docjärjestäminen tilalla Alkiohuuhtelun järjestäminen tilalla Mikä
download 
Report Transcription
järjestäminen tilalla Alkiohuuhtelun järjestäminen tilalla Mikä
20.3.2015 Alkiohuuhtelun järjestäminen tilalla järjestäminen tilalla Mikä alkio on? • Viikon ikäinen, munasolu + siittiö • Koko noin 1/10 mm • Pyöreä pallo, jossa • kuori eli zona • sisällä soluja • Solut vielä kaikki samanlaisia • voidaan irrottaa muutama solu ilman että alkio kärsii • Irrallaan kohdunsarven kärjessä Eläinlääkäri Kirsi Vartia, Faba Vasikoita alkioista Miten alkiota saadaan? • Naudalta irtoaa yleensä vain yksi munasolu • Superovulaatio: – annetaan FSH‐hormonia: ‐> useita munasoluja irtoaa yhtä aikaa – prostaglandiini‐hormonilla eläin tulee kiimaan – siemennetään – huuhdellaan alkiot viikon kuluttua SUPEROVULAATIO VASTAANOTTAJAT LUOVUTTAJA ALKIOT ALKIONSIIRTO ALKIOHUUHTELU SIEMENNYS KÄSITTELYT, PAKASTUS KIIMOJEN SYNKRONOINTI VASIKAT Huuhdeltava eläin Follikkeliaallot määrittävät huuhteluaikataulua • Halutaan paljon jälkeläisiä • Hieho: – siemennyskokoinen – munasarjatoiminta käynnistynyt – säännöllinen kiimakierto • Lehmä: – palautunut poikimisesta – munasarjatoiminta käynnistynyt – säännöllinen kiimakierto – hyvä yleiskunto 1 20.3.2015 Vastaanottaja • • • • • Ei haluta omaa jälkeläistä Terve Hedelmällisyys ok Kiimakierto käynnissä Kohtu palautunut poikimisesta Huuhtelun suunnittelu • • • • • Hyvä aloittaa pian eläimen poikimisen jälkeen Hieholla vähän ennen vuoden ikää Yhteys huuhteluryhmän eläinlääkäriin Tarkka kiimanseuranta ja muistiinpanot Mahdollisimman tasainen ruokinta ja olosuhteet – Tee muutto karsinaan/parteen ajoissa – Totuta eläin käsittelyyn Aikataulutus • Ohjelma aloitetaan 9‐12 vrk aloituskiimasta • Tärkeää tietää seisovan kiiman ajankohta • Kiiman päätyttyä ilmoitetaan huuhtelueläinlääkärille – > suunnittelee huuhteluohjelman sekä vastaanottajien synkronoinnit – > lähettää ohjeet tilalle ja tilan eläinlääkärille Tila: xxx, xxxx HUUHTELUOHJELMA Huuhteleva ell: Kirsi Vartia p. 040 3115 329 HUUHDELTAVA ELÄIN: Lola VASTAANOTTAJAT: PVM LÄÄKITYS 23.2 kierukka 1.3 pg PVM 1.3 LÄÄKITYS pg: 680 Yhteistyötä ! • Perusteelliset kirjalliset ohjeet • Aina voi kysyä !! • Jalostusasiantuntija valitsee eläimet ja siemennyssonnin • Oma eläinlääkäri tarkastaa eläimet tilalla • Seminologi siementää • Alkionsiirtoseminologi avustaa huuhtelupäivänä HUUHDELTAVA ELÄIN:Lola VASTAANOTTAJAT: PVM su 15.3 ma 16.3 ti 17.3 LÄÄKITYS LÄÄKITYS JA ANNOS 12 ml KLO A: FOLLTROPIN 2,0 ml AAMU I: FOLLTROPIN 2,0 ml ILTA A: FOLLTROPIN 1,5 ml AAMU I: FOLLTROPIN 1,5 ml ILTA A: FOLLTROPIN 1,5 ml AAMU PROSTAGLANDIINI + ILTA I: FOLLTROPIN 1,5 ml ke A: FOLLTROPIN 1,0 ml + AAMU 18.3 PROSTAGLANDIINI ILTA I: FOLLTROPIN 1,0 ml HUUHDELTAVAN ELÄIMEN KIIMANTARKKAILU: SEISOVAN KIIMAN AJANKOHTA: SIEMENNYS ALOITETAAN 12 H SEISOVASTA KIIMASTA PVM TOIMENPIDE KLO PROSTAGLANDIINI KIERUKAT POIS VASTAANOTTAJIEN KIIMANTARKKAILU MERKITÄÄN ERILLISELLE LOMAKKEELLE KOMMENTTEJA 1.SIEMENNYS ALOITUSKIIMAN PVM : 4-5.3 2. SIEMENNYS 3. SIEMENNYS HUUHTELU: 27.3.2015 HUUHTELUN JÄLKEINEN PROSTAGLANDIINI : 30.3.2015 2 20.3.2015 HUUHDELTAVA ELÄIN:Lola