obtener compuestos orgánicos esenciales. En retribución, los hongos extienden largos filamentos vegetativos (micelio) dentro del suelo para extraer agua y nutrientes esenciales y compartirlos con las plantas (Solares, 2007). Las micorrizas son hongos benéficos utilizados hoy en día en una gran diversidad de cultivos. Se conoce la existencia de estos microorganismos desde hace más de un siglo, estimándose que aproximadamente el 95% de las especies vegetales conocidas establecen de forma natural y constante una simbiosis con este tipo de hongos en el suelo. Estos microorganismos benéficos son alguno de los más estudiados en la actualidad por su diversidad de especies, por las distintas formas de actuar en las plantas y en los suelos (Hernández, 2001). 2.5.1 Asociación simbiótica de las micorrizas El hongo recibe de la planta sustancias ya elaboradas como: azucares, hidratos de carbono, ácidos orgánicos, lípidos, hormonas y vitaminas. Las micorrizas son capaces de absorber, acumular y transferir los quince principales elementos nutritivos y el agua a la planta más rápidamente. Además ofrecen protección contra patógenos del suelo, incrementan la tolerancia de las plantas a la sequía, compactación, altas temperaturas del suelo, salinidad, extremos de pH, toxinas orgánicas e inorgánicas y metales pesados, reduce el gasto de energía por parte de la planta por el aumento de longevidad y cese de crecimiento de los pelos radiculares por lo que las hifas del hongo pasan a cumplir dicha función en las raíces. Estos hongos benéficos, también prolongan la vida, viabilidad y productividad del sistema radicular de la planta (Solares, 2007). 14 2.5.2 Tipos de micorrizas a) Ectomicorrizas: Están formadas por casi todos los grupos de Basidiomicetos, Ascomicetos, Zigomicetos y Ficomicetos. Estas micorrizas se caracterizan por la formación de una estructura denominada manto, compuesta por hifas del hongo densamente agrupadas que envuelven las raicillas finas del huésped (Solares, 2007). b) Endomicorrizas Se encuentran en el grupo de las Chytridiomycetos y se caracterizan por un manto muy reducido o ausente, red de Hartig bien desarrollada y penetración de las hifas en las células del huésped. Además son las más abundantes en la naturaleza y se asocian principalmente a plantas herbáceas y arbustivas, desde cultivos agrícolas hasta árboles frutales (Solares, 2007). c) Micorrizas arbusculares Están provistas de manto, hifas de proyección externa y, normalmente, red de Hartig bien desarrollada con penetración intracelular (Solares, 2007). 2.5.3 Funciones y beneficios de las micorrizas Solares (2007), menciona que las micorrizas actúan a nivel de la raíz produciendo una plántula más sana ya que el micelio del hongo realiza las siguientes funciones: Consume los exudados de las raíces compitiendo con los patógenos, no permitiéndoles obtener alimento. Cada punto de unión con la raíz libera antibióticos. Recubre la raíz protegiéndola de hongos y bacterias. Libera hormonas de crecimiento (auxinas, citoquininas, giberalinas), aumentando el volumen radical y favoreciendo el enraizamiento de las plantas. Tiene mayor superficie de acción que las raíces en la captura de nutrientes y agua. Es ampliamente conocida la multitud de ventajas que tiene una planta micorrizada con respecto a una que no lo esté. Según Solares (2007), entre estas ventajas, se encuentran: Contribución a la nutrición mineral de la planta, en especial a su aporte de fósforo, por absorción, translocación y transferencia; en la nutrición nitrogenada de la planta, y en la adquisición de otros nutrientes como zinc y cobre. 15 Y se considera que probablemente, podrían translocar potasio, calcio, magnesio y azufre. Control biológico para algunos patógenos provenientes de suelo, e incremento de la tolerancia de la planta a patógenos. Efecto positivo sobre el desarrollo y distribución de biomasa. Mejoramiento de la tolerancia a condiciones de estrés hídrico y salinidad. Influencia sobre la fotosíntesis de la planta hospedera. Producción de hormonas estimulantes o reguladoras de crecimiento vegetal. Incremento en la relación parte aérea / raíz de la planta micorrizada. Aportes en recuperación de suelos por ser formadores de agregados del suelo. Uso potencial en suelos degradados o áridos en programas de revegetación y/o reforestación. Interacción positiva con fijadores libres y simbióticos de nitrógeno y otros microorganismos de la rizosfera. Mayor desarrollo de la aparte aérea (follaje). Mayor éxito en el trasplante 2.5.4 Las ectomirrizas en la planta Las ectomicorrizas son una asociación mutualista entre hongos superiores y plantas Gimnospermas y Angiospermas pertenecientes a ciertas familias. Consiste de un sistema de micelio en el suelo unido a las raíces micorrizadas y estructuras de almacenamiento o reproducción. Las raíces ectomicorrícicas se caracterizan por la presencia de un manto de hifas que cubre las puntas de las raíces más finas y una red de hifas entre las células epidérmicas o células corticales conocida como red de Hartig (Salas, 2004). La presencia del hongo en las raíces modifica su morfología, promoviendo su bifurcación, ramificación y ensanchamiento y aumentando con esto su superficie de absorción. Las hifas que se proyectan al exterior de la raíz exploran un volumen mayor de suelo, algunas especies pueden formar cordones miceliares o rizomorfos, los cuales tienen una mayor capacidad exploratoria y pueden tolerar condiciones adversas más fácilmente y su periodo de vida es más largo que el de las hifas individualizadas. Los pelos radicales ectomicorrizados sobreviven por más tiempo que los pelos no micorrizados alcanzando edades hasta de un año (Salas, 2004). Las ectomicorrizas se pueden reconocer mediante un examen visual del micelio interno y externo que son característicos de diferentes hongos, por el color y por cambios del crecimiento y del patrón de ramificación radical. Sin embargo, es mejor confirmar el diagnóstico mediante observaciones al microscopio. Los cuerpos fructíferos se utilizan para la identificación de los hongos y como fuente de inóculo. Son los llamados esporocarpos, basidiocarpos, ascocarpos, setas, trufas, etc., son estructuras reproductivas relativamente grandes formadas por Basidiomicetes o Ascomicetes (Salas, 2004). 16 También forman esclerocios que son estructuras de almacenamiento producidas en el suelo por algunos hongos (Salas, 2004). Los árboles con asociaciones ectomicorrícicas son dominantes en bosques de coníferas, en regiones boreales frías o alpinas, y muchos bosques de hoja ancha en regiones templadas o mediterráneas, pero también se presentan en sabanas tropicales o subtropicales o en bosques lluviosos. La mayoría de los hospederos de ectomicorrizas son árboles o arbustos pero existen asociaciones formadas por unas pocas plantas herbáceas. Los hongos ectomicorrícicos contribuyen significativamente con la biomasa de los ecosistemas de bosque. Las hifas de los hongos micorrícicos se encuentran extensamente distribuidas por el suelo y tienen una gran contribución en el ciclaje y absorción de nutrimentos en los ecosistemas de bosques. Las hifas de los hongos ectomicorrícicos tienen capacidad saprofítica, pueden absorber fósforo y nitrógeno de fuentes inorgánicas y orgánicas (Salas, 2004). A diferencia de las micorrizas arbusculares los hongos ectomicorrícicos pueden aislarse y cultivarse en medios de cultivo axénicos, para esto se pueden utilizar los cuerpos fructíferos o bien raíces micorrizadas, esclerocios, rizomorfos y esporas (Salas, 2004). Figura 2. Raíces micorrizadas y no micorrizadas: a continuación se describen las imágenes: 1a) se observa las raíces en el cepellón, 1b) raíces con micorrizas, 1c) formas de orquetas y coraloides de ectomicorrizas, 1d) raíces sin micorrizas. (PHC, 2008). 17 2.5.5 Factores que afectan el desarrollo de una buena micorrización Existen factores como el agua, la temperatura, pH y la fertilización que son determinantes para lograr una buena micorrización. En saturación de agua, las plantas desarrollan un tipo de raíces gruesas y carnosas (raíces de agua) que actúan como verdaderas esponjas de acumulación y no producen raíces micorrizables (Reyes, 2004). Otro factor es la temperatura que afecta en menor medida a la viabilidad del hongo, y por lo tanto, al proceso de micorrización. El rango de temperatura en el que pueden sobrevivir los hongos micorrícicos es amplio, oscilando entre los 0 y 38 grados centígrados, aunque esto depende evidentemente de la especie (Reyes, 2004). El pH del suelo y el uso de especies vegetales o fúngicas determinadas, no es un factor crítico para el proceso de micorrización. Es cierto que cada hongo tiene un óptimo de crecimiento a un determinado pH, pero su viabilidad suele estar asegurada en un amplio rango que va de cuatro a seis (Reyes, 2004). En cuanto al uso de fertilizantes, conviene utilizar soluciones bajas en fósforo, nitrógeno y potasio, evitando cualquier elemento contaminante, metales pesados, fungicidas, herbicidas, etc., debido a que tendrá un efecto negativo en la viabilidad del hongo y de la planta, por consiguiente sobre el proceso de micorrización (Reyes, 2004). 2.6 RIZOBACTERIAS COMO POTENCIALIZADOR EN EL EFECTO DE LAS MICORRIZAS Delgado (2002), indica que, de acuerdo a las experiencias realizadas desde hace unos años en plantas forestales, Estas bacterias potencializan el efecto de las micorrizas ya que existe una estimulación directa. En inoculaciones conjuntas de la rizobacteria Azotobacter con ectomicorrizas, encontraron que la infección micorrízica se incrementó con la presencia de esta bacteria, la ectomicorriza es favorecida con una mayor producción de esporas. 2.7 ESTUDIOS REALIZADOS CON ECTOMICORRIZAS En Barcelona España, estudios de inoculación controlada con hongos ectomicorrícicos en la producción de planta destinada a repoblaciones forestales, publican el siguiente resultado: Principalmente con coníferas inoculadas con hongos de los géneros: Scleroderma citrinum y Pisolithus tinctorius, demuestran que la micorrización controlada con hongos seleccionados mejora los procesos de repoblación y revegetación en distintas situaciones ambientales, como: el establecimiento de masas en suelos forestales productivos, tanto con especies autóctonas como con especies exóticas de rápido crecimiento, la repoblación de suelos agrarios abandonados, o la revegetación de suelos áridos de la zona mediterránea (Pera y Parladé, 2005). 