2D-Gel - SERVA Electrophoresis GmbH

Transcription

2D-Gel - SERVA Electrophoresis GmbH
News
Kundenzeitschrift der SERVA Electrophoresis GmbH
2D-GelElektrophorese
SERVAGel ™ Fertiggele
Jetzt auch mit 10 Probetaschen
SERVA ICPL™ Quadruplex Kit
Jetzt mit viertem Label
Trypsin NB
Jetzt mit internem Standard
Herbst 2008
4 -7
G
roßformatige
2D-Gelelektrophorese
Dreamteam SERVA-Hoefer
8-10
D
IAS II
Geldokumentation und Auswertung
11
B
2
lue Marine HTS
Variables Submarine
DNA-Elektrophorese-System
Inhalt
12 -13
S
ERVAGel ™
Jetzt auch mit 10 Probetaschen
14 -15
S
ERVA ICPL™ Quadruplex Kit
T
rypsin NB
S
ingleQuant
Jetzt mit viertem Label
16
Jetzt mit internem Standard
17
Zur Bestimmung der Proteinkonzentration
18 -19
S
ERVALYT ™ PRECOTES™/PreNets™
und Blank PRECOTES™/PreNets™
Fertiggele für die horizontale Isoelektrische
Fokussierung
3
G roßformatige
2D-Gelelektrophorese:
Dreamteam SERVA-Hoefer
Für beste Ergebnisse in der großformatigen 2D-Gelelektrophorese:
I. Von SERVA IPG-Streifen, 2D-Marker sowie Reagenzien (Gel- und Puffer-Lösungen, Färbekits)
II. Von Hoefer die Elektrophorese-Einheit IEF100 für die Fokussierung der IPG-Streifen
(1. Dimension) sowie die SE 900 Vertikale Elektrophorese-Kammer für die anschließende
SDS PAGE (2. Dimension).
1. Dimension: Isoelektrische Fokussierung
Hoefer IEF100 IEF-Elektrophoresegerät
Zur Trennung Ihrer Proteinprobe
Die IEF100-Einheit hat die Kapazität für
mittels SERVA IPG BlueStrips in der
sechs IPG-Streifen mit Längen zwischen
ersten Dimension empfehlen wir den
7 und 24 cm. Das Gerät ist mit einem
Einsatz der Hoefer-Einheit IEF100.
integrierten 12.000 Volt Netzgerät sowie
Damit können Sie die Isoelektrische
einem Peltier-Element zur Kühlung der
Fokussierung schnell, einfach und
Streifen ausgestattet, der Fokussierungs-
reproduzierbar durchführen.
tray ist reversibel mit der Kühlplatte
verbunden. Die Proben können wahlweise per Cup-Loading oder durch
Rehydratation aufgetragen werden.
IEF-Protokolle sind leicht zu programmie-
Lieferumfang (Kat.-Nr. IEF100)
ren und auszuwählen, die Bedienung ist
1 IEF100-Einheit • 1 Lauf- und Rehydratationstray
10 Cup-Sets (à 6 Cups) • 1 Packung Elektrodendochte (252 Stk.)
1 Pinzette • 1 Reinigungsbürste
einfach und intuitiv. Dank der hohen
Leistung des Netzgeräts ist die IEF in
vergleichbar kurzer Zeit bei bester
Spezifikationen
Volt: 12.000 V • Ampere: 10 mA
Auflösung: 1 μA
Temperaturbereich: 15 – 25 °C
Cup-Volumen: 240 μl
Abmessungen (B x H x T):
38 x 19 x 27 cm
Gewicht: 6 kg
Schnittstellen: Ethernet, RS232
Trennung durchgeführt.
Über das Display können Sie jeden
einzelnen Streifen in Echtzeit monitoren
(grafisch, tabellarisch). Auf dem Bildschirm können Sie das komplette
IEF-Protokoll jedes einzelnen Streifen
ablesen, die Daten können bei Bedarf
über die an der Front leicht zugängliche
Produkt
Kat.-Nr. Menge Preis
IEF100 Unit IEF100 1 Gerät 7.450,00 a
4
Schnittstellen (Ethernet, RS232)
ausgelesen werden.
SERVA IPG BlueStrips
SERVA IPG BlueStrips sind getrocknete
Gelstreifen mit immobilisiertem
pH-Gradienten für die hochauflösende
2D-Gelelektrophorese von Proteinen.
Zur Stabilisierung des Gels ist die homogene Polyacrylamid-Gelmatrix kovalent
an die Trägerfolie GEL-FIX™ gebunden.
Bis zum Gebrauch ist die Oberfläche der
Gelmatrix zusätzlich durch eine Deckfolie (GEL-FIX™ for Covers) geschützt.
Alle Gelstreifen einer Packung stammen
aus einer Produktionscharge. Jeder
SERVA IPG BlueStrip trägt seine individuelle Lot-Nummer. Dies ermöglicht den
GLP/GMP-konformen Einsatz der
SERVA IPG BlueStrips.
Gelagert bei -20 °C sind die Gelstreifen
mindestens 18 Monate haltbar. Jede
Packung enthält 12 Gelstreifen mit
jeweils 3 mm Breite. Die Gelstreifen sind
in den pH-Gradienten 3 – 10, 3 – 10 NL,
3 – 6, 4 – 7 und 6 – 10 sowie in den
Längen von 7 cm, 18 cm und 24 cm
erhältlich.
pH-Gradient
Länge 7 cm
Länge 18 cm
Länge 24 cm
SERVA IPG BlueStrips (12 Streifen)
3 – 10
3 – 10 NL
3–6
4–7
43001.01
43002.01
43005.01 43003.01
43011.01
43012.01
43015.01 43013.01
43021.01
43022.01
43025.01 43023.01
Preis
6 – 10
43004.01 57,00 a
43014.01 80,00 a
43024.01 92,50 a
pH-Gradient
Kat.-Nr.
