Total β-hCG

da
Total β-hCG
system
7K78
B7K786
G4-3636/R13
Læs markerede ændringer
Revideret i marts 2014
Total β-hCG
Kundeservice: Kontakt den lokale Abbott-repræsentant, eller find landespecifikke kontakt­
oplysninger på www.abbottdiagnostics.com.
Anvisningerne i denne brugsanvisning skal følges nøje. Hvis anvisningerne ikke følges, kan testresultaternes pålidelighed
ikke garanteres.
Symbolforklaring
Bestillingsnummer
RV-celler
Medicinsk udstyr til in vitrodiagnostik
Prøvekopper
Lotnummer
Gummimembran
Serienummer
Ekstra skruelåg
Udløbsdato
Reagenslot
Opbevares ved 2-8 °C
Globalt varenummer
Se brugsanvisningen
Produceret i Irland
Fabrikant
Oplysningerne gælder
kun for USA
Se afsnittet REAGENSER for nærmere oplysninger om de enkelte
reagenssymboler.
1
BETEGNELSE
Analysefortyndingsopløsning
ARCHITECT i Multi-Assay Manual Diluent (7D82-50)
1 flaske (100 ml) ARCHITECT
•
i Multi-Assay Manual Diluent indeholdende saltvandsopløsning i
fosfatbuffer. Konserveringsmiddel: antimikrobielt middel.
ARCHITECT Total β‑hCG
ANVENDELSE
ARCHITECT Total β-hCG er en kemiluminescensmikropartikelimmunanalyse
(CMIA) til kvantitativ og kvalitativ bestemmelse af humant betachoriongonadotropin (β-hCG) i humant serum og plasma og anvendes til
tidlig påvisning af graviditet.
Andre reagenser
ARCHITECT i Pre-Trigger Solution
Prætriggeropløsning indeholdende 1,32%
•
(w/v) hydrogenperoxid.
ARCHITECT i Trigger Solution
•
Triggeropløsning
indeholdende
0,35N
natriumhydroxid.
ARCHITECT i Wash Buffer
BEMÆRK: Flaskens størrelse afhænger af reagenssættets størrelse.
•
Vaskebuffer indeholdende fosfatbuffer. Konser­
verings­midler: antimikrobielle midler.
RESUME OG ANALYSEFORKLARING
Humant choriongonadotropin (hCG) er et sialoglykoprotein med en
molekylvægt på ca. 46.000 dalton.1 hCG secerneres af trofoblastcellerne i
placenta kort efter implantation af det befrugtede æg i livmodervæggen.2,3
hCG er en udmærket markør til tidlig påvisning og overvågning af graviditet,
fordi hCG-niveauet stiger hurtigt i serum efter befrugtningen.
hCG’s funktion er tilsyneladende at vedligeholde corpus luteum, hvorved
progesteron- og østrogensyntese muliggøres til modning af endometriet.
Hvis graviditeten er ukompliceret, overtager placenta gradvist produktionen
af disse hormoner. Koncentrationen af hCG i serum stiger hurtigt og
falder derefter for at finde et fast niveau. Hos kvinder, hvis graviditet er
ukompliceret, cirkulerer hCG som et intakt molekyle i serum. Kæderne
spaltes hurtigt fra og udskilles af nyrerne.4
Placentahormonet hCG minder om det luteiniserende hormon (LH), det
follikelstimulerende hormon (FSH) og det tyreoideastimulerende hormon
(TSH). De er alle glykoproteiner, der består af to ikke-kovalent forbundne
forskellige kæder, kaldet alfa og beta, hvortil der er bundet sidekæder
bestående af kulhydrater. Glykoproteinernes alfakæder ligner hinanden
meget, mens beta-kæderne er bestemmende for den biologiske og
immunologiske specificitet.5,6 Betakæderne i hCG og LH er ret ensartede
med hensyn til indhold af aminosyrer. Aminosyreresterne i betakæden i
hCG er bestemmende for den immunologiske specificitet.7
Ved hjælp af sensitive analyser til kvantitativ måling af β-hCG i serum er det
blevet muligt at bestemme hCG-niveauet og dermed forudsige spontane
aborter,8,9 påvise ekstrauterin graviditet8,10,11 og multipel graviditet.8
VIGTIGE FORHOLDSREGLER
•
• Til in vitro-diagnostisk brug
• Anvisningerne i denne brugsanvisning skal følges nøje. Hvis
anvisningerne ikke følges, kan testresultaternes pålidelighed ikke
garanteres.
Sikkerhedsforanstaltninger
• VIGTIGT: Brug af dette produkt kræver håndtering af humane
prøver. Det anbefales, at alle prøver af human oprindelse betragtes
som potentielt smittefarlige og håndteres i overensstemmelse med
det amerikanske arbejdsmiljøinstitut OSHA’s standard Bloodborne
Pathogens.12 Biosafety Level 2 13 eller andre gældende sikkerheds­
14,15 bør anvendes ved
foranstaltninger for biologisk materiale håndtering af materiale, der indeholder eller mistænkes for at
indeholde smittefarlige stoffer.
• Sikkerhedsdatablade er til rådighed på www.abbottdiagnostics.com
eller kan fås ved henvendelse til kundeservice.
• Se kapitel 8 i ARCHITECT-brugermanualen for en nærmere beskrivelse
af sikkerhedsforanstaltningerne ved betjening af systemet.
ANALYSEPRINCIPPER
ARCHITECT Total β-hCG analysen er en totrinsimmunanalyse til
bestemmelse af forekomsten af β-hCG i humant serum og plasma og er
baseret på kemiluminescensmikropartikelimmunanalyseteknologi (CMIA)
med fleksible analyseprotokoller, kaldet Chemiflex.