18 En la universidad de Murcia España campus Espinardo, en la facultad de biología en el departamento de biología vegetal, los biólogos, llevaron a cabo una investigación de micorrizacion controlada en Pinus Halepensis en vivero en función del tipo de inóculo y técnicas de cultivo, con el fin de mejorar la calidad de la planta para reforestación inocularon las ectomicorrizas: Rhizopogon roseolus, R. rubescens varo ochraceous, Suillus mediterraneensis, Pisolithus tinctorius. En donde P. tinctorius fue el hongo que mostró una mejor capacidad colonizadora en todas las condiciones ensayadas, obteniéndose incluso niveles del 100% de planta micorrizada con inóculo miceliar en sustrato sólido, lo que lo convierte en un hongo muy apropiado para inoculación en vivero ( Honrubia, Díaz y Gutiérrez, 2009). Estudios realizados en la Universidad de San Carlos de Guatemala, inoculaciones en Pinus caribaea con cepas Pisolithus tinctorius 17.07.98 y Scleroderma sp. 167.97 ectomicorrizas originarias de Poptún, departamento de El Petén, si son efectivas en la producción de micorrizas e influyen notoriamente en el desarrollo de las plantas inoculadas (Reyes, 2004). 2.8 BENEFICIOS DE LA ECTOMICORRIZAS EN COMPARACIÓN CON LOS BENEFICIOS DE LOS BIOESTIMULANTES RADICULARES COMERCIALES La fisiología de la planta ectomicorrizada cambia completamente cuando se asocia al hongo. Mediante el micelio externo, el contacto entre las raíces y el medio se incrementa considerablemente. Un centímetro de raíces tratado con un bioestimulante radicular explora 1-2 cm3 de suelo; con micorrizas aumenta 5-200 veces. Normalmente el volumen de suelo es de 12-15 cm3 colonizado por el inóculo de micorrizas (excepcionalmente se ha llegado a 200 cm3) (Micología Forestal, 2013). Al aumentar el volumen de suelo explorado por las micorrizas, aumenta la eficiencia de captación de nutrientes del suelo. Las micorrizas extraen el fósforo del suelo disponible pero indirectamente afectan a los procesos de solubilización y mineralización. Existen otros efectos producidos por la micorriza entre los que destacan un aumento de la resistencia de la planta micorrizada al estrés hídrico y a la salinidad, un aumento de la resistencia y/o tolerancia a determinados patógenos del suelo, un incremento de la supervivencia al trasplante y un incremento de la fijación del nitrógeno en leguminosas (Micología Forestal, 2013). Como conclusión decir que se puede plantear que los beneficios de la inoculación temprana con hongos micorrícicos repercuten en una reducción del aporte de fertilizantes y fitosanitarios, un ahorro del suministro del agua, un mayor crecimiento y producción de las plantas micorrizadas, una mayor supervivencia a las condiciones de estrés y un mejor aprovechamiento de los suelos, beneficios que no se obtienen al aplicar un bioestimulante radicular comercial (Micología Forestal, 2013). 19 III PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA 3.1 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA Y JUSTIFICACION En el departamento de Jutiapa existen pocos viveros forestales los cuales son manejados de forma artesanal y donde no hay experiencia consistente del uso de micorrizas por parte de los productores teniendo como resultado la producción de plantas forestales con poco vigor. Se tiene conocimiento que solo en un vivero se utiliza micorrizas y su fuente de inoculo es material de bosque natural que es la fuente de micorrizas más común, mientras que el resto utilizan mezclas de sustratos con materia orgánica, tierra, y arena. Por lo que es notoria la falta de conocimiento en este aspecto, por parte de los productores en el manejo de los viveros forestales. Según Álvarez (2,001), una mala calidad de planta forestal salida del vivero, incrementa el porcentaje de plantas pérdidas en campo definitivo debido a la falta de arraigo y produce una respuesta deficiente en el crecimiento de la planta. Según Ortega (2,001) las ectomicorrizas principalmente en especies forestales actúan simbióticamente con las raíces de éstas para favorecer la absorción de los nutrientes del suelo. Según Turcios (2,009), uno de los factores de manejo inadecuado más frecuente en las reforestaciones o forestaciones, es la plantación de pilones con pobre sistema radicular, esto se debe a que es una práctica común aplicar plaguicidas químicos comerciales para obtener plantas libres de patógenos en los viveros, dejando a un lado la alternativa biológica. De esta forma se eliminan también los hongos benéficos, lo que repercute en un pobre desarrollo de la planta. En viveros es común emplear medios de crecimiento artificiales como la vermiculita, perlita u otros materiales que no tienen hongos ectomicorrícicos, por lo que es necesario introducirlos. Del punto de vista conservacionista no es recomendado la extracción de micorrizas de fuentes naturales, ya que el exceso en el uso de estas fuentes contribuiría a la erosión de los suelos, por tal razón es necesario la utilización de micorrizas comerciales. Los beneficios económicos de la ectomicorrización no se suelen observar en vivero, son notorios en la plantación en campo definitivo, en donde se puede apreciar mejor absorción de los nutrientes, se reduce la cantidad de fertilizantes utilizados, se aprecia menor perdida de plantas en el trasplante de vivero a campo definitivo, aumenta la plusvalía del terreno por ser suelos fértiles. De esta manera se garantiza la calidad del producto para la posterior comercialización al salir de la etapa de vivero (Turcios, 2009). Para ello se midió la capacidad infectiva de los distintos tratamientos de las especies ectomicorrícicas Pisolithus tinctorius y Scleroderma citrinum sobre P. oocarpa. De ser positiva la respuesta de la asociación simbiótica conocer cuál es el incremento en el desarrollo de la plántula en la etapa de vivero. Dicha especie forestal es utilizada en programas de reforestación de las áreas de Jutiapa que han sido deforestadas, quemadas y abandonadas. 20 IV OBJETIVOS 4.1 GENERAL Evaluar el efecto de seis dosis de ectomicorrizas en el desarrollo de plántulas de pino (Pinus oocarpa) a nivel de vivero en la aldea San Francisco, Jutiapa. 4.2 ESPECIFICOS Determinar la capacidad de colonización de las ectomicorrizas en el sistema radicular por planta, expuesta a cada dosis. Cuantificar el peso fresco del sistema radicular por efecto de cada tratamiento. Determinar el diámetro de tallo por efecto de cada tratamiento. Determinar la altura de planta por efecto de cada tratamiento. Determinar la influencia por cada tratamiento en el periodo de tiempo de vivero a campo definitivo. Estimar la relación beneficio/costo para cada uno de los tratamientos a evaluar. V. HIPÓTESIS 5.1 HIPÓTESIS ALTERNATIVA Por lo menos un tratamiento de ectomicorrizas tendrá un efecto diferente al resto en relación al porcentaje de colonización del sistema radicular. Las diferentes dosis de ectomicorrizas presentaran diferencias significativas en el desarrollo de planta producida a nivel de vivero. 21 VI. METODOLOGIA 6.1 LOCALIZACIÓN La ubicación del vivero forestal donde se llevo a cabo la investigación se localiza en la aldea San Francisco, municipio de Jutiapa, departamento de Jutiapa; ubicada en las siguientes coordenadas: latitud 89° 53' 41.25" N, longitud 14° 16' 05.82" W, altitud 887 msnm, se ubica en una zona de vida de bosque húmedo subtropical (templado) bh-S(t), según el mapa de zonas de vida de Holdridge de la república de Guatemala (MAGA 2001). 6.2 MATERIAL EXPERIMENTAL 6.2.1 Ectomicorrizas Se utilizó un inoculante comercial (Mycor Tree® Ecto-Inyectable®) solido inyectable al suelo, que puede ser diluido en el riego o bien incorporado al sustrato. El cual contiene esporas vivas de hongos ectomicorrízicos Pisolithus tinctorius 0.75 billones de esporas por cada 100 gramos de inoculo y 39.2 millones de esporas por cada 100 gramos de inoculo de Scleroderma citrinum, además contiene 5.29 billones de rizobacterias por cada 100 gramos de inoculo, ácidos húmicos y nutrientes microbianos. 6.3 FACTORES ESTUDIADOS En la presente investigación se evaluaron seis diferentes dosis de un inóculo que contiene dos especies de ectomicorrizas las cuales son Pisolithus tinctorius y Scleroderma citrinum, debido a que las especies de ectomicorrizas utilizadas no son nativas de Guatemala, se dio la necesidad de distribuir las dosis evaluadas en un rango de 1.88 – 5 gr / planta de inoculante, para determinar la mejor dosis en los aspectos de calidad de planta de pino y adaptabilidad a nuestro medio ambiente. Se evaluó un tratamiento utilizando enraizador bioestimulante que contiene: 9% de nitrógeno, 45% de fósforo, 11% de potasio, 0.60 % de magnesio, 0.80% de azufre, 400 ppm de complejo auxinico, por cada 100 gramos de producto comercial, dicho tratamiento es el tradicional y es de origen químico, por lo que fue contrastado con los demás tratamientos de origen biológico. También se evaluó un testigo absoluto. 22 6.4 DESCRIPCIÓN DE LOS TRATAMIENTOS Para evaluar la eficiencia micorrízica de Pisolithus tinctorius y Scleroderma citrinum, se establecieron seis distintas dosis de la siguiente manera: Como dosis modal se tomo la que recomienda el proveedor de la ectomicorriza comercial la cual es de 2.5 gramos / planta, dicha dosis se evaluó junto con otras cinco dosis más del mismo producto, las cuales se distribuyeron de la siguiente manera: 25% debajo de la modal y 25%, 50%, 75%, 100% arriba de la modal respectivamente. En el tratamiento contrastado se utilizo la dosis comercial recomendada de enraizador bioestimulante, a razón de 0.5 gramos / planta de producto comercial. En el testigo absoluto no se aplicaron los hongos ectomicorrícicos y no se aplico el enraizador bioestimulante, tal como se describe en el cuadro 2. Cuadro 2. Codificación y descripción de los tratamientos evaluados Tratamiento T1 Descripción Testigo absoluto. T2 0.5 gramos / planta, de enraizador bioestimulante. T3 1.88 gramos / planta, de inoculante ectomicorrícico. T4 2.50 gramos / planta, de inoculante ectomicorrícico. T5 3.13 gramos / planta, de inoculante ectomicorrícico. T6 3.75 gramos / planta, de inoculante ectomicorrícico. T7 4.38 gramos / planta, de inoculante ectomicorrícico. T8 5.00 gramos / planta, de inoculante ectomicorrícico. Fuente: Elaboración propia. 23 Cuadro 3. Concentración de esporas de ectomicorrizas por tratamiento. Concentración de esporas por cada dosis Tratamiento T3 Dosis de inoculante 1.88 gr / planta Numero de esporas P. tinctorius 1.41 x 1010 Numero de esporas S. citrinum 73,696 x 101 T4 2.50 gr / planta 1.875 x 1010 98 x 104 T5 3.13 gr / planta 2.3475 x 1010 122,696 x 101 T6 3.75 gr / planta 2.8125 x 1010 147 x 104 T7 4.38 gr / planta 3.285 x 1010 171,696 x 101 T8 5.00 gr / planta 3.75 x 1010 196 x 104 Fuente: Elaboración propia. 