Recommended for rehydration: SERVALYT™, 2 ml
3 – 10
3 – 10 Iso-Dalt for 2D
3–6
4–7
42940.04
42951.04
42944.04 42948.04
Preis
6–9
42913.04 35,00 a
Nach einer aktuell getroffenen Vereinbarung wird Hoefer Inc., USA,
ab sofort die SERVA IPG BlueStrips weltweit vertreiben.
Für Sie bedeutet das, dass Sie von den im Rahmen dieser
starken Partnerschaft gemachten Erfahrungen im
weltweiten Einsatz der SERVA IPG BlueStrips in
SERVA
und Hoefer –
eine starke Allianz.
Kombination mit dem Hoefer 2D-System
profitieren.
www.serva.de
5
G roßformatige 2D-Gelelektrophorese:
Dreamteam SERVA-Hoefer
2. Dimension: SDS PAGE
Hoefer SE900 Vertikale Slabgel-Elektrophoresekammer
Führen Sie mit der SE900 hoch-
Jetzt können die Gele einfach in die
reproduzierbare SDS-Polyacrylamidgel-
bereits mit Laufpuffer gefüllte Kammer
elektrophorese durch. Nach erfolgter
eingesetzt werden. Dank der Konstruk-
Isoelektrischer Fokussierung können Sie
tionsweise der Kammer (Iso-Dalt-Design)
die auf IPG-Streifen getrennten Proben
existiert keine obere Pufferkammer, es
nun in der 2. Dimension auf Gelen im
gibt keine Dichtigkeitsprobleme und der
Format 25 x 20 cm trennen.
Puffer kann wieder verwendet werden.
Dies minimiert den Pufferverbrauch
Die SE900-Einheit fasst sechs vertikale
erheblich. Eine gleichmäßige Tempera-
Gele, die Laufrichtung ist horizontal. Zur
tur für reproduzierbare Ergebnisse wird
einfachen Handhabung sind die groß-
durch eine externe Kühlung kombiniert
formatigen Glasplattenkassetten fertig
mit interner Pufferzirkulation erzielt.
mit Spacer montiert und über ein Gelenk
Nach erfolgter Elektrophorese kann die
miteinander verbunden, die Glasplatten
Kammer einfach über eingebaute
sind auch als „Low-Fluorescence“-Gläser
Ablasshähne geleert werden.
erhältlich. Nach gleichzeitigem Gießen
von bis zu sechs Gelen im Gelgießstand
werden die fokussierten IPG-Streifen auf
die 2D-Tasche aufgelegt und mit
Agarose fixiert. Dies gewährleistet einen
optimalen Übergang von der ersten
in die zweite Dimension.
Spezifikationen
Glasplattengröße (B x H): 28 x 21 cm
Gelgröße (B x H): 25 x 20 cm
Wattmax.: 100 W • Voltmax.: 600 V • Amperemax.: 1000 mA
Temperaturmax.: 45 °C • Gewicht: 13,6 kg
Geräteabmessungen (B x H x T): 43 x 43 x 20 cm
Lieferumfang (Kat.-Nr. SE900-1.0)
Großformatiges PAGE System
6 Glaskassetten
Gelgießstand komplett
Lieferumfang (Kat.-Nr. SE900)
Großformatiges PAGE System
ohne Zubehör
Produkt
Kat.-Nr.
Menge
Preis
SE900 Vertical Slab Gel Electrophoresis Unit, Complete SE900-1.0 1 System 6.250,00 a
SE900 Vertical Slab Gel Electrophoresis Unit
SE900
1 System 4.800,00 a
SERVA 2D Proteome Marker Proteine
Der SERVA Proteome Marker ist eine
Geliefert wird der SERVA Proteome
Mischung aus acht unterschiedlichen
Marker als Kit mit 5 Vials, jedes Vial
Proteinen, ausgewählt unter besonderer
enthält ausreichend Protein für 5 bis
Hinsicht auf die Eignung im Einsatz
10 Anwendungen.
in der 2D-Gelelektrophorese sowie für
pl = >
LC/MS-Anwendungen. Die in äquimolaren Mengen vorliegenden Proteine
decken den gesamten physiologischen
pH-Bereich ab und besitzen MolekularMit freundlicher Genehmigung
der Deutschen Gesellschaft für
Proteomforschung (DGPF).
Erstmals vorgestellt im Rahmen der
„10. Arbeitstagung Mikromethoden
in der Proteinchemie“
(2003, Martinsried)
gewichte zwischen 11,7 und 77 kDa.
Die Entwicklung des SERVA Proteome
Marker erfolgte in enger Zusammenarbeit mit der Deutschen Gesellschaft
für Proteomforschung (DGPF).
Produkt
Kat.-Nr. Menge Preis
SERVA Proteome Markers 39220.01 1 Kit
245,00 a
SERVA Reagenzien
• Nach erfolgter Elektrophorese können
Für die 2. Dimension bietet SERVA
gebrauchsfertige Reagenzien, mit denen
Sie die Gele entweder mit SERVA
Sie in Kombination mit der SE900 Elek-
Blue R oder der MS-kompatiblen
trophoreseeinheit von Hoefer garantiert
SERVA Densi Stain Blue G Färbelösung
beste Trennergebnisse erzielen:
färben, eine deutlich sensitivere
Alternative ist die ebenfalls MSkompatible SERVA-Silberfärbung.