VASTAANOTTAJAT: HUUHDELTAVA ELÄIN:Lola VASTAANOTTAJAT: PVM su 15.3 ma 16.3 ti 17.3 LÄÄKITYS PVM su 15.3 ma 16.3 ti 17.3 LÄÄKITYS LÄÄKITYS JA ANNOS 12 ml KLO A: FOLLTROPIN 2,0 ml AAMU I: FOLLTROPIN 2,0 ml ILTA A: FOLLTROPIN 1,5 ml AAMU I: FOLLTROPIN 1,5 ml ILTA A: FOLLTROPIN 1,5 ml AAMU PROSTAGLANDIINI + ILTA I: FOLLTROPIN 1,5 ml ke A: FOLLTROPIN 1,0 ml + AAMU 18.3 PROSTAGLANDIINI ILTA I: FOLLTROPIN 1,0 ml HUUHDELTAVAN ELÄIMEN KIIMANTARKKAILU: SEISOVAN KIIMAN AJANKOHTA: SIEMENNYS ALOITETAAN 12 H SEISOVASTA KIIMASTA PVM TOIMENPIDE KLO PROSTAGLANDIINI KIERUKAT POIS VASTAANOTTAJIEN KIIMANTARKKAILU MERKITÄÄN ERILLISELLE LOMAKKEELLE KOMMENTTEJA LÄÄKITYS JA ANNOS 12 ml KLO A: FOLLTROPIN 2,0 ml AAMU I: FOLLTROPIN 2,0 ml ILTA A: FOLLTROPIN 1,5 ml AAMU I: FOLLTROPIN 1,5 ml ILTA A: FOLLTROPIN 1,5 ml AAMU PROSTAGLANDIINI + ILTA I: FOLLTROPIN 1,5 ml ke A: FOLLTROPIN 1,0 ml + AAMU 18.3 PROSTAGLANDIINI ILTA I: FOLLTROPIN 1,0 ml HUUHDELTAVAN ELÄIMEN KIIMANTARKKAILU: VASTAANOTTAJIEN KIIMANTARKKAILU MERKITÄÄN ERILLISELLE LOMAKKEELLE SIEMENNYS ALOITETAAN 12 H SEISOVASTA KIIMASTA PVM TOIMENPIDE 1.SIEMENNYS 1.SIEMENNYS 2. SIEMENNYS 2. SIEMENNYS KLO KOMMENTTEJA 3. SIEMENNYS HUUHTELU: 27.3.2015 HUUHTELUN JÄLKEINEN PROSTAGLANDIINI : 30.3.2015 HUUHTELU: 27.3.2015 HUUHTELUN JÄLKEINEN PROSTAGLANDIINI : 30.3.2015 HUUHDELTAVA ELÄIN:Lola VASTAANOTTAJAT: PVM su 15.3 ma 16.3 ti 17.3 LÄÄKITYS LÄÄKITYS JA ANNOS 12 ml KLO A: FOLLTROPIN 2,0 ml AAMU I: FOLLTROPIN 2,0 ml ILTA A: FOLLTROPIN 1,5 ml AAMU I: FOLLTROPIN 1,5 ml ILTA A: FOLLTROPIN 1,5 ml AAMU PROSTAGLANDIINI + ILTA I: FOLLTROPIN 1,5 ml ke A: FOLLTROPIN 1,0 ml + AAMU 18.3 PROSTAGLANDIINI ILTA I: FOLLTROPIN 1,0 ml HUUHDELTAVAN ELÄIMEN KIIMANTARKKAILU: SEISOVAN KIIMAN AJANKOHTA: SIEMENNYS ALOITETAAN 12 H SEISOVASTA KIIMASTA TOIMENPIDE KIERUKAT POIS SEISOVAN KIIMAN AJANKOHTA: 3. SIEMENNYS PVM PROSTAGLANDIINI KLO PROSTAGLANDIINI KIERUKAT POIS VASTAANOTTAJIEN KIIMANTARKKAILU MERKITÄÄN ERILLISELLE LOMAKKEELLE KOMMENTTEJA 1.SIEMENNYS 2. SIEMENNYS Muutama vinkki • • • • • • • • • • • Siemennyssonnin valinta Riittävä annosmäärä Varoita päivystystä huuhtelusiemennyksistä Vastaanottajia tarvitaan edes muutama Muista sekoittaa hormonin neste ja kuiva‐aine Säilytä hormoni jääkaapissa ja yritä olla pudottamatta pulloa Muista prostaglandiinit! Kerro, jos sinulla on jossakin varapakasteita Tehdään suunnitelma varapakasteista Soita jos vähänkin epäilyttää meneekö oikein Siirrä tai myy alkiot! 3. SIEMENNYS HUUHTELU: 27.3.2015 HUUHTELUN JÄLKEINEN PROSTAGLANDIINI : 30.3.2015 Mitä huuhtelumaljalta löytyy? • Alkiohuuhtelussa Suomessa saadaan keskimäärin noin 7 siirtokelpoista alkiota (vaihteluväli 0‐ 50) • Usein myös hedelmöittymättömiä munasoluja ja alkioita joiden kehitys on pysähtynyt • Noin 10‐15 % huuhteluista ei tuota lainkaan siirtokelpoisia alkioita Alkiohuuhtelut 2008‐2014 350 300 250 [CELLRANGE] [CELLRANGE] [CELLRANGE] [CELLRANGE] 200 [CELLRANGE] [CELLRANGE] [CELLRANGE] 150 100 50 0 2008 2009 2010 2011 Conventional 2012 2013 2014 Sexed 3 20.3.2015 Seksattu siemen huuhteluissa n Siirtok. Alkiot/huuhtelu Deg/huuhtelu Ufo/huuhtelu Yht/huuhtelu Sex: hiehot Normaali: hiehot Sex: lehmät Normaali: lehmät 335 6,5 1753 7,2 122 5,0 509 9,2 1,7 2,9 11,2 1,6 2,3 11,1 1,9 5,1 11,9 1,4 2,3 12,9 Alkioiden genomimääritys Tavoitteena 10 solua alkiomassasta Genomimääritys alkiosta • Ensin katsotaan sukupuoli – Lehmä määritys päättyy yleensä tähän • Alkiot siirtoon/pakkaseen – Sonni katsotaan genomit • Alkiot pakkaseen odottamaan tulosta • Hollanti, Saksa, Ranska • Ranska: tiineyttävyys 48 % genomimääritetyillä pakasteilla • Tiineyttävyys vaihtelee 33‐65% välillä Ovum‐Pick‐Up eli OPU • Munasolujen keräys eläimen munasarjoista ultraääniavusteisesti munasolujen kypsytys laboratoriossa hedelmöitys viljely 4 20.3.2015 OPU OPU & alkioiden in vitro‐tuotanto OPU • 1978: ensimmäinen “koeputkilapsi” Louise Brown LUOVUTTAJA ALKIONSIIRTO MUNASOLUT ALKIOTUOTANTO LABORATORIOSSA • 1981: enimmäinen koeputkivasikka Virgil OPU‐ALKIOT VASTAANOTTAJAT • 1987: OPU‐tekniikka toimivaksi naudalla (Tanska, Hollanti) VASIKAT SIEMEN • Suomessa OPU käyttöön 1998, ensimmäinen koeputkivasikka Nopu 1999 SONNI OPUn käyttökohteet OPU Euroopan mittakaavassa • Jalostusohjelmat – perinteisen alkiohuuhtelun rinnalla • Työkaluna pidemmälle vietyjen lisääntymistekniikoiden ja biotekniikan kehittämisessä (transgeeniset eläimet, kloonaus) Lähde: AETE 5 20.3.2015 Alkioita / OPU / eläin Tehotonta? Miksi tehdä OPUa? • Jokainen munasoluerä voidaan haluttaessa hedelmöittää eri sonnilla useita eri paritusmahdollisuuksia, myös seksattu siemen • Voidaan kerätä 1‐2 kertaa / viikko • Voidaan kerätä myös alkutiineyden aikana (3 ensimmäistä tiineyskuukautta) • Eläin, josta ei saada huuhtelemalla alkioita voi toimia OPU:ssa hyvin Lähde: AETE Alkiohuuhtelu OPU 6 siirtokelpoista alkiota/ huuhtelu 2 OPU‐sessiota / luovuttaja / viikko 10 huuhtelua / vuosi 1,5‐2 alkiota / sessio 60 alkiota / vuosi 150 alkiota / vuosi 35 vasikkaa / vuosi 70 vasikkaa / vuosi Luovuttaja Samantapaiset kriteerit kuin alkionluovuttajalla: • Genetiikka • Terve • Kuntoluokka • SEN SIJAAN voi olla tiine Tarvittava välineistö • Ultraäänilaite jossa sektorianturi kiinnitettävissä neulanohjaimeen • Alipainepumppu • Neulat, letkut, keräysputket... 6 20.3.2015 OPU ‐ Toimenpide • Epiduraalipuudutus • (Tarvittaessa kevyt rauhoitus) • Suolen tyhjennys, normaalit puhdistukset • Anturi + neulanohjain + neula emättimeen, käsin rektaalisesti ohjataan munasarja anturin päätä vasten neula follikkeliin, munasolu ja follikkelineste letkua pitkin putkeen OPERATOR HAND US PROBE WITH NEEDLE VAGINAL WALL CERVIX OVARY Haasteita Tulevaisuuden visiot • Pitkään jatkuvassa keräämisessä eläimen hyvinvointi? • OPU‐alkioiden pakastaminen • Biopsian otto (genomimääritys) ja biopsioidun alkion pakastaminen • OPU VikingGeneticsin jalostusohjelmaan 2014 syksyllä, alkuun tutkimusta ja kehitystyötä yhdessä MTT:n kanssa • Täydentämään huuhteluja, ei korvaamaan huuhtelutoimintaa Anti‐Müllerian ‐hormoni Kiitos! • Follikkelien granulosasolujen erittämä hormoni • Ennustaa 3‐7 mm mittaisten follikkelien määrää munasarjoissa • kertoo superovulaatiovasteesta eli alkiomäärästä • Näytteenoton ajankohta ei ole riippuvainen kiimakierron vaiheesta 7