6.4.1 Aplicación de los tratamientos Los tratamientos se aplicaron al momento de la preparación del sustrato. Se utilizó un sustrato base para todas las unidades experimentales; esto sirvió para que todos los tratamientos tuvieran las mismas condiciones. La proporción utilizada fue de 5:1, cinco partes de tierra negra y una parte de arena. Se peso la misma cantidad de sustrato base para todos los tratamientos, esto equivale a 227 gramos de dicho sustrato por planta, luego se incorporo la dosis por tratamiento a cada una de las unidades experimentales. Se utilizó una báscula digital para pesar la cantidad de sustrato base, enraizador bioestimulante e inoculante ectomicorrícico utilizado. 6.5 DISEÑO EXPERIMENTAL Se utilizó un diseño experimental completamente al azar, con ocho tratamientos y diez repeticiones. Se seleccionó este diseño ya que en un vivero forestal se considera tener condiciones homogéneas. Según Sitún (2,001), el diseño completamente al azar, se usa cuando se tienen condiciones uniformes u homogéneas. 24 6.6 MODELO ESTADISTICO Yij = U + Ti + Eij. Donde: Yij = variable respuesta asociada a la ij-esima unidad experimental. U= efecto de la media general. Ti= efecto del i-esimo tratamiento Eij.= efecto del error experimental asociado a la ij-esima unidad experimental Lo cual significa que la variable respuesta Yij depende de la media general (U) del efecto del i-ésimo tratamiento (Ti) y del error experimental asociado a la i-j-ésima unidad experimental (Eij) (Sitún, 2001). 6.7 UNIDAD EXPERIMENTAL La evaluación se realizó en condiciones agronómicas homogéneas, por lo que cada bolsa llena con sustrato es una unidad experimental la cual está conformada por una planta, el número total de unidades experimentales fue de 80. La medida de la bolsa de polietileno utilizada fue de 15 centímetros de alto por 5 centímetros de diámetro con un volumen de 294 centímetros cúbicos. 6.8 CROQUIS DE CAMPO El diseño se conformó por ocho tratamientos y diez repeticiones por cada tratamiento. El procedimiento más utilizado para determinar el número de repeticiones, es el de los grados de libertad del error. Grados de libertad del error (GLE) 12, GLE= t(r-1), donde t se refiere al número de tratamientos y r al número de repeticiones (Sitún, 2001). Entonces, la ecuación para determinar el número de repeticiones es: t(r-1)=12. Aplicando la ecuación para la presente investigación nos queda: 8(r-1)=12, despejamos r= 2.5. Según la ecuación de los grados de libertad del error son necesarias 3 repeticiones por cada tratamiento para los 8 tratamientos implementados. Uno de los métodos para reducir el error experimental es incrementar el número de repeticiones (Sitún, 2001). Por ello, en la presente investigación, se incrementó el número de repeticiones a diez, por cada tratamiento evaluado. Las principales ventajas de utilizar un diseño completamente al azar son: análisis estadístico fácil, permite flexibilidad en cuando a número de tratamientos y repeticiones a utilizar, si se pierden unidades experimentales no complica el análisis estadístico y nos da el máximo número de grados de libertad para el error (Sitún, 2001). 25 En el siguiente croquis de campo se presenta como aleatorización de los tratamientos, en donde: se realizó la respectiva El número es la unidad experimental (numeración 1 al 80) T1 - T8 es el número de tratamiento. 6.9 MANEJO DEL EXPERIMENTO 6.9.1 Selección de semilla Se utilizó semilla certificada la cual se obtuvo del banco de semillas forestales del Instituto Nacional de Bosques (INAB). 6.9.2 Elaboración de sustrato base Con fines experimentales se omitió la aplicación de materia orgánica ya que ésta pudo tener alguna fuente de hongos y pudo distorsionar los resultados de la investigación, por lo que la proporción utilizada en la elaboración del sustrato base fue de 5:1 cinco partes de tierra negra y una parte de arena. 26 6.9.3 Llenado de bolsas Inmediatamente después de tener preparado el sustrato para cada uno de los tratamientos, se realizo esta actividad. Una vez llenada las bolsas, se dejo el sustrato compactado y así se evitó dejar burbujas de aire que afectaran las raíces durante su desarrollo. El tamaño de la bolsa que se utilizó fue de 15 cm de alto y 5cm de diámetro con una densidad de nylon de dos milímetros. El volumen de la bolsa es de 294 cm3, con una capacidad para contener 227 gramos de sustrato, son de polietileno de color negro. 6.9.4 Siembra Al momento de tener llenadas las bolsas, ubicadas por tratamiento, y colocadas como se demuestra en el croquis de campo. En ese instante, se procedió a la siembra, se realizó una siembra directa en la bolsa, se eligió este método de siembra por ser el tradicional en el área de Jutiapa, se sembró 2 semillas por bolsa, se colocó una cobertura de paja sobre las bolsas en la etapa de pre-germinación para evitar daño en las plántulas, a los 17 días la planta germinó. A los 15 días después de la germinación de las plantas se realizó un raleo en las bolsas donde se hallaron dos plantas germinadas. Se manejó el criterio de dejar la planta más sana y vigorosa. 6.9.5 Riego Debido a la época en que se realizó la investigación se necesitó la aplicación de riego artificial. Se efectuó un riego diario en horas frescas del día, utilizando una regadera. 6.9.6 Fertilización En los viveros forestales de Jutiapa realizan dos fertilizaciones en la etapa de vivero, por lo que se realizo dos fertilizaciones utilizando una formula con alto contenido de fósforo 10-50-0, en total se aplico 240 gramos en toda la plantación (80 plantas) de dicha fórmula, equivalente a 24 gramos de nitrógeno y 120 gramos de fósforo. La primera aplicación se realizó a los 60 días después de la siembra y la segunda a los 90 días después de la siembra. Se aplicó un fertilizante foliar a los 75 días después de la siembra, con una concentración del 11.47% de nitrógeno, 8% de fósforo, 6% de potasio, 0.529 % de elementos menores, por litro de producto comercial. En total se aplico 0.34 ml de nitrógeno, 0.24 ml de fósforo, 0.18 ml de potasio, 0.01587 ml de elementos menores, vía foliar en toda la plantación (80 plantas). 6.9.7 Control de malezas El control de maleza se realizó manualmente a cada 15 días, así se evitó el desarrollo de malezas que pudieron ser perjudiciales a la planta. 27 6.9.8 Control de plagas y Enfermedades El control de plagas y enfermedades se inició desde la preparación del sustrato el cual se trató con los siguientes productos: Propineb y Carbofurán. La micorrizacion se efectuó 15 días después cuando el efecto del producto se termino con la finalidad de proteger los microorganismos evaluados. Para el control de insectos del follaje se hicieron aplicaciones de insecticidas a cada 15 días y para el control de enfermedades se aplicaron a cada 15 días fungicidas como Propamocarb y Benomil, tolerados por las micorrizas. 6.10 VARIABLES DE RESPUESTA A continuación se presentan las variables a medidas: a) Porcentaje de colonización: Se lavaron con cuidado las raíces del cepellón (cantidad de tierra adherida a las raíces de las plantas para trasplantarlas). Se observó con estereomicroscopio la formación de micorrizas en forma de orquetas y estructuras coraloides. Se comparó con aquellas raíces no micorrizadas. Para medir esta variable se hizo el conteo de raíces micorrizadas y no micorrizadas. Se aplicó la siguiente ecuación: porcentaje de colonización= Número de micorrizas / Número total de raíces. La lectura de esta variable se realizó a los cuatro meses después de la germinación. Este procedimiento se realizó en cada tratamiento y en cada repetición. b) Peso del sistema radicular en gramos (gr): Se tomó lectura a los cuatro meses después de la germinación. Una vez lavada las raíces del cepellón y secas del exceso de humedad por el lavado, se procedió a separar el sistema radicular y se pesó utilizando una balanza analítica. Este procedimiento se realizó en cada tratamiento y en cada repetición. c) Diámetro de tallo en milímetros (mm): Esta variable se midió utilizando un vernier para medir el diámetro del tallo. Se tomaron lecturas a cada 15 días después de la germinación durante cuatro meses. Este procedimiento se realizó en cada tratamiento y en cada repetición. d) Altura de planta en centímetros (cm): Esta variable se midió utilizando una cinta métrica para poder medir la longitud del tallo por planta. Se tomaron lecturas a cada 15 días después de la germinación durante cuatro meses. Este procedimiento se realizó en cada tratamiento y en cada repetición. 28 e) Tiempo de siembra a campo definitivo para cada tratamiento: El indicador en nuestro medio para identificar que la planta está lista para ser trasplantada a campo definitivo es cuando alcanza una altura de 25 centímetros, por lo que se midió identificando el tiempo desde la germinación hasta el alcance de dicha altura para cada tratamiento. Se interpolaron y extrapolaron los promedios de la lectura No. 7 y No. 8 de la variable altura de planta en centímetros, con una variación proporcional, se obtuvieron los promedios de altura de planta en centímetros para cada tratamiento desde el día 105 al día 125 de edad de la plantación, de esta manera se realizo una buena estimación del día aproximado donde cada tratamiento alcanzó la altura necesaria para ser trasplantada a campo definitivo. El método de interpolación utilizado fue lineal. Según Alemán A. V. (2012), generalmente, en la interpolación lineal se utilizan dos puntos, (xa,ya) y (xb,yb), para obtener un tercer punto interpolado (x,y) a partir de la siguiente fórmula: El método de extrapolación utilizado fue lineal. Extrapolación significa crear una línea tangente al final de los datos conocidos y extendiéndola más allá de ese límite. La extrapolación lineal proveerá buenos resultados sólo cuando se use para extender la gráfica de una función lineal aproximadamente o no muy lejana de los datos conocidos (Alemán, 2012). Si los dos puntos cercanos al punto y que serán extrapolados son , la extrapolación lineal nos da la función: f) Registro de costos: Se llevó un registro específico de costos desde la preparación del sustrato hasta el momento que la planta ya estaba lista para ser trasplantada a campo definitivo, ello permitió determinar el costo real por cada uno de los tratamientos. 