I første trin blandes prøvemateriale og paramagnetiske mikropartikler,
der er coatet med anti-β-hCG. Prøvens indhold af β-hCG bindes til
mikropartiklerne, der er coatet med anti-β-hCG. I andet trin, efter udført
vask, tilsættes acridinmærket anti-β-hCG-konjugat. Derefter tilsættes
prætrigger- og triggeropløsning i reaktionsblandingen. Den efterfølgende
kemiluminescerende reaktion måles i form af relative lysenheder (RLU).
Mængden af β-hCG i prøven og mængden af RLU, som ARCHITECT
i Systems optik påviser, er direkte proportional.
For yderligere oplysninger om systemet og analyseteknologien henvises til
kapitel 3 i ARCHITECT-brugermanualen.
Forholdsregler ved anvendelse
• Anvend ikke reagenssæt, hvor udløbsdatoen er overskredet.
• Bland ikke reagenser fra forskellige reagenssæt.
• Før ARCHITECT Total β‑hCG Reagent Kit placeres i systemet
første gang, skal flasken med mikropartikler blandes grundigt,
så mikropartikler, som har bundfældet sig under transporten,
resuspenderes. For anvisninger om blanding af mikropartikler
henvises til afsnittet PROCEDURE, Analyseprocedure i denne
brugsanvisning.
• Gummimembraner SKAL anvendes for at undgå fordampning og
kontaminering og for at sikre reagensernes holdbarhed. Hvis ikke
gummimembraner anvendes som anført i denne brugsanvisning,
kan testresultaternes pålidelighed ikke garanteres.
• Brug rene handsker for at undgå kontaminering, når gummimembran
sættes på en åben reagensflaske.
• Når den åbne reagensflaske er forsynet med en gummimembran,
må flasken ikke vendes, da dette vil medføre udsivning af reagens,
hvilket vil kunne påvirke testresultaterne.
• Med tiden vil tilbagebleven væske kunne tørre fast på gummimembranen. Der vil typisk være tale om indtørrede salte, der ikke har
nogen betydning for testningen.
• Se kapitel 7 i ARCHITECT-brugermanualen for en nærmere beskrivelse
af forholdsreglerne ved betjening af systemet.
REAGENSER
Reagenssæt, 100 tests/500 test
BEMÆRK: Reagenssættenes konfiguration varierer afhængigt af
bestillingen.
BEMÆRK: Nogle reagenssæt kan ikke fås i alle lande eller til anvendelse
på alle ARCHITECT i Systems. Kontakt den lokale forhandler.
ARCHITECT Total β‑hCG Reagent Kit (7K78)
•
1 eller 4 flasker (6,6 ml/27,0 ml) mikropartikler,
der er coatet med anti-β‑hCG (mus, monoklonalt), i TRIS-buffer med
okseprotein­stabilisatorer. Minimumskoncentration: 0,06% tørstof.
Konser­verings­midler: antimikrobielle midler.
•
1 eller 4 flasker (2,1 ml/7,4 ml) acridinmærket
anti-β‑hCG-konjugat (mus, monoklonalt) i MES-buffer med
okseproteinstabilisatorer. Minimumskoncentration: 2,9 µg/ml.
Konserveringsmiddel: antimikrobielt middel.
Opbevaring
•
ARCHITECT Total β‑hCG Reagent Kit skal opbevares ved
2-8 °C og kan anvendes, straks efter at det er fjernet fra køl
(2-8 °C).
• Reagenserne er holdbare indtil udløbsdatoen ved opbevaring og
håndtering efter forskrifterne.
2
• Hvis testningen udsættes mere end 24 timer, bør serum eller plasma
fjernes fra koaglet, gelen eller de røde blodlegemer. Prøver kan
opbevares i op til 7 dage ved 2-8 °C inden testning. Hvis testningen
udsættes mere end 7 dage, bør prøverne opbevares i frossen tilstand
ved -10 °C eller koldere. Prøver, der har været nedfrosset ved -10 °C
eller koldere i 12 måneder, har ikke vist nogen forskel i ydeevne.
• Gentagne nedfrysninger og optøninger bør undgås. For at sikre
ensartede resultater skal prøver blandes GRUNDIGT efter optøning,
enten ved at vortexe dem ved LAV hastighed eller ved forsigtigt at
vende dem, samt centrifugeres før brug for at fjerne røde blodlegemer
eller udfældninger.
• Ved forsendelse skal prøverne pakkes og mærkes i overensstemmelse
med gældende nationale og internationale regler for transport af
kliniske prøver og smittefarlige stoffer. Prøverne skal forsendes
på køl eller nedfrosne (tøris). Det anbefales at fjerne prøverne fra
koaglet, gelen eller de røde blodlegemer inden forsendelse.
• ARCHITECT Total β‑hCG Reagent Kit kan opbevares i ARCHITECT
i System i maks. 30 dage, hvorefter det skal kasseres. For oplysninger
om styring af reagensholdbarhed i systemet henvises til kapitel 5 i
ARCHITECT-brugermanualen.
• Reagenserne kan opbevares i eller uden for ARCHITECT i System.
Hvis reagenserne fjernes fra systemet, skal de opbevares ved
2-8 °C (med gummimembraner og nye skruelåg) i oprejst stilling. Det
anbefales i så fald at placere dem i de originale bakker og æsker, hvori
de står korrekt. Hvis flasken med mikropartikler ikke står oprejst
(forsynet med gummimembran) på køl uden for systemet, skal
reagenssættet kasseres. Når reagenserne fjernes fra systemet, skal
en scanning bestilles for at opdatere systemets holdbarhedstimer.
Indikation af reagenshenfald
Hvis en kontrolværdi ligger uden for det specificerede område, kan dette
være et tegn på reagenshenfald eller procedurefejl. Testresultaterne kan
være ugyldige, og retestning kan være påkrævet. Rekalibrering kan være
påkrævet. Se kapitel 10 i ARCHITECT-brugermanualen for oplysninger om
fejlfinding.