• Zur Herstellung der Gele eignen sich
am besten die 40-prozentige Acrylamid/
Bisacrylamid Lösung 37,5:1 sowie
TEMED, APS. Verwenden Sie zur
Fixierung der IPG-Streifen „Agarose
SERVA for DNA Electrophoresis“ und
für die Elektrophorese LaemmliLaufpuffer.
Produkt
Acrylamid / Bisacrylamide-Solution,
37.5:1 (40 % w/v; 2.6 C)
TEMED
APS
Agarose for DNA Electrophoresis
10 x Laemmli Buffer
SERVA DensiStain Blue G Staining
Solution, 2fold concentrate
SERVA Blue R Staining Kit
SERVA Silver Staining Kit SDS PAGE
www.serva.de
Kat.-Nr.
Menge
10681.02 4 x 500 ml
35930.02
13375.05
11404.07
42556.01
25 ml
250 g
500 g
2l
35078.01 500 ml
42531.01 1 Kit
35076.01 1 Kit
Preis
96,00 a
18,50 a
13,00 a
295,00 a
47,50 a
89,00 a
76,00 a
115,00 a
7
D IAS II –
Geldokumentation und Auswertung
Das völlig neu konzipierte Geldokumentations- und Gelauswertesystem DIAS II
bietet modernste Technik in Bildaufnahme und Auswertung. Zur Erzielung optimaler
Ergebnisse besteht das System aus drei Hauptkomponenten: dem Kabinett, einer
Digitalkamera sowie der 1D-Auswertesoftware.
Das Kabinett
Die Kamera
Vollständig aus Stahl gefertigt, extrem
Bei der für dieses System ausgewählten
stabil und widerstandsfähig im alltäg-
Digitalkamera handelt es sich um die
lichen Einsatz, dank optimaler Gehäuse-
Canon PowerShotG9. Diese Kamera
dimensionen und Design aber dennoch
liefert gerade in der Geldokumentation
leicht und gut handhabbar. Und licht-
die besten Ergebnisse, insbesondere
dicht. Die großformatige Tür und die
unter der Beachtung der Daten, die bei
leichtgängige Schiebevorrichtung für
anschließender qualitativer und quantita-
einen Transilluminator erlauben ein
tiver Auswertung erzielt werden. Die
einfaches Handhaben der Gele oder
Kamera ist fest in das System integriert,
anderer Objekte. Neben einem UV- oder
die Bedienung erfolgt ausschließlich
Weißlicht-Transilluminator kann das
PC-gesteuert (PC ist nicht im Lieferum-
Kabinett mit kombiniertem UV/Weißlicht-
fang enthalten), die gewonnenen Bilder
Auflicht sowie mit reinem Weißlicht-
bzw. Daten werden ebenfalls direkt auf
Auflicht ausgestattet werden. Im Liefer-
den Rechner übertragen.
umfang enthalten ist ein Filterhalter mit
eingebautem UV-Filter. Die Beleuchtungselemente sind einfach und sicher
von außen zu bedienen.
• Anwendungsoptimiertes Design
• Stabiles, leichtes Gehäuse
• Großformatige Tür
• Einfache Handhabung der Gele /
Objekte
• Lichtdicht
• Geringer Platzbedarf
• Komplett von außen bedienbar
8
• 12.1 Megapixel
• JPEG, TIFF oder RAW-Format
• Bis ISO 1600
• 6fach optischer Zoom mit
Bildstabilisator
• Steuerung und Speicherung über
externen PC (nicht im Lieferumfang
enthalten)
Die Software
Die 1D-Auswertesoftware GelScan 6.0
Zusätzlich zum Lieferumfang gehört
ermöglicht Ihnen die einfache, zuverläs-
GelScript 1.1, die Sie bei der Beschrif-
sige und umfassende Auswertung Ihrer
tung und Präsentation von Abbildungen
DNA-, RNA- oder Proteingele einschließ-
unterstützt. In erweiterten Versionen
lich des Exports der Daten in MS-Anwen-
ist GelScan als Pro und HTS
dungen wie Word , Excel oder Power-
verfügbar (s. u.).
™
™
Point . Banden werden automatisch
™
detektiert, manuelle Änderungen sind
jederzeit möglich. Eine dreidimensionale
GelScan 6.0 können Sie vier Wochen als
Darstellung erleichtert das Abgrenzen
Vollversion ohne Einschränkung testen
der Banden untereinander. Überbelich-
(Download siehe www.serva.de).
tete Gele werden korrigiert, Gele lassen
sich transparent übereinander legen
oder nebeneinander berechnen. Das
GLP-konforme Programm erstellt zudem
zu jedem Bild im Hintergrund automatisch eine lückenlose Historie und damit
ein unveränderbares Protokoll einschließlich Benutzername, Datum sowie aller
durchgeführten Kalkulationen und
Manipulationen.
www.serva.de
9
D IAS II –
Geldokumentation und Auswertung
Molekulargewichtsbestimmung,
Mögliche Erweiterungen
Quantifizierung und Expressions-
In der Pro-Version können zusätzlich
analyse
RFLP-Gele ausgewertet oder Cluster-
Bei der Bestimmung von Molekular-
Analysen durchgeführt werden. Die
gewicht oder isoelektrischem Punkt
HTS-Version verfügt darüber hinaus
können vorhandene Standards genutzt
über die Möglichkeit, datenbankgestützt
oder benutzerdefinierte Standards ein-
Gele in Hochdurchsatz-Anwendungen
gesetzt werden, selbst schief laufende
mit bis zu 480 Spuren je Gel auszuwer-
Spuren können ausgewertet werden.