29 6.11 ANALISIS DE LA INFORMACION 6.11.1 Análisis estadístico Para el análisis de las variables de respuesta se realizó un análisis de varianza para el diseño experimental completamente al azar. Para determinar si hubo o no, diferencia estadística significativa entre tratamientos para cada variable de respuesta, se utilizo la prueba múltiple de medias de Tukey, para establecer diferencias reales entre tratamientos (Sitún, 2001). Para el análisis de la variable de respuesta: Tiempo de siembra a campo definitivo para cada tratamiento, se utilizo la interpolación y extrapolación lineal, que son métodos numéricos utilizados en la estadística, que permiten encontrar datos desconocidos entre o en medio de otros datos ya conocidos, también permiten encontrar datos desconocidos más allá del limite de los datos finales ya conocidos, dichos métodos son utilizados en datos que presentan una relación lineal entre sí (Alemán, 2012). 6.11.2 Análisis económico Se determinó el tratamiento con mayor beneficio económico. Se analizaron los resultados mediante la relación beneficio / costo. a) Presupuestos parciales Se determinaron las ventajas económicas que se derivaron de hacer cambios en la producción en cada uno de los tratamientos. Se organizaron los datos experimentales y se obtuvieron los costos y beneficios de las distintas alternativas en el experimento que se analizaron (Aguirre, 1995). b) Relación beneficio / costo Se expresó la relación entre ingresos brutos y costos totales para cada tratamiento, esta relación siempre debe de estar por encima de uno, para que exista ganancia o sea factible, mientras que si es igual a uno se puede decir que se alcanzó el punto de equilibrio (Aguirre, 1995). Para el cálculo de esta relación se aplico la siguiente ecuación: B/C= Vi . Ci En donde: B/C = Relación Beneficio / Costo Vi = Valor de la producción (beneficio bruto) Ci = Egresos 30 VII. RESULTADOS Y DISCUSION 7.1 PORCENTAJE DE COLONIZACIÓN Cuadro 4. Efecto de las diferentes dosis de ectomicorrizas sobre el porcentaje de colonización en el sistema radicular. Tratamiento T3 T4 T5 T6 T7 T8 Material Dosis de ectomicorrizas, 1.88 gramos / planta Dosis de ectomicorrizas, 2.50 gramos / planta Dosis de ectomicorrizas, 3.13 gramos / planta Dosis de ectomicorrizas, 3.75 gramos / planta Dosis de ectomicorrizas, 4.38 gramos / planta Dosis de ectomicorrizas, 5 gramos / planta Media 63% 67% 77% 84% 78% 82% Determinar el porcentaje de ectomicorrización, es el parámetro más importante para evaluar la capacidad infectiva de las cepas utilizadas y garantizar la sobrevivencia de la planta inoculada al trasplante. Con lo observado en el cuadro 4 y en base a los resultados del análisis de varianza (cuadro 32), para un nivel de significancia del α = 0.05 y α = 0.01, se encontraron diferencias estadísticas significativas, en el porcentaje de colonización ectomicorrízica sobre la raíz de P. oocarpa en los tratamientos seis y ocho. Figura 3: Porcentaje de colonización radicular por tratamiento. Letras diferentes indican diferencias significativas según prueba de medias (Tukey 0.05 qα). 31 Con lo observado en la figura 3 y de acuerdo a la prueba estadística de Tukey (cuadros 38 y 44), para un α = 0.01, se encontró diferencia estadística significativa entre los tratamientos evaluados para la variable porcentaje de colonización, presentando un mayor porcentaje de colonización los tratamientos seis y ocho con 84% y 82% (figura 3) respectivamente. Estos datos son superiores en un 17% a los encontrados por Carrera Nieva & Lopez Rios (2004) con un promedio maximo del 66% de colonización ectomicorrízica en raíces de especies forestales al final de la etapa de vivero y similares a los encontrados por Salazar, M. L. (2004) con un promedio máximo del 80% de colonización de Pisolithus tinctorius y Esclerodermia sp. en Pinus caribaea. El poder de infectividad de Pisolithus tinctorius y Esclerodermia citrinum quedó probado en otro estudio al inocular micelio y esporas en Pinus maximinoi (Urizar, Flores, & Rodríguez, 2000). Parladé y Pera (1992) indican que la supervivencia de una planta después del trasplante se ve favorecida si la planta posee al menos el 50 % de micorrización. 7.2 PESO SISTEMA RADICULAR Cuadro 5. Efecto de las diferentes dosis de ectomicorrizas sobre el peso húmedo del sistema radicular. Tratamiento Material T1 T2 T3 T4 T5 T6 T7 T8 Testigo absoluto Dosis de enraizador bioestimulante, 0.5 gramos / planta Dosis de ectomicorrizas, 1.88 gramos / planta Dosis de ectomicorrizas, 2.50 gramos / planta Dosis de ectomicorrizas, 3.13 gramos / planta Dosis de ectomicorrizas, 3.75 gramos / planta Dosis de ectomicorrizas, 4.38 gramos / planta Dosis de ectomicorrizas, 5 gramos / planta Media gr 0.56 0.60 0.62 0.69 0.70 0.70 0.74 0.79 Con lo observado en el cuadro 5 y en base a los resultados del análisis de varianza (cuadro 33), para un nivel de significancia del α = 0.05 y α = 0.01, se encontraron diferencias estadísticas significativas, en el peso húmedo del sistema radicular de P. oocarpa en el tratamiento ocho. El resultado obtenido en dicho tratamiento es gracias a que la planta absorbe mayor cantidad de nutrientes a través de las micorrizas y los metabolitos que se sintetizan en las mismas, por lo cual se mejora el desarrollo radicular, manifestando así un aumento de peso en la misma (Pera, 1992). 32 Figura 4: Peso húmedo del sistema radicular por tratamiento. Letras diferentes indican diferencias significativas según prueba de medias (Tukey 0.05 qα). Con lo observado en la figura 4 y de acuerdo a la prueba estadística de Tukey (cuadros 39 y 45), para un α = 0.01, se encontró diferencia estadística significativa entre los tratamientos evaluados para la variable peso sistema radicular, presentando un mayor peso húmedo de raíz el tratamiento ocho con 0.79 gramos (figura 4). Superando en un 29% al testigo absoluto y en un 27% a los encontrados por Carrera Nieva & Lopez Rios (2004) con un promedio maximo de 0.58 gramos de peso fresco de raíces al final de la etapa de vivero en especies forestales inoculadas con ectomicorrizas. 7.3 DIÁMETRO DE TALLO Cuadro 6. Efecto de las diferentes dosis de ectomicorrizas sobre el diámetro de tallo a los 30 días después de la siembra, promedios de la lectura No. 2. Tratamiento T1 T2 T3 T4 T5 T6 T7 T8 Material Testigo absoluto Dosis de enraizador bioestimulante, 0.5 gramos / planta Dosis de ectomicorrizas, 1.88 gramos / planta Dosis de ectomicorrizas, 2.50 gramos / planta Dosis de ectomicorrizas, 3.13 gramos / planta Dosis de ectomicorrizas, 3.75 gramos / planta Dosis de ectomicorrizas, 4.38 gramos / planta Dosis de ectomicorrizas, 5 gramos / planta Media mm 1.5 1.35 1.5 1.55 1.45 1.6 1.55 1.75 33 La medición de esta variable es importante porque se debe asegurar que la planta posea un buen tallo para su sostenimiento y lograr su supervivencia a la hora de trasladarla del invernadero al campo (Arias & Gimeno, 1994). El crecimiento en el diámetro del tallo, es también un buen indicador del desarrollo total de una planta (Pullido, 1994). Con lo observado en el cuadro 6 y en base a los resultados del análisis de varianza (cuadro 34), para un nivel de significancia del α = 0.05, se encontraron diferencias estadísticas significativas, en la lectura No. 2 de la variable diámetro de tallo de P. oocarpa en el tratamiento ocho. Figura 5: Diámetro de tallo por tratamiento a los 30 días después de la siembra (lectura No.2). Letras diferentes indican diferencias significativas según prueba de medias (Tukey 0.05 qα). Con lo observado en la figura 5 y de acuerdo a la prueba estadística de Tukey (cuadros 40 y 46), para un α = 0.05, se encontró diferencia estadística significativa entre los tratamientos evaluados para la lectura No. 2 de la variable diámetro de tallo, presentando un mayor diámetro de tallo el tratamiento ocho con 1.75 mm (figura 5), superando en un 14% al testigo absoluto. 34 Cuadro 7. Efecto de las diferentes dosis de ectomicorrizas sobre el diámetro de tallo a los 120 días después de la siembra, promedios de la lectura No. 8. Tratamiento Material Media mm T1 Testigo absoluto 2.3 T2 Dosis de enraizador bioestimulante, 0.5 gramos / planta 2.2 T3 Dosis de ectomicorrizas, 1.88 gramos / planta 2.35 T4 Dosis de ectomicorrizas, 2.50 gramos / planta 2.35 T5 Dosis de ectomicorrizas, 3.13 gramos / planta 2.2 T6 Dosis de ectomicorrizas, 3.75 gramos / planta 2.25 T7 Dosis de ectomicorrizas, 4.38 gramos / planta 2.35 T8 Dosis de ectomicorrizas, 5 gramos / planta 2.35 Con lo observado en el cuadro 7 y en base a los resultados del análisis de varianza (cuadro 35), para un nivel de significancia del α = 0.05 y α = 0.01, no se encontraron diferencias estadísticas significativas, en la lectura No. 8 de la variable diámetro de tallo de P. oocarpa. Figura 6: Diámetro de tallo por tratamiento a los 120 días después de la siembra (lectura No.8). Letras diferentes indican diferencias significativas según prueba de medias (Tukey 0.05 qα). 35 Con lo observado en la figura 6 y de acuerdo a la prueba estadística de Tukey (cuadros 41 y 47), para un α = 0.01, no se encontró diferencia estadística significativa entre los tratamientos evaluados para la lectura No. 8 de la variable diámetro de tallo. Los tratamientos tres, cuatro, siete y ocho fueron los que presentaron un mayor promedio en diámetro de tallo, con 2.35 mm en común (figura 6). Superando en un 2% al testigo absoluto, en un 6% a los encontrados por Carrera Nieva & Lopez Rios (2004) con un promedio maximo de 2.2 mm de diámetro de tallo al final de la etapa de vivero en especies forestales inoculadas con ectomicorrizas y en un 36% a los encontrados por Salazar, M. L. (2004) con un promedio máximo de 1.49 mm de diámetro de tallo en plantas de Pinus caribaea inoculadas con Pisolithus tinctorius y Esclerodermia sp. 7.4 ALTURA DE PLANTA Cuadro 8. Efecto de las diferentes dosis de ectomicorrizas sobre la altura de planta a los 45 días después de la siembra, promedios de la lectura No. 3. Tratamiento Material T1 T2 T3 T4 T5 T6 T7 T8 Testigo absoluto Dosis de enraizador bioestimulante, 0.5 gramos / planta Dosis de ectomicorrizas, 1.88 gramos / planta Dosis de ectomicorrizas, 2.50 gramos / planta Dosis de ectomicorrizas, 3.13 gramos / planta Dosis de ectomicorrizas, 3.75 gramos / planta Dosis de ectomicorrizas, 4.38 gramos / planta Dosis de ectomicorrizas, 5 gramos / planta Media cm 7.84 7.91 8.08 8.51 7.85 8.05 7.65 8.86 Con lo observado en el cuadro 8 y en base a los resultados del análisis de varianza (cuadro 36), para un nivel de significancia del α = 0.05, se encontraron diferencias estadísticas significativas, en la lectura No. 3 de la variable altura de planta de P. oocarpa en el tratamiento ocho. 36 Figura 7: Altura de planta por tratamiento a los 45 días después de la siembra (lectura No.3). Letras diferentes indican diferencias significativas según prueba de medias (Tukey 0.05 qα). Con lo observado en la figura 7 y de acuerdo a la prueba estadística de Tukey (cuadros 42 y 48), para un α = 0.05, se encontró diferencia estadística significativa entre los tratamientos evaluados para la lectura No. 3 de la variable altura de planta, presentando una mayor altura de planta el tratamiento ocho con 8.86 cm (figura 7), superando en un 11.5% al testigo absoluto. Uno de los parámetros más importantes que caracteriza el crecimiento y el desarrollo de la planta así como la etapa ideal para el trasplante, permitiéndole mayores garantías de éxito en el campo, es la altura (Pullido, 1994). El aumento de altura en plantas micorrizadas está directamente influenciado por el transporte de agua y nutrientes a la planta, así como por la producción de fitohormonas en el sistema micorrícico (Arias & Gimeno, 1994). 