PROCEDURE
Medfølgende produkter
• 7K78 ARCHITECT Total β‑hCG Reagent Kit
INSTRUMENTPROCEDURE
• ARCHITECT Total β‑hCG-rutineprotokollen (analysenummer 651)
skal installeres på ARCHITECT i2000 fra ARCHITECT i System Assay
CD-ROM, inden analysen køres. Analysefilen med ARCHITECT
Total β‑hCG-rutineprotokollen (analysenummer 651) og/eller STATprotokollen (analysenummer 030) skal installeres på ARCHITECT
i System med STAT-protokol fra ARCHITECT i System Assay CD-ROM,
inden analysen køres. Se kapitel 2 i ARCHITECT-brugermanualen for
nærmere oplysninger om installation af analysefiler.
• ARCHITECT Total β‑hCG-rutineprotokollen (totrins 18-4) er tilgængelig
til brug på ARCHITECT i Systems. ARCHITECT Total β‑hCG STATprotokollen (totrins 4-4) er tilgængelig til brug på ARCHITECT
i System med STAT-protokol.
• Se kapitel 5 i ARCHITECT-brugermanualen for oplysninger om
udskrivning af analyseparametre.
• Se ARCHITECT-brugermanualen for nærmere oplysninger om
systemprocedurer.
• Standardresultatenheden for ARCHITECT Total β‑hCG-analysen er
mIU/ml. Det er muligt at anvende resultatenheden IU/l. Dette gøres
ved at ændre analyseparameteret “Result concentration units” til IU/L.
Systemet anvender omregningsfaktor 1.
Nødvendigt tilbehør og udstyr
• ARCHITECT i System
• ARCHITECT Total β-hCG-analysefilen fra:
• ARCHITECT i System e-Assay CD-ROM, som findes på
www.abbottdiagnostics.com
• ARCHITECT i Assay CD-ROM
• 7K78-01 ARCHITECT Total β‑hCG Calibrators
• 7K78-10 ARCHITECT Total β‑hCG Controls
• 7D82-50 ARCHITECT i Multi-Assay Manual Diluent
• ARCHITECT i
• ARCHITECT i
• ARCHITECT i
• ARCHITECT i
• ARCHITECT i
• ARCHITECT i
• ARCHITECT i
• Se kapitel 9 i ARCHITECT-brugermanualen for oplysninger om
nødvendigt udstyr til brug ved vedligeholdelsesprocedurer.
• Pipetter eller pipettespidser (valgfrit) til at dispensere de mængder, der
er specificeret på patientprøve- og kontrolbestillingsskærmbilledet.
PRØVETAGNING OG KLARGØRING
• Både humant serum (herunder serum udtaget i gelglas) og
plasma udtaget i litiumheparin, natriumheparin eller kalium-EDTA
kan anvendes til ARCHITECT Total β-hCG-analysen. Ingen andre
antikoagulanser er valideret til anvendelse med ARCHITECT Total
β-hCG-analysen. Følg rørfabrikantens brugervejledning for serum- og
plasmaprøvetagningsglas.
• ARCHITECT i System kontrollerer ikke prøvetypen. Det er brugerens
opgave at kontrollere, at de korrekte prøvetyper anvendes til
ARCHITECT Total β‑hCG-analysen.
• Utilstrækkelig centrifugering eller forekomst af fibrin eller udfældninger
kan forårsage fejlagtige resultater.
• Abbott Laboratories anbefaler anvendelse af plasma til STAT-testning.
Da plasma ikke som serum skal koagulere før anvendelse, er der
mindre sandsynlighed for, at prøven indeholder fibrin og andre
udfældninger.
• Vær forsigtig ved håndtering af patientprøver for at undgå krydskontaminering. Det anbefales at bruge engangspipetter eller
-pipettespidser.
• Undersøg alle prøver for bobler for at opnå optimale resultater. Fjern
alle bobler med en rørepind, inden analysen påbegyndes. Anvend en
ny rørepind til hver prøve for at undgå krydskontaminering.
• For at opnå optimale resultater bør serum- og plasmaprøver være fri
for fibrin, røde blodlegemer og udfældninger.
• Kontrollér, at prøven er fuldstændig koaguleret inden centrifugering.
Nogle prøvers koagulationstid er forlænget, især hvis de er udtaget
fra patienter, der er i antikoagulant eller trombolytisk behandling. Hvis
prøven centrifugeres før den er fuldstændig koaguleret, kan fibrin
medføre fejlagtige resultater.
Analyseprocedure
• Før ARCHITECT Total β‑hCG Reagent Kit anbringes i systemet første
gang, skal flasken med mikropartikler vendes for at få mikropartikler,
som har bundfældet sig under transporten, til at resuspendere:
• Vend flasken med mikropartikler 30 gange.
• Kontrollér, at mikropartiklerne er resuspenderet i flasken. Hvis der
stadig sidder mikropartikler fast i flasken, skal den vendes, indtil
mikropartiklerne er resuspenderet i flasken.
• Skru låget af, når mikropartiklerne er resuspenderet, og kassér det.
Tag en gummimembran ud af indpakningsposen. Brug handsker.
Sæt forsigtigt gummimembranen fast på flaskeåbningen.
• ANVEND IKKE mikropartiklerne, hvis de ikke kan resuspenderes i opløsningen. Kontakt Abbotts kundeservice.
• Bestil testene.
• Anbring ARCHITECT Total β‑hCG Reagent Kit i ARCHITECT i System.
Kontrollér, at alle nødvendige reagenser forefindes. Kontrollér, at alle
reagensflasker er forsynet med en gummimembran.
• Prøvekoppens minimumsvolumen udregnes af systemet og fremgår
af bestillingsudskriften (Orderlist report). Der må maks. udføres
10 gentagelser fra samme prøvekop. For at reducere følgen af
fordampning kontrolleres, at der er nok prøvemateriale i prøvekoppen,
inden testen køres.