ten (Molekulargewichtsanalysen, Ex-
Mithilfe eines bekannten Mengenstan-
pressionsanalysen, Quantifizierungen).
dards können DNA- oder Proteinmengen
je Bande berechnet werden. Dank des
ebenfalls im Programm enthaltenen
Moduls zur Expressionsanalyse kann
durch Vergleich des Bandenmusters in
• Bestimmung des Molekulargewichts
(MW)
unterschiedlichen Gelen die An- bzw.
• Bestimmung des isoelektrischen
Punkts (pI)
Abwesenheit einer Bande und damit
• Quantifizierung
eines Proteins oder bestimmten DNA-
• Expressionsanalyse
Fragments automatisch ermittelt
werden.
• Automatische Bandendetektion,
editierbar
GelScript 1.1
• Automatische Hintergrundreduktion,
editierbar
Mit der zum Lieferumfang gehörenden
• Datenexport in MS-Anwendungen
Gelscript 1.1 Software erstellen Sie in
wenigen Minuten professionelle
Gelbeschriftungen und bereiten so Ihre
Abbildungen für Präsentationen und
• GLP-konform
• In der Pro-Version mit RFLP und
Clusteranalyse
Publikationen vor, alle Abbildungen sind
• In der HTS-Version zusätzlich für
Hochdurchsatz-Anwendungen
frei skalierbar. Neben Werkzeugen zur
• GelScript 1.1 zur Bildbeschriftung
Banden- und Spurenbeschriftung
können Sie zudem mit Hilfe von
Separationslinien unterschiedlichste
Banden und Spuren in einer Abbildung
zusammenfügen.
Produkt
Kat.-Nr.
Digital Imaging and Analysis System II DIAS-II
GelScan 6.0
GSV60
10
Menge
1 System
1 System
Preis
4.950,00 a
1.650,00 a
B lueMarine HTS –
Variables Submarine DNA-Elektrophorese-System
Die neue Submarine-Elektrophorese-
Auswertung der Gele nach
kammer BlueMarine HTS bietet Ihnen
Hochdurchsatzanwendung
ein neu entwickeltes, flexibles System
Zur Auswertung von Gelen mit 102
zur DNA-Analytik.
Probentaschen können Sie die auf
Ob Einzelproben mit langer Laufstrecke
Seite 10 beschriebene 1D-Software
oder komplette 96-Well-Mikrotiterplatten,
GelScan HTS einsetzen. Die Software
BlueMarine HTS bietet eine schnelle,
erkennt alle Spuren im Gel automatisch
übersichtliche Analytik für bis zu 102
und ordnet sie zu einer vereinfachten
Proben inkl. Größen- oder Mengenstan-
Analyse nebeneinander an. Dies ermög-
dards. Mit der BlueMarine HTS haben
licht eine rasche und unkomplizierte
Sie ein System, das darüber hinaus in
Auswertung des Gels in allen drei Modi:
Verarbeitung und Material höchsten
Expressionsanalyse, Größen- sowie
Ansprüchen gerecht wird.
Mengenbestimmung.
Beim Gießen des Gels im UV-durchlässigen Gelträger aus Acryl können Sie an
sechs unterschiedlichen Positionen
Kämme einsetzen. Die Kämme sind aus
Aluminium gefertigt und dadurch absolut
formstabil und unverwüstlich, jeder Kamm
bildet 17 Probentaschen aus. Durch eine
unterschiedliche Links-/Rechts-Orientierung des Kamms können Sie wahlweise
die Probentaschen übereinander oder
versetzt anordnen. Durch eine versetze
Anordnung und bei Einsatz aller Kämme
erhalten Sie 102 Spuren mit einer jeweiligen Trennstrecke von 3 cm.
• Flexible Anordnung der Probentaschen
• Flexible Trennstrecken
• Gelformat (B x L): 175 x 192 mm für max. 102 Proben
• Geräteabmessung (B x L x H):
195 x 380 x 80 mm
• Inkl. sechs unverwüstlichen
Kämmen aus Aluminium
Produkt
BlueMarine HTS
GelScan 6.0 HTS
Kat.-Nr.
BM-HTS
GS-V60HTS
Menge
1 System
1 Software
Preis
1.095,00 a
2.900,00 a
11
S ERVAGel
™
–
Jetzt auch mit 10 Probentaschen
Ab sofort bietet SERVA das SERVAGel ™ Fertiggel für die vertikale Elektrophorese
im Minigelformat (10 x 10 cm) auch mit 10 Probentaschen an.
Ihr Vorteil: ein mit 50 μl im Vergleich zu
Daneben sind Neutralgele (pH 7.4) mit
35 μl bei Gelen mit 12 Probentaschen
breitem Trennbereich vergleichbar den
größeres Probenvolumen. Wählen Sie
Gradientengelen erhältlich. Diese Gele
jetzt je nach Anwendung zwischen Gelen
zeichnen sich durch deutlich längere
mit 10 oder 12 Probentaschen oder mit
Lagerfähigkeit ohne Qualitätsverlust aus
2D-Probenauftrag.
(> 1 Jahr).