37 Cuadro 9. Efecto de las diferentes dosis de ectomicorrizas sobre la altura de planta a los 120 días después de la siembra, promedios de la lectura No. 8. Tratamiento Material T1 T2 T3 T4 T5 T6 T7 T8 Testigo absoluto Dosis de enraizador bioestimulante, 0.5 gramos / planta Dosis de ectomicorrizas, 1.88 gramos / planta Dosis de ectomicorrizas, 2.50 gramos / planta Dosis de ectomicorrizas, 3.13 gramos / planta Dosis de ectomicorrizas, 3.75 gramos / planta Dosis de ectomicorrizas, 4.38 gramos / planta Dosis de ectomicorrizas, 5 gramos / planta Media cm 24.81 24.37 26.14 25.11 25.27 24.66 24.08 26.37 Con lo observado en el cuadro 9 y en base a los resultados del análisis de varianza (cuadro 37), para un nivel de significancia del α = 0.05 y α = 0.01, no se encontraron diferencias estadísticas significativas, en la lectura No. 8 de la variable altura de planta de P. oocarpa Figura 8: Altura de planta por tratamiento a los 120 días después de la siembra (lectura No.8). Letras diferentes indican diferencias significativas según prueba de medias (Tukey 0.05 qα). 38 Con lo observado en la figura 8 y de acuerdo a la prueba estadística de Tukey (cuadros 43 y 49), para un α = 0.01, no se encontró diferencia estadística significativa entre los tratamientos evaluados para la lectura No. 8 de la variable altura de planta, presentando un mayor promedio en altura de planta el tratamiento ocho con 26.37 cm (figura 8). Superando en un 6% al testigo absoluto, en un 26% a los encontrados por Carrera Nieva & Lopez Rios (2004) con un promedio maximo de 19.33 cm de altura de planta al final de la etapa de vivero en especies forestales inoculadas con ectomicorrizas y en un 44% a los encontrados por Salazar, M. L. (2004) con un promedio máximo de 14.68 cm de altura en plantas de Pinus caribaea inoculadas con Pisolithus tinctorius y Esclerodermia sp. 7.5 TIEMPO DE SIEMBRA A CAMPO DEFINITIVO PARA CADA TRATAMIENTO Figura 9: Grafico tiempo de siembra a campo definitivo para cada tratamiento, en base a los 25 centímetros de altura de planta que necesita la planta de P. oocarpa para la siembra a campo definitivo. 39 El periodo en el cual se debe llevar los árboles a su sitio definitivo, debe coincidir con la época de lluvias en la zona. Para la plantación deben seleccionarse plantas vigorosas, sanas, bien formadas, resistentes a la intemperie. El tamaño adecuado de la plántula para plantación es de 25 centímetros de altura (Nuñes, 1993). Con lo observado en la figura 9 y en base a los resultados de la interpolación y extrapolación de los promedios de las lecturas No. 7 y 8 de la variable altura de planta en centímetros, para el periodo de los 105 días a los 125 días después de la siembra (cuadro 50), el tratamiento ocho fue el que presento el menor periodo de tiempo para alcanzar los 25 cm de altura con un aproximado de 114 días, superando al testigo absoluto por la anticipación de 7 días aproximadamente para la siembra a campo definitivo. 40 7.6 ANÁLISIS FINANCIERO Cuadro 10. Costo Fijo, Costo Variable, Costo Total, Precio de Venta, Ingreso Bruto, Ingreso Neto, Rentabilidad y Relación Beneficio/Costo por tratamiento, de 4,444 plantas (cantidad de plantas necesarias para la siembra de una hectárea en campo definitivo) de P. oocarpa en la etapa de vivero. En base a los costos de producción de P. oocarpa en el vivero forestal de la aldea San Francisco (Cuadro 51) y a los presupuestos para cada uno de los tratamientos (Cuadros del 52 al 59). Se lograron concretar los costos fijos, variables y totales, para cada tratamiento, presentados en el cuadro 9. En el cuadro 10, se pueden apreciar las diferencias económicas encontradas para cada uno de los tratamientos aplicados. Se determino que el tratamiento que ofrece la mayor relación beneficio/costo es el tratamiento uno, con 3.0395, lo cual significa que por cada quetzal invertido se tiene una ganancia o ingreso neto de Q.2.0395. Por el contrario, el tratamiento que obtuvo el menor beneficio/costo fue el tratamiento 8, con 1.642, lo cual significa que por cada quetzal invertido se tiene una ganancia o ingreso neto de Q.0.642. Es importante señalar que con ningún tratamiento aplicado, se obtuvieron pérdidas económicas. 41 VIII. CONCLUSIONES Se demostró la capacidad de colonización de las cepas de Pisolithus tinctorius y Scleroderma citrinum para formar ectomicorrizas en el sistema radicular en plantas de Pinus oocarpa. Entre los tratamientos evaluados, si existió diferencia estadística significativa para la variable porcentaje de colonización, siendo el tratamiento seis con una dosis ectomicorrízica de 3.75 gr / planta y el tratamiento ocho con una dosis ectomicorrízica de 5gr / planta, los mejores, obteniendo promedios similares de 84% y 82% respectivamente, dichos tratamientos son estadísticamente iguales. El efecto de las ectomicorrizas en las plantas de Pinus oocarpa se manifestó en un aumento considerable en peso fresco del sistema radicular. Entre los tratamientos evaluados, si existió diferencia estadística significativa para la variable peso fresco del sistema radicular, siendo el tratamiento ocho con una dosis ectomicorrízica de 5 gr/planta, el mejor, con un promedio de 0.79 gramos. En la etapa final de vivero a los 120 días después de la siembra, no existió diferencia estadística significativa en diámetro de tallos. En la etapa final de vivero a los 120 días después de la siembra, no existió diferencia estadística significativa en altura de plantas. Bajo la metodología de interpolación y extrapolación de datos, las ectomicorrizas influyeron en el periodo de tiempo para el desarrollo de la planta de Pinus oocarpa en la etapa de vivero reduciéndose aproximadamente a 114 días con una dosis de 5 gr / planta. Todos los tratamientos fueron rentables, lo cual nos indica que con cualquier tratamiento se percibe una utilidad o ganancia. La relación beneficio – costo si presentó diferencias considerables, obteniendo una relación beneficio costo de 3.04 para el testigo absoluto y 1.64 para el tratamiento ocho. 42 IX. RECOMENDACIONES Se recomienda realizar inoculaciones de las especies ectomicorrizas Psiolithus tinctorius y Scleroderma citrinum para obtener mayores resultados en los siguientes aspectos: porcentaje de colonización de la raíz, peso fresco del sistema radicular, diámetro de tallo, altura de planta, menor tiempo en la etapa de vivero, en plantas de Pinus oocarpa. Desde el punto de vista beneficio - costo, se recomienda utilizar la dosis ectomicorrízica de 5gr / planta, por ser una dosis rentable, en la que se obtuvo una relación beneficio costo de 1.64, lo que quiere decir que por cada quetzal invertido obtendremos 64 centavos de utilidad o ganancia, con dicho tratamiento los productores de Pinus oocarpa a nivel de vivero garantizan una excelente calidad de planta, de esta forma se facilita la comercialización del producto evitando reclamos por parte del consumidor final. 43 X. BIBLIOGRAFIA Aguirre, Juan A. (1985). 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Datos de número de raíces no colonizadas y colonizadas Tratamiento 301 302 303 304 305 306 307 308 309 310 401 402 403 404 405 406 407 408 409 410 501 502 503 504 505 506 507 508 509 510 601 602 603 Numero de raíces no colonizadas 5 10 3 14 6 4 5 8 10 5 8 5 2 5 5 6 3 10 2 4 3 3 1 1 2 2 5 5 5 4 4 1 4 Numero de raíces colonizadas 12 20 9 14 9 12 12 9 10 8 11 9 6 8 9 17 10 16 7 6 9 11 17 11 12 8 6 22 5 12 16 11 10 Total de raíces. 17 30 12 28 15 16 17 17 20 13 19 14 8 13 14 23 13 26 9 10 12 14 18 12 14 10 11 27 10 16 20 12 14 Porcentaje de colonización 70.5882 66.6667 75.0000 50.0000 60.0000 75.0000 70.5882 52.9412 50.0000 61.5385 57.8947 64.2857 75.0000 61.5385 64.2857 73.9130 76.9231 61.5385 77.7778 60.0000 75.0000 78.5714 94.4444 91.6667 85.7143 80.0000 54.5455 81.4815 50.0000 75.0000 80.0000 91.6667 71.4286 48 604 3 605 1 606 3 607 2 608 1 609 1 610 1 701 7 702 2 703 11 704 1 705 4 706 3 707 7 708 3 709 1 710 3 801 5 802 6 803 5 804 1 805 1 806 7 807 6 808 1 809 2 810 2 Fuente: Libreta de campo. 14 8 17 7 5 8 7 24 18 14 11 27 9 12 9 9 8 27 11 12 18 11 21 20 8 27 10 17 9 20 9 6 9 8 31 20 25 12 31 12 19 12 10 11 32 17 17 19 12 28 26 9 29 12 82.3529 88.8889 85.0000 77.7778 83.3333 88.8889 87.5000 77.4194 90.0000 56.0000 91.6667 87.0968 75.0000 63.1579 75.0000 90.0000 72.7273 84.3750 64.7059 70.5882 94.7368 91.6667 75.0000 76.9231 88.8889 93.1034 83.3333 49 Cuadro 12. Datos y medias de porcentaje de colonización 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 T3 70.5882 66.6667 75.0000 50.0000 60.0000 75.0000 70.5882 52.9412 50.0000 61.5385 T4 57.8947 64.2857 75.0000 61.5385 64.2857 73.9130 76.9231 61.5385 77.7778 60.0000 Tratamientos T5 T6 75.0000 80.0000 78.5714 91.6667 94.4444 71.4286 91.6667 82.3529 85.7143 88.8889 80.0000 85.0000 54.5455 77.7778 81.4815 83.3333 50.0000 88.8889 75.0000 87.5000 Total Yi. Media yi. 632.3228 63.2323 673.1570 67.3157 766.4238 76.6424 Repeticiones 836.8371 83.6837 T7 77.4194 90.0000 56.0000 91.6667 87.0968 75.0000 63.1579 75.0000 90.0000 72.7273 T8 84.3750 64.7059 70.5882 94.7368 91.6667 75.0000 76.9231 88.8889 93.1034 83.3333 778.0680 77.8068 823.3214 82.3321 Y.. 4510.1299 Media general 75.1688 Fuente: Libreta de campo. 50 Cuadro 13. Datos y medias de peso sistema radicular en gramos Repeticiones 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Total Yi. Media yi. T1 0.63 0.54 0.56 0.56 0.57 0.59 0.48 0.55 0.57 0.53 T2 0.45 0.55 0.65 0.64 0.59 0.56 0.74 0.71 0.51 0.57 T3 0.45 0.68 0.66 0.58 0.47 0.83 0.67 0.49 0.78 0.57 5.58 0.558 5.97 0.597 6.18 0.618 Tratamientos T4 T5 0.76 0.64 0.75 0.80 0.58 0.58 0.67 0.54 0.73 0.93 0.78 0.75 0.63 0.60 0.55 0.86 0.58 0.57 0.84 0.75 6.87 0.687 7.02 0.702 T6 0.45 0.47 0.76 0.85 0.83 0.85 0.77 0.79 0.58 0.66 T7 0.58 0.94 0.87 0.54 0.96 0.98 0.75 0.65 0.57 0.53 T8 0.84 0.88 0.94 0.63 0.65 0.74 0.76 0.66 0.89 0.9 7.01 0.701 7.37 0.737 7.89 0.789 Y.. 53.89 Media general 0.6736 Fuente: Libreta de campo. 