FC Hugh et Leifson

FICHE MILIEU DE
CULTURE
MILIEUX HUGH ET LEIFSON
Ces milieux permettent d’étudier la voie de dégradation du glucose
I- COMPOSITION ET ROLE DES CONSTITUANTS
Constituants
Rôles
Tryptone
Source d’azote
Bleu de bromothymol
Indicateur de pH
Eau, chlorure de sodium
Source de minéraux
Agar
Agent gélifiant
pH 7,1
ATTENTION ! LE MILIEU NE CONTIENT PAS DE GLUCOSE, IL DOIT ETRE AJOUTE AU MOMENT DE L’ENSEMENCEMENT
II- TECHNIQUE
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Ajouter la solution de glucose (10 %) dans les milieux de HL en
ρ
xV
surfusion, afin d’obtenir une concentration finale de 1%
Vglucose = finale de glucose final du tube
ρinitiale du glucose
Refroidir les tubes dans un bain d’eau froide
Ensemencer les milieux par piqûre centrale au fil droit
Recouvrir l’un des 2 tubes d’environ 0,5 mL de paraffine liquide de manière à assurer l’anaérobiose
Dévisser un peu les bouchons des tubes.
Incuber.
III- LECTURE
OBSERVATION
INTERPRETATION
CONCLUSION
Acidification du
milieu en présence
d’O 2
BACTERIE OXYDATIVE
DU GLUCOSE
Acidification forte du
Pas d’acidification du
milieu en présence
milieu
et en absence d’O 2
BACTERIE
FERMENTATIVE
DU GLUCOSE
Alcalinisation du
milieu (utilisation
des peptones)
BACTERIE INERTE VIS-A-VIS DU GLUCOSE