• Hasteprøver: 75 µl til den første Total β‑hCG-test plus 25 µl til
hver yderligere Total β‑hCG-test fra samme prøvekop.
• ≤ 3 timer i systemet: 150 µl til den første Total β‑hCG-test plus
25 µl til hver yderligere Total β‑hCG-test fra samme prøvekop.
• > 3 i systemet: Yderligere prøvevolumen er nødvendig. Se kapitel
5 i ARCHITECT-brugermanualen for yderligere oplysninger om
fordampning af prøvemateriale og prøvevolumen.
3
• Når en ARCHITECT Total β‑hCG-kalibrering er godkendt og lagret,
kan alle efterfølgende prøver testes uden yderligere kalibrering,
medmindre:
• Et reagenssæt med et nyt lotnummer tages i brug
• Kontrollerne ligger uden for området
• Se kapitel 6 i ARCHITECT-brugermanualen for yderligere oplysninger
om analysekalibrering.
• Ved brug af primære og sekundære rør bør der anvendes prøvemåler
for at sikre, at der er nok prøvemateriale.
• For at opnå de nødvendige mængder af ARCHITECT Total β‑hCGkalibratorer og -kontroller holdes flaskerne lodret, og 4 dråber af
hver kalibrator eller 3 dråber af hver kontrol dispenseres ned i de
respektive prøvekopper.
• Isæt prøverne.
• Se kapitel 5 i ARCHITECT-brugermanualen for yderligere
oplysninger om isætning af prøver.
• Tryk på RUN. ARCHITECT i System udfører følgende funktioner:
• Flytter prøven hen til aspirationspositionen
• Transporterer en RV-celle ind i det indre analyseringsområde
• Aspirerer og overfører prøvematerialet til RV-cellen
• Rykker RV-cellen én position frem og dispenserer mikro­
partiklerne ned i RV-cellen
• Blander, inkuberer og vasker reaktionsblandingen
• Tilsætter konjugat i RV-cellen
• Blander, inkuberer og vasker reaktionsblandingen
• Tilsætter prætrigger- og triggeropløsning
• Måler emissionen af kemiluminescens for at bestemme mængden
af β‑hCG i prøven
• Aspirerer indholdet i RV-cellen og overfører det til beholderen
til flydende affald, mens RV-cellen overføres til beholderen med
fast affald
• Udregner resultatet
• Se kapitel 5 i ARCHITECT-brugermanualen for yderligere oplysninger
om bestilling af patientprøver, kalibratorer og kontroller samt generelle
betjeningsprocedurer.
• For at opnå optimal ydeevne er det vigtigt at følge procedurerne
for rutinevedligeholdelse som beskrevet i kapitel 9 i ARCHITECTbrugermanualen. Hvis hyppigere vedligeholdelse kræves ifølge
laboratoriets procedurer, bør disse følges.
PROCEDURER FOR KVALITETSKONTROL
For at overholde kontrolkravene til ARCHITECT Total β-hCG-analysen
bør alle kontrolniveauerne testes i enkeltbestemmelse én gang i døgnet
på kørselsdage. Hvis laboratoriets procedurer for kvalitetskontrol kræver
hyppigere brug af kontroller til verifikation af testresultater, bør disse
procedurer følges. Kontrollér, at kontrolværdierne ligger inden for de
koncentrationsområder, der er angivet i brugsanvisningen.
På grund af analysekomponenternes og/eller matricernes forskellige
sammensætning vil eksterne kvalitetskontroller og referenceprøver
muligvis ikke udvise identiske resultater for alle hCG-analysemetoder.
Kvalitetskontroller og referenceprøver fra andre producenter end
Abbott kan indeholde høje niveauer af frie beta-kæde-hCG-molekyler.
Kvalitetskontroller og referenceprøver fra andre producenter end Abbott
kan give forskellige resultater, når hCG-analyser med intakte molekyler
sammenlignes med Total β-hCG-analyser. Det enkelte laboratorium
bør afgøre, hvorvidt kontrolmaterialet er egnet til den pågældende
immunanalyse og validere materialet, før det tages i brug.
Verifikation af analysens dokumenterede egenskaber
Se appendiks B i ARCHITECT-brugermanualen for yderligere oplysninger
om procedurer til verifikation af analysens dokumenterede egenskaber.
ARCHITECT Total β‑hCG-analysen hører til metodegruppe 1.
RESULTATER
Til udregning af kalibreringskurven anvender ARCHITECT Total β‑hCGanalysen en 4-parameterdatareduktionsmetode til kurvetilpasning (4PLC,
Y-vægtet).
Andre resultatenheder
Prøvefortyndingsprocedurer
• Standardresultatenheden for ARCHITECT Total β-hCG-analysen
er mIU/ml. Hvis resultatenheden IU/l vælges, benytter systemet
omregningsfaktor 1.
• Omregningsformel: (koncentration i mIU/ml) x (1) = IU/l
Prøver med en Total β-hCG-værdi, der er større end 15.000,00 mIU/ml,
markeres med koden “>15,000.00” og kan fortyndes automatisk eller
manuelt.
• Hvis den automatiserede fortyndingsprocedure anvendes, udfører
systemet en 1:15-fortynding af prøven og udregner automatisk
koncentrationen af den fortyndede prøve og afgiver resultater.
• Manuel fortynding skal udføres, som beskrevet nedenfor:
• Den anbefalede fortynding til Total β‑hCG er 1:15.
Fortyndingsforholdet bør ikke overstige 1:75.
• Til en 1:15-fortynding tilsættes 20 µl patientprøve i 280 µl
ARCHITECT i Multi-Assay Manual Diluent (7D82-50).