51 Cuadro 14. Lectura No. 1, diámetro de tallo en milímetros Repeticiones 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Total Yi. Media yi. T1 1 1 1.5 1 1 1 1 1 1 1 T2 1.5 1 1 1 1.5 1 1 1.5 1 1.5 T3 1 1 1 1 1.5 1 1 1 1 1 Tratamientos T4 T5 1.5 1 1 1.5 1.5 1 1 1 1.5 1 1 1.5 1.5 1 1 1 1.5 1.5 1 1 10.5 1.05 12 1.2 10.5 1.05 12.5 1.25 11.5 1.15 T6 1.5 1.5 1 1.5 1 1 1.5 1.5 1.5 1.5 T7 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 T8 1.5 1.1 1.5 1 1.5 1 1.5 1 1.5 1.5 13.5 1.35 10 1 13.1 1.31 Y.. 93.6 Media general 1.17 Fuente: Libreta de campo. 52 Cuadro 15. Lectura No. 2, diámetro de tallo en milímetros Repeticiones 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Total Yi. Media yi. T1 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5 2 1.5 1 1.5 T2 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5 1 1 1 T3 2 1.5 1.5 2 1.5 1 1.5 1.5 1 1.5 15 1.5 13.5 1.35 15 1.5 Tratamientos T4 T5 1.5 1.5 1.5 1.5 2 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5 1 15.5 1.55 14.5 1.45 T6 2 1.5 1.5 1.5 1.5 2 1.5 1.5 1.5 1.5 T7 2 1.5 1.5 1 1.5 1.5 1.5 2 1.5 1.5 T8 1.5 1.5 2 1.5 2 2 1.5 2 2 1.5 16 1.6 15.5 1.55 17.5 1.75 Y.. 122.5 Media general 1.531 Fuente: Libreta de campo. 53 Cuadro 16. Lectura No. 3, diámetro de tallo en milímetros Repeticiones 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Total Yi. Media yi. T1 2 1.5 2 1.5 2 1.5 2 1.5 1.5 1.5 T2 2 2 1.5 1.5 2 2 1.5 1.5 1.5 1.5 T3 2 1.5 2 2.5 1.5 2 1.5 1.5 1.5 2 17 1.7 17 1.7 18 1.8 Tratamientos T4 T5 2 1.5 1.5 1.5 2 1.5 1.5 1.5 1.5 2 2 2 1.5 2 1.5 2 2 1.5 1.5 1 17 1.7 16.5 1.65 T6 2 2 2 1.5 2 2 1.5 2 1.5 2 T7 2 1.5 1.5 1.5 1.5 2 2 2 1.5 2 T8 2 2 1.5 1.5 2 2 2.5 2 2 1.5 18.5 1.85 17.5 1.75 19 1.9 Y.. 140.5 Media general 1.7563 Fuente: Libreta de campo. 54 Cuadro 17. Lectura No. 4, diámetro de tallo en milímetros Repeticiones 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Total Yi. Media yi. T1 2 2.5 2 2 2.5 2 2.5 2 2 2 T2 2 2 2 2 2 2 2 1.5 2 1.5 Tratamientos T3 T4 T5 2 2 2 2.5 2 2 2.5 2.5 2 2.5 2.5 2 2.5 2 2.5 2 2 2 2.5 2 2.5 2 2 2 1.5 2 2 2 2 2 21.5 2.15 19 1.9 22 2.2 21 2.1 21 2.1 T6 2.5 2 2 2 2 2 1.5 2.5 2 2 T7 2.5 2 2.5 2 2 2 2 2.5 2 2.5 T8 2 2 2 2.5 1.5 2 2.5 2 2 2 20.5 2.05 22 2.2 20.5 2.05 Y.. 167.5 Media general 2.0938 Fuente: Libreta de campo. 55 Cuadro 18. Lectura No. 5, diámetro de tallo en milímetros Repeticiones 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Total Yi. Media yi. T1 2 2.5 2 2 2.5 2 2.5 2 2 2 T2 2 2 2 2 2 2.5 2.5 1.5 2 2 Tratamientos T3 T4 T5 2 2 2 2.5 2 2 2.5 2.5 2 2.5 2.5 2 2.5 2 2.5 2.5 2.5 2 2.5 2 2.5 2 2 2 1.5 2 2 2 2 2 21.5 2.15 20.5 2.05 22.5 2.25 21.5 2.15 21 2.1 T6 2.5 2 2 2 2 2 2 2 2 2 T7 2.5 2 2.5 2 2 2 2 2.5 2.5 2.5 T8 2.5 2 2 2.5 1.5 2 2.5 2 2 2 20.5 2.05 22.5 2.25 21 2.1 Y.. 171 Media general 2.1375 Fuente: Libreta de campo. 56 Cuadro 19. Lectura No. 6, diámetro de tallo en milímetros Repeticiones 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Total Yi. Media yi. T1 2 2.5 2 2.5 2.5 2.5 2.5 2 2 2 T2 2 2 2.5 2 2.5 2.5 2.5 1.5 2 2 Tratamientos T3 T4 T5 2 2 2 2.5 2 2 2.5 2.5 2 2.5 2.5 2.5 2.5 2 2.5 2.5 2.5 2 2.5 2 2.5 2.5 2.5 2 1.5 2 2 2 2 2 22.5 2.25 21.5 2.15 23 2.3 22 2.2 21.5 2.15 T6 2.5 2 2 2.5 2 2 2 2 2 2.5 T7 2.5 2 2.5 2 2.5 2 2 2.5 2.5 2.5 T8 2.5 2 2 2.5 1.5 2 2.5 2.5 2 2 21.5 2.15 23 2.3 21.5 2.15 Y.. 176.5 Media general 2.20625 Fuente: Libreta de campo. 57 Cuadro 20. Lectura No. 7, diámetro de tallo en milímetros Repeticiones 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Total Yi. Media yi. T1 2 2.5 2 2.5 2.5 2.5 2.5 2 2.5 2 T2 2 2 2.5 2 2.5 2.5 2.5 2 2 2 Tratamientos T3 T4 T5 2 2 2 2.5 2 2 2.5 2.5 2 2.5 2.5 2.5 2.5 2 2.5 2.5 2.5 2 2.5 2 2.5 2.5 2.5 2 2 2 2 2 2.5 2.5 23 2.3 22 2.2 23.5 2.35 22.5 2.25 22 2.2 T6 2.5 2.5 2 2.5 2 2 2 2 2 2.5 T7 2.5 2 2.5 2.5 2.5 2 2 2.5 2.5 2.5 T8 2.5 2 2 2.5 2 2 2.5 2.5 2 2 22 2.2 23.5 2.35 22 2.2 Y.. 180.5 Media general 2.2563 Fuente: Libreta de campo. 58 Cuadro 21. Lectura No. 8, diámetro de tallo en milímetros Repeticiones 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Total Yi. Media yi. T1 T2 T3 2 2 2 2.5 2.5 2.5 2 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 2 2.5 2 2 2 2 2 2.5 2 2.5 2.5 2.5 2.5 2 2.5 2 23 2.3 22 2.2 23.5 2.35 Tratamientos T4 T5 T6 2 2 3 2 2 2.5 2.5 2 2 2.5 2.5 2.5 2 2.5 2 3 2 2 2 2.5 2 2.5 2 2 2.5 2 2 2.5 2.5 2.5 23.5 2.35 22 2.2 22.5 2.25 T7 2.5 2 2.5 2.5 2.5 2 2 2.5 2.5 2.5 T8 2.5 2 2 2.5 2 2 3 2.5 2.5 2.5 23.5 2.35 23.5 2.35 Y.. 183.5 Media general 2.2938 Fuente: Libreta de campo. Cuadro 22. Lecturas en los cuatro meses de la etapa de vivero de los promedios de diámetro de tallo por tratamiento en milímetros. Días después de la siembra 1 15 2 30 3 45 4 60 5 75 6 90 7 105 8 120 Fuente: Libreta de campo. Lectura No. Tratamientos (diámetro de tallo en milímetros) T1 T2 T3 T4 T5 T6 T7 T8 1.05 1.2 1.05 1.25 1.15 1.35 1 1.31 1.5 1.35 1.5 1.55 1.45 1.6 1.55 1.75 1.7 1.7 1.8 1.7 1.65 1.85 1.75 1.9 2.15 1.9 2.2 2.1 2.1 2.05 2.2 2.05 2.15 2.05 2.25 2.15 2.1 2.05 2.25 2.1 2.25 2.15 2.3 2.2 2.15 2.15 2.3 2.15 2.3 2.2 2.35 2.25 2.2 2.2 2.35 2.2 2.3 2.2 2.35 2.35 2.2 2.25 2.35 2.35 59 Cuadro 23. Lectura No. 1, altura de planta en centímetros Repeticiones 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Total Yi. Media yi. T1 2 2.2 2 2 2 2 2 2 2 2 T2 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 2 2.8 2 2 2 20.2 2.02 23.3 2.33 T3 2 2 2.5 2.5 2.5 2.5 2 2.5 2.4 2 22.9 2.29 Tratamientos T4 T5 2 2 2.6 2.5 2 2 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 2 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 23.6 2.36 24 2.4 T6 T7 2 2.5 2 2 2.5 2.5 2.5 2 2.6 2 2 2 2.3 2.5 2.5 2.5 2 2.5 2.5 2.5 T8 2.7 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 22.6 2.26 23.3 2.33 25.2 2.52 Y.. 185.1 Media general 2.3137 Fuente: Libreta de campo. 60 Cuadro 24. Lectura No. 2, altura de planta en centímetros Repeticiones 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Total Yi. Media yi. T1 5.5 5.5 5.5 4 4 5.5 5.5 5.6 4 4 49.1 4.91 T2 T3 5 5 5 5.5 5 5.4 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5.2 5.5 50.9 5.09 50.7 5.07 Tratamientos T4 T5 5 5 5 5 5 5 5.5 5 5.5 3.9 5 5 5 5 5.5 5 5 4 5.5 4 52 5.2 46.9 4.69 T6 T7 5 5 5 5.5 5 5 3.5 5 5.5 5 5 5 3.8 5 5 4 5 4 5 4 T8 9.2 5.1 5.8 5.2 4.6 5.9 5.4 6.2 4.2 4.7 49.5 4.95 45.8 4.58 56.3 5.63 Y.. 401.2 Media general 5.015 Fuente: Libreta de campo. 61 Cuadro 25. Lectura No. 3, altura de planta en centímetros Repeticiones 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Total Yi. Media yi. T1 T2 T3 8 7.5 7.5 7.5 7.5 8.2 8.2 8 8 8 8 7.5 8 8 8 8 7.6 8 8 8 8 8 8.3 8 8 8.5 8 8 8 8 78.4 7.84 79.1 7.91 80.8 8.08 Tratamientos T4 T5 8.5 8 8.6 8 8.5 8 8.5 8 8.5 8 8 7.5 8.5 8 8.5 8 8.5 7 9 8 85.1 8.51 78.5 7.85 T6 T7 8 8 8 8 8.5 8 8 8 8 8 7 8 7 8 8 7 8 8 8 7.5 T8 14.7 6.8 9.7 8.5 7 8.1 9.4 9.3 6.9 8.2 80.5 8.05 76.5 7.65 88.6 8.86 Y.. 647.5 Media general 8.0937 Fuente: Libreta de campo. 62 Cuadro 26. Lectura No. 4, altura de planta en centímetros Repeticiones 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Total Yi. Media yi. T1 10 10.5 9.5 10.5 9.5 9.5 10 10.5 9 10.5 T2 9.5 10 9.5 11 10 9.5 10 9.5 9 9.7 T3 11 11 10.5 11 11 10.9 11 10.5 11 11 99.5 9.95 97.7 9.77 108.9 10.89 Tratamientos T4 T5 11.5 10 11.6 10 11 10.5 11.5 10 12 10.5 11.5 10 11.5 10 10 10.4 10 10 11 10 111.6 11.16 101.4 10.14 T6 12 11 9.5 10.2 11.5 12 10 11.5 11.5 12 T7 10 10.5 10 9.5 9 10.5 10.5 10 10.5 10.5 111.2 11.12 101 10.1 T8 18 8 13.3 12.5 8.6 10.8 12.2 11 9 10 113.4 11.34 Y.. 844.7 Media general 10.5587 Fuente: Libreta de campo. 63 Cuadro 27. Lectura No. 5, altura de planta en centímetros Repeticiones 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Total Yi. Media yi. T1 T2 14 13.5 12.5 13.8 14 12 13.5 14 13 12.5 13 13 13.5 13 13.5 13 13 13.5 13 13.3 T3 13.5 15.5 18.7 14.5 11.5 17.5 14.5 15.2 10 12.5 132.8 13.28 131.8 13.18 143.4 14.34 Tratamientos T4 T5 12.7 14 12.2 10.2 15.2 12.5 12.5 14.6 14.5 14 20.2 15.3 12.3 17.5 18 13.8 12 13 13.5 11 143.1 14.31 135.9 13.59 T6 T7 T8 14 13 14.5 14 15 13 13.3 14 14.5 13 15 13 13.5 13 13.5 13 14 13.5 13.4 14 22 10 15.8 15.5 11.8 15 15.5 15.5 11.5 14.2 138.3 13.83 135.9 13.59 146.8 14.68 Y.. 1108 Media general 13.85 Fuente: Libreta de campo. 64 Cuadro 28. Lectura No. 6, altura de planta en centímetros Repeticiones 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Total Yi. Media yi. T1 16 17.6 16 18 16.5 16 16.5 18 16 17.5 T2 18 17 17.5 17 18 18 17.5 17.2 18 18 T3 15.5 20 24.3 20.3 15.5 20.5 18.5 20.5 12.2 18.3 168.1 16.81 176.2 17.62 185.6 18.56 Tratamientos T4 T5 17 17.8 15.7 14.6 19.6 17.5 18.5 18 17.8 18.5 25.2 20.6 16.2 22.2 23 18.2 14.6 18 17.6 13.5 185.2 18.52 178.9 17.89 T6 17 18.5 19 18 17 19 17.5 18 20 18.1 T7 17 18 17.1 20 17 17.5 17.5 18 20 17 T8 182.1 18.21 179.1 17.91 189.9 18.99 25 14.5 20.5 20.2 14.5 19.1 20.7 21.2 15.5 18.7 Y.. 1445.1 Media general 18.0637 Fuente: Libreta de campo. 65 Cuadro 29. Lectura No. 7, altura de planta en centímetros Repeticiones 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Total Yi. Media yi. T1 T2 T3 20 19.5 18.5 24 17 19.5 22.5 18 17.5 18 18 20 18.5 19.3 19.3 24.5 24 18 20 20 18 24.5 26.2 25 19 25 22 24 15.8 23.2 194.5 19.45 201.6 20.16 222.7 22.27 Tratamientos T4 T5 21.2 21 19 18 23.5 21.5 21 21.5 21 23 28.5 24 20 26 25.5 23 18 21.5 21 19 218.7 21.87 218.5 21.85 T6 T7 25 23.5 19.5 23 22.5 19 17.5 21.4 21.5 23 22 21 23 20 17 20.2 20 23 23 23 T8 29.5 19 24.5 25.6 18 23 26 26.5 18.3 23.5 215.9 21.59 212.2 21.22 233.9 23.39 Y.. 1718 Media general 21.475 Fuente: Libreta de campo. 66 Cuadro 30. Lectura No. 8, altura de planta en centímetros Repeticiones 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Total Yi. Media yi. T1 29 35 18.7 29 17.5 28 33 21.7 17.8 18.4 T2 18.5 23.5 19 24.5 28 29.8 29 19 24.4 28 T3 19 30 32 30.5 19.2 31.5 27.5 26.7 16 29 Tratamientos T4 T5 25 26.5 19.5 19 26.5 26.5 25.6 26.4 25 27 32 27 25 28.3 28.7 25.5 18.2 26 25.6 20.5 248.1 24.81 243.7 24.37 261.4 26.14 251.1 25.11 252.7 25.27 T6 27 27 19.7 25.5 29.5 19.5 18 27 28 25.4 T7 27.7 24 28.8 22 17.5 22.3 24 25 26 23.5 T8 32.2 19.6 27.9 32.8 22.5 25 28 29 20 26.7 246.6 24.66 240.8 24.08 263.7 26.37 Y.. 2008.1 Media general 25.1012 Fuente: Libreta de campo. Cuadro 31. Lecturas en los cuatro meses de la etapa de vivero de los promedios de altura de planta por tratamiento en centímetros. Días después Tratamientos (altura de planta en centímetros) Lectura No. de la siembra T1 T2 T3 T4 T5 T6 T7 T8 1 15 2.02 2.33 2.29 2.36 2.4 2.26 2.33 2.52 2 30 4.91 5.09 5.07 5.2 4.69 4.95 4.58 5.63 3 45 7.84 7.91 8.08 8.51 7.85 8.05 7.65 8.86 4 60 9.95 9.77 10.9 11.2 10.1 11.12 10.1 11.34 5 75 13.3 13.18 14.3 14.3 13.6 13.83 13.6 14.68 6 90 16.8 17.62 18.6 18.5 17.9 18.21 17.9 18.99 7 105 19.5 20.16 22.3 21.9 21.9 21.59 21.2 23.39 8 120 24.8 24.37 26.1 25.1 25.3 24.66 24.1 26.37 Fuente: Libreta de campo. 