SERVAGel ™ Fertiggele sind in form-
Wählen Sie jetzt je nach Ihrer Protein-
stabile Kassetten im Format 10 x 10 cm
probe zwischen 24 unterschiedlichen
gegossen. Sie sind als Tris-Glycin-Gele
Geltypen. Sollten Sie dennoch für Ihre
in homogenen Acrylamid-Konzen-
Anwendung einen davon abweichenden
trationen sowie mit Konzentrations-
Geltyp benötigen, fragen Sie uns. Durch
gradienten verfügbar.
unsere flexible Produktionsanlage
können wir schnell und dennoch in
gewohnt hoher Qualität Gele nach Ihren
Anforderungen herstellen. Fragen Sie
uns, am einfachsten per E-Mail
(Tech.Service@serva.de) oder per
Telefon (+49 6221 13840-44).
SERVAGel ™ Fertiggele: Trennbereiche
Gel Typ*
5
25
50
75
100
TG 8%
TG 10%
TG 12%
TG 14%
TG 16%
TG 4 –12 %
TG 8 –16 %
TG 4 –20 %
2D 10%
2D 12%
2D 14%
2D 8 –16%
N pH 7.4
NG pH 7.4
* TG
* 2D
12
= Tris-Glycine
= 2-Dimensional
*N
* NG
= Neutral
= Neutral Gradient
150
200 kDa
SERVAGel ™: 10 Probentaschen
SERVAGel ™: 12 Probentaschen
SERVAGel ™: 1 2D-Probentasche
• Hohe Trennleistung, leichte Handhabung
• Kompatibel mit Hoefer Mini Vertikalsystemen SE260 und SE300
• Kompatibel mit Vertikalsystemen
weiterer Hersteller
• Regelmäßige Lieferung nach Terminvereinbarung (Abo) möglich
• Fertigung nach Kundenwunsch möglich
SERVAGel ™ Tris-Glycin Gele – homogen Kat.-Nr.
43209.01
SERVAGel ™ Tris-Glycine 8 %
43208.01
43211.01
SERVAGel ™ Tris-Glycine 10 %
43210.01
43213.01
SERVAGel ™ Tris-Glycine 12 %
43212.01
43215.01
SERVAGel ™ Tris-Glycine 14 %
43214.01
43217.01
SERVAGel ™ Tris-Glycine 16 %
43216.01
Probentaschen
10 Taschen
12 Taschen
10 Taschen
12 Taschen
10 Taschen
12 Taschen
10 Taschen
12 Taschen
10 Taschen
12 Taschen
Menge
10 Gele
10 Gele
10 Gele
10 Gele
10 Gele
10 Gele
10 Gele
10 Gele
10 Gele
10 Gele
Preis
120,00 a
120,00 a
120,00 a
120,00 a
120,00 a
120,00 a
120,00 a
120,00 a
120,00 a
120,00 a
SERVAGel ™ Tris-Glycin Gele – Gradient
Kat.-Nr.
43238.01
43232.01
43236.01
43230.01
43237.01
43231.01
Probentaschen
10 Taschen
12 Taschen
10 Taschen
12 Taschen
10 Taschen
12 Taschen
Menge
10 Gele
10 Gele
10 Gele
10 Gele
10 Gele
10 Gele
Preis
120,00 a
120,00 a
120,00 a
120,00 a
120,00 a
120,00 a
SERVAGel ™ Tris-Glycin Gele – 2D-Gele
SERVAGel ™ Tris-Glycine 2D-Gel, 10 %
SERVAGel ™ Tris-Glycine 2D-Gel, 12 %
SERVAGel ™ Tris-Glycine 2D-Gel, 14 %
SERVAGel ™ Tris-Glycine 2D-Gel, 8 – 16 %
Kat.-Nr.
43225.01
43226.01
43227.01
43228.01
Probentaschen
1 2D-Tasche
1 2D-Tasche
1 2D-Tasche
1 2D-Tasche
Menge
10 Gele
10 Gele
10 Gele
10 Gele
Preis
120,00 a
120,00 a
120,00 a
120,00 a
SERVAGel ™ Neutralgele
Kat.-Nr.
43222.01
43220.01
43223.01
43221.01
Probentaschen
10 Taschen
12 Taschen
10 Taschen
12 Taschen
Menge
10 Gele
10 Gele
10 Gele
10 Gele
Preis
120,00 a
120,00 a
120,00 a
120,00 a
SERVAGel Tris-Glycine 4 – 12 %
™
SERVAGel ™ Tris-Glycine 4 – 20 %
SERVAGel ™ Tris-Glycine 8 – 16 %
SERVAGel Neutralgel pH 7.4
™
SERVAGel ™ Neutralgel pH 7.4 Gradient
www.serva.de
13
S ERVA ICPL
™
Quadruplex Kit –
Jetzt mit viertem Label
„ICPL™ QUADRUPLEX Technology for
Der alleinige Lizenzhalter der ICPL -Technologie ist die
™
TopLab GmbH, Martinsried. SERVA Electrophoresis GmbH
hat von TopLab die weltweiten Vertriebsrechte erhalten
und mit der Bruker Daltonic GmbH, Bremen, eine
weltweite Vertriebspartnerschaft vereinbart. Die Software
ICPL™Quant wurde am MPI für Biochemie entwickelt und ist
quantitative Proteomics“1 – mit diesem
Poster wurde das vierte ICPL™-Isotopenlabel
(13C2D-Nic-Reagenz, s. Infokasten auf S. 15)
im Rahmen der HUPO 2008 in Amsterdam
vorgestellt.
als Freeware unter www.biochem.mpg.de/en/rg/lottspeich
oder www.serva.de erhältlich.