• Det er brugerens opgave at indtaste fortyndingsfaktoren på
patientprøve- og kontrolbestillingsskærmbilledet. Systemet
anvender denne fortyndingsfaktor til automatisk at beregne
prøvens koncentration før fortynding. Dette resultat vil blive
afgivet. Resultatet (dvs. før anvendelse af fortyndingsfaktoren)
bør være større end 467,00 mIU/ml.
• Hvis brugeren ikke indtaster fortyndingsfaktoren, vil det afgivne
resultat referere til den fortyndede prøve. Resultatet (dvs. før
anvendelse af fortyndingsfaktoren) bør være større end 467,00
mIU/ml.
• BEMÆRK: Hvis resultatet “< 7000.00 mIU/mL” (1:15 automatiseret
fortyndingsprocedure) vises på enten skærm eller udskrift, betyder
dette, at prøven bør retestes enten i en lavere fortynding eller
ufortyndet. Resultatet skal hverken fortolkes eller frigives.
• Se kapitel 5 i ARCHITECT-brugermanualen for yderligere oplysning
om bestilling af fortyndinger.
Flag
• Nogle resultater kan indeholde oplysninger i flagfeltet. For en
beskrivelse af de flag, der kan forekomme i dette felt, henvises til
kapitel 5 i ARCHITECT-brugermanualen.
Fortolkning af resultater
Til kvalitativ fortolkning af ARCHITECT Total β-hCG-resultater vil prøver
med et β-hCG-niveau, der er mindre end eller lig med 5,00 mIU/ml, blive
vist i fortolkningsfeltet INTERPRETATION på resultatskærmbilledet (Test
Results) eller udskriften som “NEGATIVE”. Prøver med et β-hCG-niveau,
der er større end eller lig med 25,00 mIU/ml, vil blive vist som “POSITIVE”.
Prøver med et β-hCG-niveau, der er større end 5,00 mIU/ml og mindre
end 25,00 mIU/ml, vil kun blive vist med koncentrationen. Der vil ikke blive
foretaget nogen fortolkning af sådanne resultater.
PROCEDUREBEGRÆNSNINGER
• Denne analyse kan påvise både intakte hCG-molekyler og frie β-hCGkæder.
• Til diagnostisk brug bør hCG-resultaterne altid anvendes sammen
med andre data, f.eks. anamnesen, symptomer, resultater fra andre
analyser, kliniske indtryk osv. Ekstrauterin graviditet kan ikke skelnes
fra normal graviditet alene ved måling af hCG.10,11 Resultater fra
denne eller andre analyser bør kun anvendes og fortolkes som en del
af det samlede kliniske billede.
• Hvis hCG-niveauet ikke stemmer overens med eller ikke understøttes
af det kliniske indtryk, bør resultatet søges konfirmeret med en anden
hCG-analysemetode, som f.eks. en kvalitativ urinanalyse.16 Hvis der
ikke kan påvises hCG i urinen, kan det betyde, at hCG-resultatet i
serumprøven er falsk forhøjet. Resultatet kan også søges konfirmeret
ved seriel prøvefortynding. Prøver indeholdende interfererende stoffer
vil som regel – men ikke altid – udvise non-lineære resultater, når
de fortyndes.
Kalibrering
• Kalibrator A, B, C, D, E og F skal testes i dobbeltbestemmelse, når
der udføres en ARCHITECT Total β-hCG-kalibrering. Alle Total β-hCGkontrolniveauerne skal testes i enkeltbestemmelse for at evaluere
kalibreringen. Kontrollér, at kontrolværdierne ligger inden for de
koncentrationsområder, der er anført i brugsanvisningen. Kalibratorer
bør håndteres som hasteprøver.
• Kalibreringsområde: 0,00 - 15.000,00 mIU/ml.
• Rutine- og STAT-protokollerne skal kalibreres separat, men kun ét
reagenssæt er påkrævet.
4
• ARCHITECT Total β‑hCG er kun valideret til tidlig påvisning af
graviditet. Den er ikke godkendt til anden anvendelse, såsom
screening for tumormarkører, monitorering af tumormarkører eller
lignende, og den bør ikke anvendes til andet.
• I sjældne tilfælde kan hCG-niveauerne forekomme forhøjede, hvilket
bl.a. kan skyldes forekomst af:16,17,18,19,20,21
- heterofile antistoffer
- uspecifik proteinbinding
- hCG-lignende stoffer
- trofoblastiske eller non-trofoblastiske neoplasmer
• Som i enhver immunkemisk reaktion kan ukendte interferenser fra
medikamenter eller endogene stoffer påvirke resultatet.
• Forhøjet hCG-niveau har været forbundet med visse patologiske
tilstande (f.eks. trofoblastiske og non-trofoblastiske neoplasmer),22,23
og resultatet fra denne analyse bør ikke anvendes til diagnose af
disse tilstande. Ifølge litteraturen har der været tilfælde, hvor personer
har modtaget unødvendig medicinsk behandling (bl.a. kemoterapi)
og er blevet opereret unødigt (hysterektomi), fordi hCG-resultatet er
blevet brugt til diagnosticering af abnorme tilstande.
• Interfererende stoffer (såsom heterofile antistoffer, uspecifikke
proteiner eller hCG-lignende stoffer) kan give enten falsk nedsatte
eller forhøjede resultater. Sådanne interfererende stoffer kan
forårsage falske resultater over hele analysens måleområde, og altså
ikke bare i den lave ende, og angive forekomst af hCG, selv når der
ingen forekomst er.
• Påvisning af et meget lavt hCG-niveau udelukker ikke graviditet.18 Lavt
hCG-niveau kan ses hos tilsyneladende raske kvinder, som ikke er
gravide.24,25 Eftersom hCG-værdien fordobles ca. hver 48. time ved
normal graviditet,18 vil det være nødvendigt at reteste kvinder med et
meget lavt hCG-niveau efter 48 timer på nye blodprøver.