67 Cuadro 32. ANDEVA para la variable de respuesta porcentaje de colonización F.V. G.L. S.C. C.M. Fc Tratamiento 5 3370.9926 674.1985 6.2297** Error 54 5844.0885 108.2239 Total 59 9215.0811 Fuente: Elaboración propia con base en análisis estadístico. Ft 5% 2.3872 1% 3.3804 Nota. Porcentaje de C.V: 18.4528 % ** Diferencias estadísticas altamente significativas entre los tratamientos. Cuadro 33. ANDEVA para la variable de respuesta de peso sistema radicular F.V. G.L. S.C. C.M. Fc Tratamiento 7 0.4140 0.0591 3.7764** Error 72 1.1275 0.0157 Total 79 1.5414 Fuente: Elaboración propia con base en análisis estadístico. Ft 5% 2.1396 1% 2.899 Nota. Porcentaje de C.V: 18.5768 % ** Diferencias estadísticas altamente significativas entre los tratamientos. 68 Cuadro 34. ANDEVA de la lectura No. 2 (30 días después de la siembra), para la variable de respuesta diámetro de tallo. F.V. G.L. S.C. C.M. Fc Tratamiento 7 0.9469 0.1353 2.3052** Error 72 4.225 0.0587 Total 79 5.1719 Fuente: Elaboración propia con base en análisis estadístico. Ft 5% 2.1396 Nota. Porcentaje de C.V: 15.8198 % ** Diferencias estadísticas altamente significativas entre los tratamientos. Cuadro 35. ANDEVA de la lectura No. 8 (120 días después de la siembra), para la variable de respuesta diámetro de tallo. F.V. G.L. S.C. C.M. Fc Tratamiento 7 0.3219 0.0460 0.5495 N.S Error 72 6.0250 0.0837 Total 79 6.3469 Fuente: Elaboración propia con base en análisis estadístico. Ft 5% 2.1396 1% 2.899 Nota. Porcentaje de C.V: 12.6115 % N.S: No hay significancia. 69 Cuadro 36. ANDEVA de la lectura No. 3 (45 días después de la siembra), para la variable de respuesta altura de planta. F.V. G.L. S.C. C.M. Ft Fc Tratamiento 7 11.1698 1.5956 2.1597 Error 72 53.197 0.7388 Total 79 64.3668 Fuente: Elaboración propia con base en análisis estadístico. 5% 2.1396 1% 2.899 Nota. Porcentaje de C.V: 10.62% ** Diferencias estadísticas altamente significativas entre los tratamientos. Cuadro 37. ANDEVA de la lectura No. 8 (120 días después de la siembra), para la variable de respuesta altura de planta. F.V. G.L. S.C. C.M. Fc Tratamiento 7 45.7449 6.5350 0.3056 N.S Error 72 1539.6650 21.3842 Total 79 1585.4099 Fuente: Elaboración propia con base en análisis estadístico. Ft 5% 1% 2.1396 2.899 Nota. Porcentaje de C.V: 18.4226 % N.S: No hay significancia. 70 Cuadro 38. Ordenamiento de medias y comparador para la prueba de TUKEY de la variable de respuesta, porcentaje de colonización. T3 T4 T5 T7 T8 T6 63.2323 67.3157 76.6424 77.8068 82.3321 83.6837 T6 83.6837 20.4514 16.3680 7.0413 5.8769 1.3516 - T8 82.3321 19.0999 15.0164 5.6898 4.5253 - T7 77.8068 14.5745 10.4911 1.1644 - T5 76.6424 13.4101 9.3267 - T4 67.3157 4.0834 - T3 63.2323 - q α = (6, 54) 1% qα= 5.02 Sx̅= 3.2897 Wp= 16.5145 Fuente: Elaboración propia con base en análisis estadístico. Cuadro 39. Ordenamiento de medias y comparador para la prueba de TUKEY de la variable de respuesta, peso del sistema radicular en gramos. T1 T2 T3 T4 T6 T5 T7 T8 0.558 0.597 0.618 0.687 0.701 0.702 0.737 0.789 T8 0.789 0.231 0.192 0.171 0.102 0.088 0.087 0.052 - T7 0.737 0.179 0.14 0.119 0.05 0.036 0.035 - T5 0.702 0.144 0.105 0.084 0.015 0.001 - T6 0.701 0.143 0.104 0.083 0.014 - T4 0.687 0.129 0.09 0.069 - T3 0.62 0.06 0.02 - T2 0.597 0.039 - T1 0.6 - qα = (8, 72) 1% qα = 5.224 Sx̅= 0.039572 Wp= 0.206725 Fuente: Elaboración propia con base en análisis estadístico. 71 Cuadro 40. Ordenamiento de medias y comparador para la prueba de TUKEY de la lectura No.2 (30 días después de la siembra), para la variable de respuesta diámetro de tallo en milímetros. T2 T5 T1 T3 T4 T7 T6 T8 1.35 1.45 1.5 1.5 1.55 1.55 1.6 1.75 T8 1.75 0.4 0.3 0.25 0.25 0.2 0.2 0.15 - T6 1.6 0.25 0.15 0.1 0.1 0.05 0.05 - T7 1.55 0.2 0.1 0.05 0.05 - T4 1.55 0.2 0.1 0.05 0.05 - T3 1.5 0.15 0.05 - T1 1.5 0.15 0.05 - T5 1.45 0.1 - T2 1.35 - qα = (8, 72) 5% qα = 4.424 Sx̅= 0.076603 Wp= 0.259603 Fuente: Elaboración propia con base en análisis estadístico. Cuadro 41. Ordenamiento de medias y comparador para la prueba de TUKEY de la lectura No.8 (120 días después de la siembra), para la variable de respuesta diámetro de tallo en milímetros. T2 T5 T6 T1 T3 T4 T7 T8 2.2 2.2 2.25 2.3 2.35 2.35 2.35 2.35 T8 2.35 0.15 0.15 0.1 0.05 - T7 2.35 0.15 0.15 0.1 0.05 - T4 2.35 0.15 0.15 0.1 0.05 - T3 2.35 0.15 0.15 0.1 0.05 - T1 2.3 0.1 0.1 0.05 - T6 2.25 0.05 0.05 - T5 2.2 - T2 2.2 - qα = (8, 72) 1% qα = 5.224 Sx̅= 0.0914877 Wp= 0.477932 Fuente: Elaboración propia con base en análisis estadístico. 72 Cuadro 42. Ordenamiento de medias y comparador para la prueba de TUKEY de la lectura No.3 (45 días después de la siembra), para la variable de respuesta altura de planta en centímetros. T7 T1 T5 T2 T6 T3 T4 T8 7.65 7.84 7.85 7.91 8.05 8.08 8.51 8.86 T8 8.86 1.21 1.02 1.01 0.95 0.81 0.78 0.35 - T4 8.51 0.86 0.67 0.66 0.6 0.46 0.43 - T3 8.08 0.43 0.24 0.23 0.17 0.03 - T6 8.05 0.4 0.21 0.2 0.14 - T2 7.91 0.26 0.07 0.06 - T5 7.85 0.2 0.01 - T1 7.84 0.19 - T7 7.65 - qα = (8, 72) 5% qα = 4.424 Sx̅= 0.271817 Wp= 1.20252 Fuente: Elaboración propia con base en análisis estadístico. Cuadro 43. Ordenamiento de medias y comparador para la prueba de TUKEY de la lectura No.8 (120 días después de la siembra), para la variable de respuesta altura de planta en centímetros. T7 T2 T6 T1 T4 T5 T3 T8 24.08 24.37 24.66 24.81 25.11 25.27 26.14 26.37 T8 26.37 2.29 2 1.71 1.56 1.26 1.1 0.23 - T3 26.14 2.06 1.77 1.48 1.33 1.03 0.87 - T5 25.27 1.19 0.9 0.61 0.46 0.16 - T4 25.11 1.03 0.74 0.45 0.3 - T1 24.81 0.73 0.44 0.15 - T6 24.66 0.58 0.29 - T2 24.37 0.29 - T7 24.08 - qα = (8, 72) 1% qα = 5.224 Sx̅= 1.4623 Wp= 7.6392 Fuente: Elaboración propia con base en análisis estadístico. 73 Cuadro 44. RESULTADOS, PRUEBA DE TUKEY de la variable de respuesta porcentaje de colonización Tratamiento T6 T8 T7 T5 T4 T3 Material Dosis de ectomicorrizas, 3.75 gramos / planta Dosis de ectomicorrizas, 5.00 gramos / planta Dosis de ectomicorrizas, 4.38 gramos / planta Dosis de ectomicorrizas, 3.13 gramos / planta Dosis de ectomicorrizas, 2.50 gramos / planta Dosis de ectomicorrizas, 1.88 gramos / planta Media 83.6837 82.3321 77.8068 76.6424 67.3157 63.2323 Literal a a b b b b Fuente: Elaboración propia con base en análisis estadístico. Cuadro 45. RESULTADOS, PRUEBA DE TUKEY de la variable de respuesta peso del sistema radicular en gramos. Tratamiento Material T8 Dosis de ectomicorrizas, 5.00 gramos / planta T7 Dosis de ectomicorrizas, 4.38 gramos / planta T5 Dosis de ectomicorrizas, 3.13 gramos / planta T6 Dosis de ectomicorrizas, 3.75 gramos / planta T4 Dosis de ectomicorrizas, 2.50 gramos / planta T3 Dosis de ectomicorrizas, 1.88 gramos / planta T2 Dosis de enraizador bioestimulante, 0.5 gramos / planta T1 Testigo absoluto Fuente: Elaboración propia con base en análisis estadístico. Media 0.789 0.737 0.702 0.701 0.687 0.618 0.597 0.558 Literal a b b b b b b b 74 Cuadro 46. RESULTADOS, PRUEBA DE TUKEY de la lectura No. 2 (30 días después de la siembra) para la variable de respuesta, diámetro de tallo en milímetros. Tratamiento Material T8 Dosis de ectomicorrizas, 5 gramos / planta T6 Dosis de ectomicorrizas, 3.75 gramos / planta T7 Dosis de ectomicorrizas, 4.38 gramos / planta T4 Dosis de ectomicorrizas, 2.50 gramos / planta T3 Dosis de ectomicorrizas, 1.88 gramos / planta T1 Testigo absoluto T5 Dosis de ectomicorrizas, 3.13 gramos / planta T2 Dosis de enraizador bioestimulante, 0.5 gramos / planta Fuente: Elaboración propia con base en análisis estadístico. Media 1.75 1.6 1.55 1.55 1.5 1.5 1.45 1.35 Literal a b c c c c c c Cuadro 47. RESULTADOS, PRUEBA DE TUKEY de la lectura No. 8 (120 días después de la siembra) para la variable de respuesta, diámetro de tallo en milímetros. Tratamiento Material Media T8 Dosis de ectomicorrizas, 5 gramos / planta 2.35 T7 Dosis de ectomicorrizas, 4.38 gramos / planta 2.35 T4 Dosis de ectomicorrizas, 2.50 gramos / planta 2.35 T3 Dosis de ectomicorrizas, 1.88 gramos / planta 2.35 T1 Testigo absoluto 2.3 T6 Dosis de ectomicorrizas, 3.75 gramos / planta 2.25 T5 Dosis de ectomicorrizas, 3.13 gramos / planta 2.2 T2 Dosis de enraizador bioestimulante, 0.5 gramos / planta 2.2 Fuente: Elaboración propia con base en análisis estadístico. Literal a a a a a a a a 75 Cuadro 48. RESULTADOS, PRUEBA DE TUKEY de la lectura No. 3 (45 días después de la siembra) para la variable de respuesta, altura de planta en centímetros. Tratamiento Material Media T8 Dosis de ectomicorrizas, 5 gramos / planta 8.86 T4 Dosis de ectomicorrizas, 2.50 gramos / planta 8.51 T3 Dosis de ectomicorrizas, 1.88 gramos / planta 8.08 T6 Dosis de ectomicorrizas, 3.75 gramos / planta 8.05 T2 Dosis de enraizador bioestimulante, 0.5 gramos / planta 7.91 T5 Dosis de ectomicorrizas, 3.13 gramos / planta 7.85 T1 Testigo absoluto 7.84 T7 Dosis de ectomicorrizas, 4.38 gramos / planta 7.65 Fuente: Elaboración propia con base en análisis estadístico. Literal a b b b b b b b Cuadro 49. RESULTADOS, PRUEBA DE TUKEY de la lectura No. 8 (120 días después de la siembra) para la variable de respuesta, altura de planta en centímetros. Tratamiento Material T8 Dosis de ectomicorrizas, 5 gramos / planta T3 Dosis de ectomicorrizas, 1.88 gramos / planta T5 Dosis de ectomicorrizas, 3.13 gramos / planta T4 Dosis de ectomicorrizas, 2.50 gramos / planta T1 Testigo absoluto T6 Dosis de ectomicorrizas, 3.75 gramos / planta T2 Dosis de enraizador bioestimulante, 0.5 gramos / planta T7 Dosis de ectomicorrizas, 4.38 gramos / planta Fuente: Elaboración propia con base en análisis estadístico. Media 26.37 26.14 25.27 25.11 24.81 24.66 24.37 24.08 Literal a a a a a a a a 76 Cuadro 50. Interpolación y extrapolación de los promedios de la lectura No. 7 y No. 8 de la variable altura de planta en centímetros, desde el día 105 al día 125 después de la siembra. DDS Lectura No. 7 Lectura No.8 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 T1 19.5 19.9 20.2 20.6 20.9 21.3 21.6 22.0 22.3 22.7 23.0 23.4 23.7 24.1 24.4 24.8 25.2 25.5 25.9 26.2 26.6 ALTURA DE PLANTA EN CENTIMETROS T2 T3 T4 T5 T6 T7 20.16 22.3 21.9 21.9 21.59 21.2 20.4 22.6 22.1 22.1 21.8 21.4 20.7 22.0 22.8 22.3 22.4 21.6 21.0 23.1 22.5 22.6 22.2 21.8 21.3 23.3 22.8 22.8 22.4 22.0 21.6 23.6 23.0 23.0 22.6 22.2 21.8 23.8 23.2 23.3 22.8 22.4 22.1 24.1 23.4 23.5 23.0 22.6 22.4 24.3 23.6 23.7 23.2 22.7 22.7 24.6 23.8 23.9 23.4 22.9 23.0 24.8 24.0 24.2 23.6 23.1 23.2 23.8 25.1 24.2 24.4 23.3 23.5 25.3 24.5 24.6 24.0 23.5 23.8 25.6 24.7 24.8 24.3 23.7 24.1 25.8 24.9 25.1 24.5 23.9 24.37 26.1 25.1 25.3 24.66 24.1 24.7 26.4 25.3 25.5 24.9 24.3 24.9 26.6 25.5 25.8 25.1 24.5 25.2 25.3 26.9 25.7 26.0 24.7 25.5 27.1 26.0 26.2 25.5 24.9 25.8 27.4 26.2 26.4 25.7 25.1 T8 23.4 23.6 23.8 24.0 24.2 24.4 24.6 24.8 25.0 25.2 25.4 25.6 25.8 26.0 26.2 26.4 26.6 26.8 27.0 27.2 27.4 DDS: días después de la siembra. T: Tratamiento. Fuente: Elaboración propia con base en análisis estadístico. 