Hot-Start Gene Taq (PDF 146KB)

NIPPON GENE CO., LTD.
URL http://www.nippongene.com
ホットスタート PCR 用耐熱性 DNA ポリメラーゼ
Code No.
313-07044
319-07041
315-07043
Hot-Start Gene Taq
容量
50 units
250 units
250 units×4
Chemically-Modified Hot-Start DNA Polymerase
保存
－20℃
本品は、宿主菌由来の DNA の混入を極力抑えた Taq DNA ポリメラーゼである「Gene Taq FP」に化学的な修
飾を施すことにより、特異性の向上に有効なホットスタート PCR を可能としました。
PCR サイクルに入る前に 95℃、5 分間の熱処理によって酵素の活性化処理を行ってください。
活性
2.5 units/μl
分子量
68 kDa
起源
Thermus aquaticus YT1
活性定義
1 unit は、activated calf thymus DNA をプライマー/鋳型として 74℃、30 分間に 10 nmol のデオ
キシヌクレオチドを酸不溶性沈殿物に取り込む酵素活性とする。
本酵素 10 units と 1 μg の λ/HindⅢを 74℃、1 時間反応させてもアガロースゲル電気泳動パタ
純度
ーンに変化は認められない。
ポリメラーゼ活性以外の活性
・ 5'→3'エキソヌクレアーゼ活性 を有していない。(Taq DNA ポリメラーゼの N 末端を一部欠失させてあるため)
・ 3'→5'エキソヌクレアーゼ活性 を有していない。
・ ターミナルトランスフェラーゼ活性 を有しており、得られた PCR 産物は TA クローニングに使用できる。
構成
本品には、10×Brilliant Buffer および 10×Gene Taq Universal Buffer の 2 種類の反応バッファーを添付して
いる。 10×Brilliant Buffer は Hot-Start Gene Taq に最適化させており、短鎖 DNA（特に 1.5 kb 以下）の増幅
において有効な反応バッファーである。
Code No. 313-07044
・
Hot-Start Gene Taq (2.5 units/μl)
・
dNTP Mixture (2.5 mM each)
・
10×Gene Taq Universal Buffer (15 mM Mg )
・
50 units ×1 本
2+
2+
10×Brilliant Buffer (20 mM Mg )
Code No. 319-07041
Code No. 315-07043
250 units ×1 本
250 units ×4 本
160μl
×1 本
800μl
×1 本
800μl
×4 本
1 ml
×1 本
1 ml
×1 本
1 ml
×4 本
200μl
×1 本
1 ml
×1 本
1 ml
×4 本
（酵素形状） 20 mM Tris-HCl（pH8.0）, 100 mM KCl, 0.1 mM EDTA, 0.5% Tween 20, 1 mM DTT, 50% Glycerol
販売元
製造元
和光純薬工業株式会社
株式会社ニッポンジーン
TEL 0120-052-099
TEL (076) 451-6548
FAX 0120-052-806
FAX (076) 451-6547
E-mail labchem-tec@wako-chem.co.jp
E-mail info@nippongene.com
URL
URL http：//www.nippongene.com
http：//www.wako-chem.co.jp
本品は、試薬（試験研究用）として販売しているものです。
医薬品の用途には使用しないでください。
For research use only
NIPPON GENE CO., LTD.
URL http://www.nippongene.com
プロトコール例
ご使用になる PCR 機器やプライマー配列、鋳型 DNA などにより PCR 反応の至適条件は異なり
ます。本プロトコールはあくまで参考データとしてご使用ください。
(1) 2-Step PCR
(2) 3-Step PCR
ゲノム DNA を鋳型とした、約 500 bp のフラグメント
の 2-Step PCR プロトコール例。
Template DNA
10×Brilliant buffer
dNTP Mixture (2.5 mM each)
Primer-forward (10 pmol/μl)
Primer-reverse (10 pmol/μl)
Hot-Start Gene Taq (2.5 units/μl)
Total (d.d.H2O up to)
↓
95℃
5 min.
95℃
30 sec.
30 cycles
68℃
90 sec.
68℃
3 min.
4℃
↓
電気泳動（PCR products 5μl）
ゲノム DNA を鋳型とした、約 500 bp のフラグメント
の 3-Step PCR プロトコール例。
50‐100 ng
5μl
4μl
1μl
1μl
0.5μl
50μl
Template DNA
10×Brilliant buffer
dNTP Mixture (2.5 mM each)
Primer-forward (10 pmol/μl)
Primer-reverse (10 pmol/μl)
Hot-Start Gene Taq (2.5 units/μl)
Total (d.d.H2O up to)
↓
95℃
5 min.
95℃
30 sec.
60℃
30 sec.
35 cycles
72℃
60 sec.
72℃
3 min.
4℃
↓
50‐100 ng
5μl
4μl
1μl
1μl
0.5μl
50μl
電気泳動（PCR products 5μl）
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20110422KM
For research use only