• Prøver fra postmenopausale kvinder kan udvise et svagt positivt
resultat på grund af et lavt hCG-niveau, som ikke skyldes graviditet.
For svagt positive resultater er det god laboratoriepraksis (GLP) at
udtage nye prøver 48 timer senere og teste dem eller at udføre en
testning med en anden hCG-analysemetode.
• På grund af analysens høje sensitivitet kan prøver, der var positive i
de første dage efter befrugtningen, senere vise sig at være negative
på grund af spontan abort. Spontan abort forekommer i 22% af alle
klinisk upåviste graviditeter og i 31% af alle graviditeter.26 Det er god
laboratoriepraksis at udtage nye prøver efter yderligere 48 timer og
teste disse, hvis resultatet har været svagt positivt.
• Prøver fra patienter, der i forbindelse med diagnosticering eller
behandling har modtaget præparater indeholdende musemonoklonale
antistoffer, kan indeholde humane anti-mus antistoffer (HAMA-effekt).
Sådanne prøver kan udvise enten et falsk forhøjet eller falsk nedsat
resultat, hvis de testes med analyser, hvori musemonoklonale
antistoffer indgår.27,28 Sådanne prøver bør ikke testes med Abbott
ARCHITECT Total β-hCG-analysen.
• Heterofile antistoffer i humant serum kan reagere med immunglobulin
i reagenset og dermed interferere med in vitro-immunanalyser.17,18,21
Denne interferens ses undertiden i prøver fra patienter, som ofte
er i kontakt med dyr eller serumprodukter fra dyr, og afvigende
resultater kan ses. Yderligere oplysninger kan være nødvendige til
diagnosticering.
Uger siden
sidste menstruation
1 - 10
11 - 15
16 - 22
23 - 40
n
50
50
49
50
Min.
<1,20
16.996
6.860
1.583
Maks.
417.430
247.465
50.239
65.911
Områder
(mIU/ml)
2,5.
percentil
202
22.536
8.007
1.600
97,5.
percentil
231.000
234.990
50.064
49.413
Disse resultater er repræsentative data fra et studie.
Det anbefales, at hvert laboratorium fastsætter sine egne forventede
værdier.
YDEEVNE
Præcision
ARCHITECT Total β‑hCG-analysen er udviklet til at have en præcision på
< 10% (total CV). Der blev udført et studie af ARCHITECT Total β‑hCGanalysen baseret på CLSI’s (Clinical and Laboratory Standards Institute,
tidligere NCCLS) dokument EP5-T2. 31 Et panel bestående af 3 prøver
i forbehandlet humant serum blev testet i dobbeltbestemmelse med 2
reagenslot 2 gange dagligt i 20 dage. Data fra denne undersøgelse er
opstillet i følgende tabel.*
InPanel- Reagens- strumedlem
lot
ment
1
1
1
1
1
2
1
2
1
1
2
2
2
1
1
2
1
2
2
2
1
2
2
2
3
1
1
3
1
2
3
2
1
3
2
2
n
80
80
80
80
80
80
80
80
80
80
80
80
Middel
konc.værdi
(mIU/ml)
21,07
24,97
25,22
24,75
735,93
772,66
750,99
754,87
5.063,95
5.116,40
4.976,44
5.052,13
Intraseriel
SD
%CV
0,984 4,7
0,880 3,5
1,027 4,1
0,819 3,3
14,917 2,0
12,161 1,6
13,812 1,8
11,762 1,6
84,801 1,7
72,066 1,4
98,439 2,0
59,656 1,2
Total
SD
%CV
1,027 4,9
1,115 4,5
1,134 4,5
1,096 4,4
18,144 2,5
14,671 1,9
16,065 2,1
12,592 1,7
107,073 2,1
86,052 1,7
109,379 2,2
79,602 1,6
* Repræsentative data. Laboratoriets resultater kan afvige fra disse
data.
Genfindelse
ARCHITECT Total β‑hCG-analysen er udviklet til at have en gennemsnitlig
genfindelsesprocent på 100 ± 10% ved testning af prøver, der er
tilsat kendte mængder β-hCG. 8 humane serumprøver blev tilsat en
kendt hCG-koncentration (1.000,45 mIU/ml). β-hCG-koncentrationen
blev bestemt med ARCHITECT Total β-hCG-analysen, og den deraf
resulterende genfindelsesprocent blev udregnet. Genfindelsesprocenten
for ARCHITECT Total β-hCG-analysen lå fra 104,1 til 108,8% med et
gennemsnit på 106,7%. Dette er repræsentative data. Laboratoriets
resultater kan afvige fra disse data.
Fortyndingsverifikation
Nøjagtigheden af ARCHITECT Total β-hCG-analysens automatiserede
fortyndingsprocedure blev evalueret ved brug af humane serumprøver.
Resultaterne af automatisk 1:15-fortyndede prøver, der var blevet testet
i dobbeltbestemmelse, blev sammenlignet med resultater fra de samme
prøver, der var fortyndet i forholdet 1:15 med ARCHITECT i Multi-Assay
Manual Diluent. Ydeevnen blev evalueret i form af genfindelsesprocent og
blev beregnet ved hjælp af følgende ligning:*
FORVENTEDE VÆRDIER
Eftersom hCG normalt syntetiseres og secerneres fra placentaceller
eller et forstadium deraf, er hormonniveauet hos raske og ikke-gravide
kvinder enten meget lavt eller slet ikke målbart.22 β-hCG-koncentrationen
i serum hos ikke-gravide kvinder er i henhold til litteraturen < 5 mIU/ml.29
β-hCG-koncentrationen i serum hos gravide kvinder stiger kraftigt tidligt
i graviditeten. Et β-hCG-niveau på mellem 5 og 25 mIU/ml kan tyde på
tidlig graviditet.2,30 β-hCG-værdien topper normalt i det første trimester og
falder derefter langsomt i den resterende del af graviditeten.