Die ICPL™ Methode hat den entscheidenden
Vorteil, dass die Markierung auf der Ebene
intakter Proteine erfolgt und somit vorliegende
ICPL™ Quadruplex Kit: Workflow
Vergleichende Analyse vier unterschiedlicher
Zelltypen oder -phasen
Proteinspezies (Isoformen, Abbauprodukte,
posttranslational modifizierte Proteinformen
etc.) unterschieden werden. Wegen der unterschiedlichen Massen der verschiedenen ICPL™Label wird die quantitative Information einfach
Zelltypen /
Zellphase 1
Zelltypen /
Zellphase 2
Zelltypen /
Zellphase 3
Zelltypen /
Zellphase 4
durch die Analyse der (LC)-MS Spektren
erhalten. Nach der Publikation von Schmidt et
Denaturierung und Alkylierung
al.2 im Jahr 2005 wurde die „ICPL™ DUPLEX“und sehr bald danach von Kellermann et al.3 die
„ICPL™ TRIPLEX“-Methodik zur vergleichenden
Analyse von bis zu drei Proben eingesetzt. Als
Isotopenmarkierung
neueste Entwicklung können Sie jetzt mit der
„ICPL™ QUADRUPLEX“-Technologie bis zu vier
Proben gleichzeitig quantifizieren.
Poolen der Proben
Datenauswertung mit ICPL™Quant –
kostenlos mit Ihrem ICPL™-Kit
Zur Auswertung von LC/MS-Daten ICPL™markierter Proteine wurde durch die Arbeits-
Fraktionierung der Proteine
(elektrophoretisch, chromatographisch)
gruppe Lottspeich am MPI für Biochemie in
Martinsried die Software ICPL™Quant 4
entwickelt und ebenfalls erstmals auf der
HUPO 2008 in Amsterdam vorgestellt.
Enzymatischer Verdau der Proteine in Peptide
Fraktionierung der Peptide
Massenspektrometrische Analyse, Identifikation, Quantifizierung
14
Die Software erlaubt die „One Button“Analyse der massenspektrometrischen
Daten. Dabei werden die ICPL™gelabelten Peptidsets (Duplex, Triplex,
Quadruplex) automatisch erkannt und,
unter Berücksichtigung der LC-Elutionsprofile und des Isotopeneffektes,
quantifiziert. ICPL™Quant selektiert auf
Wunsch regulierte Peptide für eine
MS/MS Identifikation, generiert VorläuferErgebnislisten für die MS/MS und reimportiert die Mascot Ergebnislisten zur
Kombination mit den Quantifizierungsergebnissen. Dieses Vorgehen erspart
die redundante, zeit- und kostspielige
Re-Identifizierung von bereits bekannten
Peptiden. Alle Daten können aus
ICPL™Quant in Excel™ -Tabellen
exportiert werden.
Referenzen
1 Halder, T.M a ., Dosch, D.b, Kersten, M.a, Brunner, A.b, Keidel,
E.b, Müller, B.c, Kellermann, J. b und Lottspeich, F.b, ICPL
(Isotope-Coded Protein Labeling) Quadruplex Technology
for quantitative Proteomics, HUPO 2008 P-MON-289.
2 Schmidt, A.b, Kellermann, J.b, Lottspeich, F.b, A novel
strategy for quantitative proteomics using isotope-coded
protein labels, Proteomics 2005, 5 [1], 4-15.
3 Kellermann, J.b, Lottspeich, F.b, Keidel, E.b, Jabs, W.d,
Hahner, S.d, Brand, S.d, Suckau, D.d, Non-Isobaric TriplexLabeling for Proteomics Strategies Compatible with Protein
Pre-fractionation, ABRF 2006, P160-S.
4 Brunner, A.b, Dosch, D.b, Wright, P.C.e, Kellermann, J.b, Lottspeich, F.b, ICPL Quant – a New Software Tool for Isotopelabeling Based Proteomics and Biomarker Discovery,
HUPO 2008, P-TUE-143.
a TopLab GmbH
b Max-Planck-Institut für Biochemie, Martinsried
c SERVA Electrophoresis GmbH
d Bruker Daltonik GmbH
e University of Sheffield
Hinweis: Die Poster 1, 3 und 4 finden Sie als Download unter www.serva.de
Isotopenlabel
Formel
Massendifferenz
1-(12C6 1H4 )-Nicotinoyloxy-succinimide
(12C-Nic-Reagent): Mr = 105.0215 Da
0
1-(12C6 2D4 )-Nicotinoyloxy-succinimide
(2D-Nic-Reagent): Mr = 109.0715 Da
4
1-(13C6 1H4 )-Nicotinoyloxy-succinimide
(13C-Nic-Reagent): Mr = 111.0419 Da
6
1-(13C62D4 )-Nicotinoyloxy-succinimide
(13C 2D-Nic-Reagent): Mr = 115.0919 Da
10
Produkt
SERVA ICPL™ Kit
SERVA ICPL™ Triplex Kit
SERVA ICPL™ Quadruplex Kit
www.serva.de
Kat.-Nr.
39230.01
39231.01
39232.01
Menge
2 x 6 Reaktionen
3 x 6 Reaktionen
4 x 6 Reaktionen
Preis
1.095,00 a
1.290,00 a
1.490,00 a
15
T rypsin NB –
Jetzt mit internem Standard
SERVA Trypsin NB Premium Grade wurde speziell für Anwendungen in der
Proteomanalyse entwickelt. Es ist insbesondere dafür geeignet, Proteine vor
der massenspektrometrischen Analyse in Peptide zu verdauen.