77 Cuadro 51. Costo de producción de 4,444 plantas de Pino oocarpa en etapa de vivero, en aldea San Francisco, Jutiapa. Actividad Mano de obra Preparación de sustrato, Llenado de bolsa, trazo y pitiado Siembra Riego Aplicaciones agroquimicos, raleos y limpias Insumos Semilla certificada Tierra negra Arena Bolsas de polietileno Fertilizante hidrosoluble 10-50-0 Fertilizante foliar Propineb Carbofuran Insecticidas, organofosforado Fungicidas, propamocarb Equipo Asperjadora Regadera metálica Cantidad U.M 4 1 4 jornal jornal jornal Q. Q. Q. 71.4 Q. 71.4 Q. 71.4 Q. 285.6 71.4 285.6 1 jornal Q. 71.4 Q. 71.4 126 2 0.77 4.44 6.36 160 140 140 213 480 gramos mts ³ mts ³ millar kilo ml gr ml ml ml Q. 0.817 Q. Q. 78.12 Q. Q. 25 Q. Q. 4.25 Q. Q. 9.00 Q. Q. 0.055 Q. Q. 0.09 Q. Q. 0.24 Q. Q. 0.1 Q. Q. 0.36 Q. 102.87 156.24 19.25 18.87 57.27 8.8 12.6 33.6 21.3 172.8 1 1 C.U asperjadora Q. regadera Q. C.T 450 Q. 60 Q. 450 60 COSTO TOTAL Q. COSTO POR PLANTA Q. 1827.6 0.41 Fuente: Administración de la finca 78 Cuadro 52. Presupuesto para el tratamiento testigo absoluto Actividad Mano de obra Preparación de sustrato, Llenado de bolsa , trazo y pitiado Siembra Riego Aplicaciones agroquímicos, raleos y limpias Insumos Semilla certificada Tierra negra Arena Bolsas de polietileno Fertilizante hidrosoluble 10-50-0 Fertilizante foliar Propineb Carbofuran Insecticidas, organofosforado Fungicidas, propamocarb Equipo Asperjadora Regadera metálica Cantidad Unidad de medida 0.0090 0.0023 0.0090 0.0023 jornal jornal jornal jornal 0.2833 0.0045 0.0017 0.0100 0.0286 0.3600 0.3150 0.3150 0.4793 1.0801 gramos mts ³ mts ³ millar kilo ml gr ml ml ml C.U Q Q Q Q 71.40 71.40 71.40 71.40 C.T Q Q Q Q 0.64 0.16 0.64 0.16 Q 0.82 Q 0.23 Q 78.12 Q 0.35 Q 25.00 Q 0.04 Q 4.25 Q 0.04 Q 9.00 Q 0.13 Q 0.06 Q 0.02 Q 0.09 Q 0.03 Q 0.24 Q 0.08 Q 0.10 Q 0.05 Q 0.36 Q 0.39 0.0023 asperjadora Q450.00 Q 1.01 0.0023 regadera Q 60.00 Q 0.14 COSTO TOTAL Q 4.11 COSTO POR PLANTA Q 0.41 Fuente: Análisis de costo de producción 79 Cuadro 53. Presupuesto para el tratamiento contraste (enraizador bioestimulante). Actividad Mano de obra Preparación de sustrato, Llenado de bolsa, trazo y pitiado Siembra Riego Aplicaciones agroquímicos, raleos y limpias Insumos Raizal Semilla certificada Tierra negra Arena Bolsas de polietileno Fertilizante hidrosoluble 10-50-0 Fertilizante foliar Propineb Carbofuran Insecticidas, organofosforado Fungicidas, propamocarb Equipo Asperjadora Regadera metálica Cantidad Unidad de medida C. U. C. T. 0.0090 0.0023 0.0090 jornal jornal jornal Q 71.40 Q 0.64 Q 71.40 Q 0.16 Q 71.40 Q 0.64 0.0023 jornal Q 71.40 Q 0.16 0.0050 0.2833 0.0045 0.0017 0.0100 0.0286 0.3600 0.3150 0.3150 0.4793 1.0801 Kilo gramos mts ³ mts ³ millar kilo ml gr ml ml ml Q 85.00 Q 0.42 Q 0.82 Q 0.23 Q 78.12 Q 0.35 Q 25.00 Q 0.04 Q 4.25 Q 0.04 Q 9.00 Q 0.13 Q 0.06 Q 0.02 Q 0.09 Q 0.03 Q 0.24 Q 0.08 Q 0.10 Q 0.05 Q 0.36 Q 0.39 0.0023 asperjadora Q 450.00 Q 1.01 0.0023 regadera Q 60.00 Q 0.14 COSTO TOTAL Q 4.53 COSTO POR PLANTA Q 0.45 Fuente: Análisis de costo de producción 80 Cuadro 54. Presupuesto para el tratamiento dosis de ectomicorrizas a razón de 1.88 gramos /planta Actividad Mano de obra Preparación de sustrato, Llenado de bolsa, trazo y pitiado Siembra Riego Aplicaciones agroquímicos, raleos y limpias Insumos Ectomicorrizas Semilla certificada Tierra negra Arena Bolsas de polietileno Fertilizante hidrosoluble 10-50-0 Fertilizante foliar Propineb Carbofuran Insecticidas, organofosforado Fungicidas, propamocarb Equipo Asperjadora Regadera metálica Cantidad Unidad de medida C.U. C.T. 0.0090 0.0023 0.0090 jornal jornal jornal Q 71.40 Q 0.64 Q 71.40 Q 0.16 Q 71.40 Q 0.64 0.0023 jornal Q 71.40 Q 0.16 0.0188 0.2833 0.0045 0.0017 0.0100 0.0286 0.3600 0.3150 0.3150 0.4793 1.0801 Kilo gramos mts ³ mts ³ millar kilo ml gr ml ml ml Q 70.00 Q 1.32 Q 0.82 Q 0.23 Q 78.12 Q 0.35 Q 25.00 Q 0.04 Q 4.25 Q 0.04 Q 9.00 Q 0.13 Q 0.06 Q 0.02 Q 0.09 Q 0.03 Q 0.24 Q 0.08 Q 0.10 Q 0.05 Q 0.36 Q 0.39 0.0023 asperjadora Q 450.00 Q 1.01 0.0023 regadera Q 60.00 Q 0.14 COSTO TOTAL Q 5.43 COSTO POR PLANTA Q 0.54 Fuente: Análisis de costo de producción 81 Cuadro 55. Presupuesto para el tratamiento dosis de ectomicorrizas a razón de 2.50 gramos /planta Actividad Mano de obra Preparación de sustrato, Llenado de bolsa , trazo y pitiado Siembra Riego Aplicaciones agroquímicos, raleos y limpias Insumos Ectomicorriza Semilla certificada Tierra negra Arena Bolsas de polietileno Fertilizante hidrosoluble 10-50-0 Fertilizante foliar Propineb Carbofuran Insecticidas, organofosforado Fungicidas, propamocarb Equipo Asperjadora Regadera metálica Cantidad Unidad de medida 0.0090 0.0023 0.0090 0.0023 jornal jornal jornal jornal 0.0250 0.2833 0.0045 0.0017 0.0100 0.0286 0.3600 0.3150 0.3150 0.4793 1.0801 Kilo gramos mts ³ mts ³ millar kilo ml gr ml ml ml C.U. Q Q Q Q 71.40 71.40 71.40 71.40 C.T. Q0.64 Q0.16 Q0.64 Q0.16 Q 70.00 Q1.75 Q 0.82 Q0.23 Q 78.12 Q0.35 Q 25.00 Q0.04 Q 4.25 Q0.04 Q 9.00 Q0.13 Q 0.06 Q0.02 Q 0.09 Q0.03 Q 0.24 Q0.08 Q 0.10 Q0.05 Q 0.36 Q0.39 0.0023 asperjadora Q450.00 Q1.01 0.0023 regadera Q 60.00 Q0.14 COSTO TOTAL Q5.86 COSTO POR PLANTA Q0.59 Fuente: Análisis de costo de producción 82 Cuadro 56. Presupuesto para el tratamiento dosis de ectomicorrizas a razón de 3.13 gramos /planta Actividad Mano de obra Preparación de sustrato, Llenado de bolsa, trazo y pitiado Siembra Riego Aplicaciones agroquímicos, raleos y limpias Insumos Ectomicorriza Semilla certificada Tierra negra Arena Bolsas de polietileno Fertilizante hidrosoluble 10-50-0 Fertilizante foliar Propineb Carbofuran Insecticidas, organofosforado Fungicidas, propamocarb Equipo Asperjadora Regadera metálica Cantidad Unidad de medida C.U. C.T. 0.0090 0.0023 0.0090 jornal jornal jornal Q 71.40 Q 0.64 Q 71.40 Q 0.16 Q 71.40 Q 0.64 0.0023 jornal Q 71.40 Q 0.16 0.0313 0.2833 0.0045 0.0017 0.0100 0.0286 0.3600 0.3150 0.3150 0.4793 1.0801 Kilo gramos mts ³ mts ³ millar kilo ml gr ml ml ml Q 70.00 Q 2.19 Q 0.82 Q 0.23 Q 78.12 Q 0.35 Q 25.00 Q 0.04 Q 4.25 Q 0.04 Q 9.00 Q 0.13 Q 0.06 Q 0.02 Q 0.09 Q 0.03 Q 0.24 Q 0.08 Q 0.10 Q 0.05 Q 0.36 Q 0.39 0.0023 asperjadora Q 450.00 Q 1.01 0.0023 regadera Q 60.00 Q 0.14 COSTO TOTAL Q 6.30 COSTO POR PLANTA Q 0.63 Fuente: Análisis de costo de producción 83 Cuadro 57. Presupuesto para el tratamiento dosis de ectomicorrizas a razón de 3.75 gramos /planta Actividad Mano de obra Preparación de sustrato, Llenado de bolsa, trazo y pitiado Siembra Riego Aplicaciones agroquímicos, raleos y limpias Insumos Ectomicorriza Semilla certificada Tierra negra Arena Bolsas de polietileno Fertilizante hidrosoluble 10-50-0 Fertilizante foliar Propineb Carbofuran Insecticidas, organofosforado Fungicidas, propamocarb Equipo Asperjadora Regadera metálica Cantidad Unidad de medida C.U C.T. 0.0090 0.0023 0.0090 jornal jornal jornal Q 71.40 Q 0.64 Q 71.40 Q 0.16 Q 71.40 Q 0.64 0.0023 jornal Q 71.40 Q 0.16 0.0375 0.2833 0.0045 0.0017 0.0100 0.0286 0.3600 0.3150 0.3150 0.4793 1.0801 Kilo gramos mts ³ mts ³ millar kilo ml gr ml ml ml Q 70.00 Q 2.63 Q 0.82 Q 0.23 Q 78.12 Q 0.35 Q 25.00 Q 0.04 Q 4.25 Q 0.04 Q 9.00 Q 0.13 Q 0.06 Q 0.02 Q 0.09 Q 0.03 Q 0.24 Q 0.08 Q 0.10 Q 0.05 Q 0.36 Q 0.39 0.0023 asperjadora Q450.00 Q 1.01 0.0023 regadera Q 60.00 Q 0.14 COSTO TOTAL Q 6.74 COSTO POR PLANTA Q 0.67 Fuente: Análisis de costo de producción 84 Cuadro 58. Presupuesto para el tratamiento dosis de ectomicorrizas a razón de 4.38 gramos /planta Actividad Mano de obra Preparación de sustrato, Llenado de bolsa, trazo y pitiado Siembra Riego Aplicaciones agroquímicos, raleos y limpias Insumos Ectomicorriza semilla certificada tierra negra arena bolsas de polietileno Fertilizante hidrosoluble 10-50-0 Fertilizante foliar Propineb Carbofuran insecticidas, organofosforado fungicidas, propamocarb Equipo Asperjadora Regadera metálica Cantidad Unidad de medida C.U C.T 0.0090 0.0023 0.0090 jornal jornal jornal Q 71.40 Q 0.64 Q 71.40 Q 0.16 Q 71.40 Q 0.64 0.0023 jornal Q 71.40 Q 0.16 0.0438 0.2833 0.0045 0.0017 0.0100 0.0286 0.3600 0.3150 0.3150 0.4793 1.0801 Kilo gramos mts ³ mts ³ millar kilo ml gr ml ml ml Q 70.00 Q 3.07 Q 0.82 Q 0.23 Q 78.12 Q 0.35 Q 25.00 Q 0.04 Q 4.25 Q 0.04 Q 9.00 Q 0.13 Q 0.06 Q 0.02 Q 0.09 Q 0.03 Q 0.24 Q 0.08 Q 0.10 Q 0.05 Q 0.36 Q 0.39 0.0023 asperjadora Q450.00 Q 1.01 0.0023 regadera Q 60.00 Q 0.14 COSTO TOTAL Q 7.18 COSTO POR PLANTA Q 0.72 Fuente: Análisis de costo de producción 85 Cuadro 59. Presupuesto para el tratamiento dosis de ectomicorrizas a razón de 5 gramos /planta Actividad Mano de obra Preparación de sustrato, Llenado de bolsa , trazo y pitiado Siembra Riego Aplicaciones agroquímicos, raleos y limpias Insumos Ectomicorriza Semilla certificada Tierra negra Arena Bolsas de polietileno Fertilizante hidrosoluble 10-50-0 Fertilizante foliar Propineb Carbofuran Insecticidas, organofosforado Fungicidas, propamocarb Equipo Asperjadora Regadera metálica Cantidad Unidad de medida 0.0090 0.0023 0.0090 0.0023 jornal jornal jornal jornal 0.0500 0.2833 0.0045 0.0017 0.0100 0.0286 0.3600 0.3150 0.3150 0.4793 1.0801 Kilo gramos mts ³ mts ³ millar kilo ml gr ml ml ml C.U. Q Q Q Q C.T. 71.40 71.40 71.40 71.40 Q 0.64 Q 0.16 Q 0.64 Q 0.16 Q 70.00 Q 0.82 Q 78.12 Q 25.00 Q 4.25 Q 9.00 Q 0.06 Q 0.09 Q 0.24 Q 0.10 Q 0.36 Q 3.50 Q 0.23 Q 0.35 Q 0.04 Q 0.04 Q 0.13 Q 0.02 Q 0.03 Q 0.08 Q 0.05 Q 0.39 0.0023 asperjadora Q450.00 0.0023 regadera Q 60.00 Q 1.01 Q 0.14 COSTO TOTAL Q 7.61 COSTO POR PLANTA Q 0.76 Fuente: Análisis de costo de producción 86 Figura 10. Imagen del experimento al momento de la siembra. Figura 11. Imagen del experimento en la etapa de germinación de la semilla. Figura 12. Imagen del experimento a los 30 días después de la siembra 87 Figura 13. Imagen del experimento a los 60 días después de la siembra Figura 14. Imagen del experimento a los 90 días después de la siembra 88 Figura 15. Imagen del experimento a los 120 días después de la siembra Figura 16. Imagen preparación de los tratamientos para ser aplicados 89 Figura 17. Imagen de una raíz ectomicorrizada observada en el estereomicroscopio Figura 18. Imagen del sistema radicular de una planta lista para ser pesada e imagen de la balanza analítica utilizada. 90 Figura 19. Imagen de las muestras de las raíces de los distintos tratamientos ya identificadas listas para ser observadas en el estereomicroscopio y pesadas en la balanza analítica. Figura 20. Observación en el estereomicroscopio de las raíces colonizadas y no colonizadas por las ectomicorriza. 91