Prøver fra 199 gravide kvinder er blevet delt op i 4 kategorier i forhold til,
hvor mange uger der var gået siden sidste menstruation (1-10, 11-15, 1622, 23-40), og er blevet testet med ARCHITECT Total β-hCG-analysen.
Resultaterne er opstillet i følgende tabel.
Genfindelsesprocent =
5
Automatisk fortyndet β‑hCG-konc. (mIU/ml)
x 100
Manuelt fortyndet β‑hCG-konc. (mIU/ml)
Prøve
A
B
C
D
E
BIBLIOGRAFI
Manuelt fortyndet Automatisk fortyndet
β‑hCG-konc.
β‑hCG-konc.
Genfindelses(mIU/ml)
(mIU/ml)
procent
98.488,05
102.152,34
103,7
27.534,10
27.199,45
98,8
47.730,65
46.994,66
98,5
13.413,25
13.438,39
100,2
10.391,55
9.463,34
91,1
1. Felig P, Baxter JD, Broadus AE, Frohman LA, eds. Endocrinology and
Metabolism (2nd Ed.), New York: McGraw-Hill Book Co. 1987:253.
2. Braunstein GD, Rasor J, Adler D, Danzer H, Wade ME. Serum Human
Chorionic Gonadotropin Levels Throughout Normal Pregnancy. Am J
Obster Gynecol 1976: 126:678-81.
3. Brody S, Carlstrom G. Immunoassay of Human Chorionic
Gonadotropin in Normal and Pathologic Pregnancy. J Clin Endocrinol
Metab 1962;22: 564-74.
4. Lab Report For Physicians. Standardization of Human Chorionic
Gonadotropin. December 1985; 7:92-4.
5. Swaminathan N, Bahl OP. Dissociation and Recombination of the
Subunits of Human Chorionic Gonadotropin. Biochem Biophys Res
Commun 1970; 40:422-7.
6. Human Reproduction Unit, World Health Organization, Geneva,
Switzerland. Assay of Protein Hormones Related to Human
Reproduction: Problems of Specificity of Assay Methods and
Reference Standards. Acta Endocrinol 1972; 71:625-37.
7. Ross GT. Clinical Relevance of Research of the Structure of Human
Chorionic Gonadotropin. Am J Obstet Gynecol 1977; 129:795-805.
8. Saxena BB, Landesman R. Diagnosis and Management of Pregnancy
by the Radioreceptor Assay of Human Chorionic Gonadotropin. Am J
Obstet Gynecol 1978; 131:97-107.
9. Manganiello PD, Nazian SJ, Ellegood JO, McDonough PG, Mahesh
VB. Serum Progesterone, 17 α-Hydroxyprogesterone, Human
Chorionic Gonadotropin, and Prolactin in Early Pregnancy and a Case
of Spontaneous Abortion. Fertil Steril 1981; 36:55-60.
10. Kadar N, DeVore G, Romero R. Discriminatory hCG Zone: Its Use in
the Sonographic Evaluation for Ectopic Pregnancy. Obstet Gynecol
1981; 58:156-61.
11. Kadar N, Caldwell BV, Romero R. A Method of Screening for Ectopic
Pregnancy and Its Indications. Obstet Gynecol 1981; 58:162-6.
12. US Department of Labor, Occupational Safety and Health
Administration, 29 CFR Part 1910.1030, Bloodborne pathogens.
13. US Department of Health and Human Services. Biosafety in
Microbiological and Biomedical Laboratories. 5th ed. Washington, DC:
US Government Printing Office; December 2009.
14. World Health Organization. Laboratory Biosafety Manual. 3rd ed.
Geneva: World Health Organization; 2004.
15. Clinical and Laboratory Standards Institute. Protection of Laboratory
Workers from Occupationally Acquired Infections: Approved
Guideline—Third Edition. CLSI Document M29-A3. Wayne, PA: Clinical
and Laboratory Standards Institute; 2005.
16. Cole L A. Phantom hCG and phantom choriocarcinoma. Gynecol
Oncol, 1998;71:325–9.
17. Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all
immunoassays. Clin Chem 1988;34:27-33.
18. Hussa RO. The Clinical Marker hCG, Westport CT: Praeger Publishers.
1987: 77-95, 137-50.
19. Hussa RO, Rinke ML, Schweitzer PG. Discordant human chorionic
gonadotropin results: causes and solutions. Obstet Gynecol,
1985;65:211–9.
20. Mishalani SH, Seliktar J, Braunstein GD. Four Rapid Serum-Urine
Combination Assays of Choriogonadotropin (hCG) Compared and
Assessed for Their Utility in Quantitative Determinations of hCG. Clin
Chem. 40/10, 1944-1949 (1994).
21. National Committee for Clinical Laboratory Standards, Chorionic
gonadotropin Testing: Nomenclature, Reference Preparations, Assay
Performance, and Clinical Application; Approved Guideline NCCLS
Document 1/LA10-A, December 1996.
22. Braunstein GD, Vaitukaitis JL, Carbone PP, Ross GT. Ectopic
Production of Human Chorionic Gonadotropin by Neoplasms. Ann
Intern Med 1973; 78:39-45.
23. Hussa RO. Clinical Utility of Human Chorionic Gonadotropin and
α-Subunit Measurements. Obstet Gynecol 1982; 60:1-12.
24. Alfthan H, Haglund C, Dabek J, Stenman U-H. Concentrations of
human choriogonadotropin, its β-subunit, and the core fragment of
the β-subunit in serum and urine of men and nonpregnant women.
Clin Chem, 1992; 38:1981-7.
25. Borkowski A, Muquardt C. Human chorionic gonadotropin in the plasma
of normal, nonpregnant subjects. N Engl J Med, 1979;301:298–302.
* Repræsentative data. Laboratoriets resultater kan afvige fra disse
data.