Nahezu jedes zu erwartende Trypsin-
Um Anforderungen gerecht zu werden,
Peptid kann nach Standardverdau eines
die für eine interne Kalibrierung trypsin-
einzelnen Proteins oder einer komplexen
spezifische Standardpeptide benötigen,
Proteinmischung gefunden werden.
hat SERVA einen Trypsin-Peptid-Stan-
Dank eines aufwändigen, eigens dafür
dard (TP-Standard, TPS) entwickelt, der
entwickelten Produktionsverfahren zeigt
die trypsintypischen Massen m / z 842
das SERVA Trypsin NB eine extrem
und 2211 darstellt. Der TP-Standard
niedrige autoproteolytische Aktivität und
erleichtert in einfacher Weise die interne
damit eine ausgezeichnete Stabilität
Kalibirierung, um die Massengenauigkeit
bei gleichzeitig hoher Spezifität und
der MS-Analyse zu erhöhen. Durch
Reinheit.
Konzentrationsveränderung kann der
interne Standard unterschiedlichsten
experimentellen Anforderungen
angepasst werden.
Der neue TP-Standard wird bei Trypsin
NB Premium Grade, MS approved
(Kat.-Nr. 37284) sowie bei Trypsin NB
Sequencing Grade (Kat.-Nr. 37283)
ohne Aufpreis mitgeliefert.
• Trypsin NB Premium Grade
für MS-Probenvorbereitung
• Trypsin NB jetzt mit internem
TP-Standard
• Liefert m / z 824 und 2211 für
die interne Kalibrierung
Produkt
Kat.-Nr. Menge
Preis
Trypsin NB Premium Grade, MS approved 37284.01 4 x 25 μg + TPS 78,00 a
Trypsin NB Sequencing Grade
37283.01 4 x 25 μg + TPS 59,00 a
16
14
S ingleQuant –
zur Bestimmung der Proteinkonzentration
Die Konzentration von Proteinen in Lösung einzelner Proben
können Sie jetzt mit dem neuen SingleQuant-Kit einfach
und sicher bestimmen.
Die eingesetzte Methode (Popov et al., 1975) beruht
auf der Bildung von Protein-Amidoschwarz-Farbstoffkomplexen, die durch Fällung einfach und
quantitativ isoliert werden können. Nach Waschen
des Pellets wird mittels NaOH der gebundene
Farbstoff wieder in Lösung gebracht und die
SingleQuant Proteinbestimmung: BSA-Eichkurve
bestimmt. Die so ermittelten Werte können
mittels einer Eichkurve einer definierten
Proteinkonzentration zugeordnet werden.
A624 nm
Konzentration des Farbstoffs bei 624 nm
0,8
0,7
0,6
0,5
0,4
0,3
0,2
0,1
0
0
1
2
3
4
5
6
7
8
9
BSA Standard µg
Das System wird nicht durch die Anwesenheit von Detergenzien (z. B. SDS, Nonident
P40, CHAPS) oder reduzierenden Reagen-
Die einzelnen Punkte stellen den Mittelwert aus drei
Einzelbestimmungen inklusive Standardabweichung dar. Die
Standardgerade wurde mittels linearer Regressionsanalyse
mit der Gleichung y = 0,094 x -0,055 berechnet.
Der Regressionskoeffizient R 2 = 0,994.
zien (z. B. DTT, ß-ME) gestört. Die Methode
liefert genaue und reproduzierbare Messergebnisse und kann innerhalb von 45 Minuten
durchgeführt werden.
Während SingleQuant optimal abgestimmt
ist auf die Bestimmung einzelner Proben
erlaubt der auf gleicher Methode basierende
ProtaQuant-Kit die Bestimmung von Proteinkonzentrationen im 96-Well-Verfahren. Mit diesem
System, das bereits erfolgreich in vielen Labors
eingesetzt wird, können Sie in einem Ansatz die
Proteinkonzentration von 23 Proben in DreifachBestimmung inkl. Eichkurve eines mitgelieferten
Proteinstandards ermitteln.
Produkt
SingleQuant
SingleQuant
ProtaQuant
Kat.-Nr.
39226.01
39226.02
39225.01
Menge
200 Assays
600 Assays
1 Kit
Preis
145,00 a
285,00 a
185,00 a
• Bestimmung der Proteinkonzentration von Einzelproben
• Einfache, genaue und reproduzierbare Methode
• Störungsunanfällig (Detergenzien, reduzierende Reagenzien)
• Als ProtaQuant auch für den Hochdurchsatz (96-Well)
www.serva.de
17
15
SERVALYT
PRECOTES /PreNets
und Blank PRECOTES /PreNets –
™
™
™
™
™
Fertiggele für die horizontale Isoelektrische Fokussierung
Fertiggele von SERVA für die horizontale Isoelektrische Fokussierung
von Proteinen sind verfügbar in
unterschiedlichen pH-Bereichen, in
Sollten Sie Fertiggele mit davon abweichenden
pH-Bereichen benötigen, können wir Ihnen zwei
Alternativen anbieten:
verschiedenen Formaten und in unterschiedlichen Gelstärken, stabilisiert
durch eine Trägerfolie (GEL-FIX™) oder
mittels eines Trägernetzes (NetFix™):
SERVALYT™ PRECOTES™ und
1. Sie setzen Blank PRECOTES™ bzw. Blank
PreNets™ ein, die Sie zuvor mit einem
SERVALYT™ Ihrer Wahl oder einer Mischung
verschiedener SERVALYT™ äquilibriert haben.