Analytisk sensitivitet
ARCHITECT Total β-hCG-analysen er udviklet til at have en analytisk
sensitivitet på ≤ 1,2 mIU/ml. Analytisk sensitivitet defineres som
koncentrationen ved 2 standardafvigelser fra den gennemsnitlige relative
lysemission (RLU) fra ARCHITECT Total β-hCG Calibrator A (0,00
mIU/ml) og repræsenterer den lavest målbare koncentration af β-hCG,
som er forskellig fra 0.
Specificitet
ARCHITECT Total β-hCG-analysen er udviklet til at have en gennemsnitlig
analytisk specificitet på < 10% krydsreaktivitet med FSH, LH og TSH.
Humane serumprøver indeholdende β-hCG blev tilsat 150 mIU/ml FSH,
250 mIU/ml LH og 100 μIU/ml TSH og testet for β-hCG. Krydsreaktiviteten
blev beregnet som en procentvis interferens og viste sig at være mindre
end 10% for hvert af de krydsreagerende stoffers vedkommende.
Afsmitning
Afsmitning fra en prøve, der indeholdt 1.000.000 mIU/ml β‑hCG, til en
tilstødende prøve, som ikke indeholdt β‑hCG (0 mIU/ml), var mindre end
7,5 mIU/ml β‑hCG.
BEMÆRK: Opmærksomheden henledes på, at individuelt forhøjede
prøveværdier kan skyldes proteinophobning i prøveopsugningsnålen. Se
kapitel 10 i ARCHITECT-brugermanualen for yderligere oplysninger om
fejlfinding.
Interferens
ARCHITECT Total β‑hCG-analysen er udviklet til at have en potentielt
interferens fra hæmoglobin, bilirubin, triglycerider og protein på < 10% ved
de niveauer, der er angivet nedenfor.
•
•
•
•
Hæmoglobin
Bilirubin
Triglycerider
Protein
- < 10% ved 500 mg/dl
- < 10% ved 20 mg/dl
- < 10% ved 3.000 mg/dl
- < 10% ved 2 g/dl og 12 g/dl
Korrelationsdata
ARCHITECT Total β‑hCG-analysen har en hældning på 1,0 ± 0,15 og en
korrelationskoefficient (r) på > 0,95 i området 0 - 15.000 mIU/ml i en
sammenligning med AxSYM Total β‑hCG-analysen.
Der blev foretaget en undersøgelse, hvor prøver blev testet med både
ARCHITECT Total β‑hCG-analysen og AxSYM Total β‑hCG-analysen. Data
fra denne undersøgelse blev analyseret under anvendelse af mindste
kvadraters regressionsmetode og Passing-Bablok-regressionsmetoden.32
Resultaterne er opsummeret i nedenstående tabel.*
Abbott ARCHITECT Total β‑hCG vs. Abbott AxSYM Total β‑hCG
Metode
Lineær
regression
ved mindste
kvadraters
metode
Lineær
regression
ved PassingBablok**
Antal
prøver
93
192
471
AxSYMområde
Hæld- Korrelations(mIU/ml)
Skæring ning koefficient
3,40 1,00
0,945
21.0001
2 - 15.0002
58,34 0,89
0,980
0,986
2 - 200.0003 -672,30 0,82
93
192
471
21.0001
2 - 15.0002
2 - 200.0003
0,48
1,88
19,84
1,08
0,94
0,80
0,945
0,980
0,986
I denne undersøgelse lå serumprøver, som blev testet med ARCHITECT
Total β-hCG-analysen, på: 11,99 til 1.262,17 mIU/ml, 21,99 til 14.934,93
mIU/ml, 31,99 til 180.620,00 mIU/ml.
* Repræsentative data. Variabler, såsom forskelle i prøvemængde og
-population, kan påvirke analysens korrelation. Derfor kan laboratoriets
data afvige fra disse data.
**En lineær regressionsmetode, der ikke forudsætter særlig fordeling af
prøver og målefejl.32
6
26. Wilcox AJ, Weinberg CR, O’Connor JF, Baird DD, Schlatterer JP,
Canfield RE, Armstrong EG, Nisula BC. Incidence of early loss of
pregnancy. N Eng J Med 319:189-194, 1988.
27. Primus FJ, Kelly EA, Hansen HJ, Goldenberg DM. “Sandwich”-Type
Immunoassay of Carcinoembryonic Antigen in Patients Receiving
Murine Monoclonal Antibodies for Diagnosis and Therapy. Clin Chem
1988;34:261-4.
28. Schroff RW, Foon KA, Beatty SM, Oldham RK, Morgan AC Jr.
Human Anti-Murine Immunoglobulin Responses in Patients Receiving
Monoclonal Antibody Therapy. Cancer Res 1985;45:879-85.
29. Tietz NW, Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd Ed. 1995. p. 134‑136.
30. Lenton EA, Neal LM, Sulaiman R. Plasma Concentrations of Human
Chorionic Gonadotropin from the Time of Implantation until the
Second Week of Pregnancy. Fertil Steril 1982; 37:773-8.
31. National Committee for Clinical Laboratory Standards, Evaluation
of Precision Performance of Clinical Chemistry Devices - Second
Edition; Tentative Guidelines. NCCLS Document EP5-T2. Villanova,
PA: NCCLS, March 1992.
32. Passing H, Bablok W. A New Biometrical Procedure for Testing the
Equality of Measurements from Two Different Analytical Methods.
J Clin Chem Clin Biochem. 1983;21:709-20.
ARCHITECT, AxSYM og Chemiflex er varemærker tilhørende Abbott
Laboratories i visse jurisdiktioner.
Abbott Ireland
Diagnostics Division
Lisnamuck, Longford
Co. Longford
Ireland
+353-43-3331000
Distribueret i USA af Abbott Laboratories
Abbott Park, IL 60064, USA
Marts 2014
© 2006, 2014 Abbott Laboratories
7