SERVALYT™ PreNets™, die gebrauchsfertigen Gele für die horizontale Isoelektrische Fokussierung. Neben den
durch SERVALYT PRECOTES /
™
™
PreNets™ verfügbaren Bereichen gibt
2. Bei einem größeren Bedarf stellen wir für Sie
Gele mit dem gewünschten Gradienten her, wir
unterbreiten Ihnen hierzu gerne und kostenlos
ein unverbindliches Angebot.
es eine hohe Zahl denkbarer pHGradienten für die optimale Trennung
Ihrer Proteine. Hier verleihen Ihnen
Blank PRECOTES / Blank PreNets
Formate
™
Hier können Sie wählen zwischen
größtmögliche Flexibilität, da Sie diese
125 x 125 mm und 125 x 245 mm. Bei
Gele mit einem pH-Gradienten Ihrer
SERVALYT™ PRECOTES™ bildet sich
Wahl, aber auch mit Harnstoff etc.
der pH-Gradient erst mit Anlegen einer
äquilibrieren können.
Spannung aus, eine Vorfokussierung ist
™
nicht notwendig. Dies bedeutet, dass Sie
pH-Bereiche
die Gele entsprechend Ihren Anforde-
Sie haben die Wahl zwischen vier unter-
rungen beliebig zerteilen können, den
schiedlichen pH-Bereichen:
„Rest“ bewahren Sie bis zur
• 3 – 6, 3 – 10, 4 – 6, 6 – 9
Verwendung im Kühlschrank auf.
Diese vier pH-Bereiche decken die
Gelstärken
meisten Anwendungen ab. Die Gele sind
Sie wählen zwischen den Gelstärken
frei von Harnstoff oder Detergenzien. Sie
0,15 mm und 0,3 mm. Die etwas
können bei Bedarf die Gele z. B. mit
dickeren Gele tolerieren mehr Verun-
Harnstoff äquilibrieren, wenn Sie eine
reinigungen (z. B. Salze) in Ihrer Probe,
IEF unter denaturierenden Bedingungen
die mit 0,15 mm deutlich dünneren Gele
durchführen möchten. Details dazu fin-
zeigen je nach Proben ein besseres
den Sie in der Bedienungsanleitung
Trennverhalten.
(siehe www.serva.de).
18
Isoelektrische Fokussierung unter Einsatz
von SERVALYT ™ PRECOTES™
Stabilisierung durch GEL-FIX™
und NetFix™
Alle SERVALYT™ PRECOTES™ sind
kovalent mit der Trägerfolie GEL-FIX™
verbunden. Diese Folie stabilisiert das
Gel bei der Handhabung und während
der Elektrophorese sowie beim Färbeprozess. Beim Trocknen verhindert die
Folie, dass das Gel schrumpft. Falls
IEF von Proteinen isoliert aus
unterschiedlichen Käsesorten
IEF von Proteinen isoliert aus
unterschiedlichen Fleischsorten
IEF von Proteinen isoliert aus
unterschiedlichen Kartoffelsorten
IEF von Proteinen isoliert aus
unterschiedlichen Weizensorten
Sie Ihre getrennten Proteine später
blotten möchten, können Sie GEL-FIX™stabilisierte Gele nicht verwenden, da
die Trägerfolie isolierend für den
Stromfluss wirkt. Für diese Anwendung
wurden die SERVALYT™ PreNets™
entwickelt. SERVALYT™ PreNets™ sind
stabilisiert durch NetFix , ein netzartiges
™
Material, das in die Gele bei der
Herstellung eingegossen wird. Das
Netz sorgt jetzt ähnlich wie GEL-FIX™
für eine Stabilisierung der Gelmatrix,
ist aber durchlässig.
Produkt
SERVALYT™ PRECOTES™ pH 3 – 10
SERVALYT™ PRECOTES™ pH 3 – 6
SERVALYT™ PRECOTES™ pH 4 – 6
SERVALYT™ PRECOTES™ pH 6 – 9
SERVALYT™ PreNets™ pH 3 – 10
SERVALYT™ PreNets™ pH 4 – 6
Blank PRECOTES™
Blank PreNets™
www.serva.de
Grösse (in mm)
125 x 125 x 0,15
125 x 245 x 0,15
125 x 125 x 0,3
125 x 245 x 0,3
125 x 125 x 0,15
125 x 245 x 0,15
125 x 125 x 0,3
125 x 125 x 0,3
125 x 125 x 0,15
125 x 125 x 0,3
125 x 125 x 0,3
125 x 125 x 0,3
125 x 125 x 0,3
245 x 125 x 0,3
125 x 125 x 0,3
Kat.-Nr.
42965.03
42967.02
42866.02
42867.02
42974.02
42919.03
42874.02
42875.02
42978.02
42878.02
42738.02
42748.02
42759.01
42710.01
42758.01
Menge
5 Gele
5 Gele
5 Gele
5 Gele
5 Gele
5 Gele
5 Gele
5 Gele
5 Gele
5 Gele
5 Gele
5 Gele
5 Gele
5 Gele
5 Gele
Preis
166,00 a
229,00 a
166,00 a
229,00 a
166,00 a
229,00 a
166,00 a
166,00 a
166,00 a
166,00 a
208,00 a
208,00 a
97,00 a
139,00 a
107,00 a
19
News
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