Manejo reproductivo en ganado ovino
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Manejo reproductivo en ganado ovino
LA EDITORIAL DE LOS VETERINARIOS ANIMALES DE PRODUCCIÓN OVINO Manejo reproductivo en ganado ovino Dirigido a veterinarios, estudiantes, profesores y profesionales del sector. CARACTERÍSTICAS TÉCNICAS Autores: Alfonso Abecia, Fernando Forcada Miranda. Formato: 22 x 28 cm Número de páginas: 216. Número de imágenes: 175. Encuadernación: tapa dura. ISBN: 978-84-92569-42-7. Año: 2010. PVP: 75 €. Manejo reproductivo del ganado ovino es una obra práctica, orientada al técnico especialista de esta especie y al futuro veterinario o ingeniero agrónomo. Lejos de convertirse en un tratado de reproducción ovina, aunque con toda la rigurosidad y seriedad de sus autores, este libro puede convertirse en una obra de consulta rápida sobre todos los aspectos del manejo de la reproducción de ovejas y carneros, desde las técnicas de reproducción asistida, el manejo del macho, el cruzamiento, los calendarios reproductivos hasta el manejo del semen y la inseminación artificial, etc. Más información Andador del Palacio de Larrinaga, 2 - 50013 Zaragoza - España ! Tel.: 976 46 14 80 ! Fax: 976 42 30 00 ! pedidos@grupoasis.com LA EDITORIAL DE LOS VETERINARIOS Manejo reproductivo en ganado ovino ÍNDICE DE CONTENIDO 1. Bases fisiológicas de la reproducción en la oveja Ovejas cíclicas Ovejas anéstricas Introducción El ciclo sexual Curva de partos tras un efecto macho Ovulación y formación del cuerpo lúteo Fase luteal del ciclo sexual Luteolisis Fase folicular 4. La cordera Pubertad en la oveja Foliculogenesis. Modelo funcional de crecimiento folicular Secreción hormonal durante el anestro estacionario Secreción hormonal durante el inicio de la pubertad Bases neuroendocrinas de la pubertad y la estacionalidad reproductiva en la oveja Conclusiones Inicio de la pubertad: ¿cómo se define? Factores que determinan el inicio de la pubertad Raza Nutrición y desarrollo corporal Época del nacimiento Interacciones sociales Endocrinología de la pubertad: características de las primeras ovulaciones Métodos para determinar el inicio de la pubertad Laparoscopia Ecografía Estudio del perfil de secreción de progesterona Detección de celos 2. Definición de los parámetros reproductivos en la especie ovina Pubertad-precocidad sexual Actividad sexual-fertilidad Tasa de ovulación-prolificidad Fecundidad Estrategias reproductivas para adelantar la pubertad Tratamientos con progestágenos Efecto macho Implantes de melatonina 3. El morueco Corderas de reposición Manejo en cubrición Criterios de selección Introducción de las corderas a la reproducción Rutinas de manejo en los machos Evaluación del estado reproductivo de los moruecos La importancia del morueco en los tratamientos de control del ciclo sexual de la oveja ¿Cuántos moruecos necesitamos? Relación moruecos/ovejas Tratamiento de los machos con melatonina El efecto macho Premisas iniciales El efecto macho: definición El aislamiento entre sexos: requerimientos Fuente y transmisión del estímulo 5. La oveja Actividad reproductiva en el ganado ovino Regulación de la actividad reproductiva por el fotoperiodo Ritmo endógeno de reproducción Interacciones entre la estacionalidad y factores endógenos Raza-latitud Edad Sexo Inicio Andador del Palacio de Larrinaga, 2 - 50013 Zaragoza - España Recepción de la señal por la oveja Tipos de respuesta Anterior Anterior ! Tel.: 976 46 14 80 ! Fax: 976 42 30 00 Siguiente ! pedidos@grupoasis.com LA EDITORIAL DE LOS VETERINARIOS 6. Calendarios reproductivos Interacciones entre la estacionalidad y otros factores Objetivos de una planificación reproductiva Nutrición Relaciones sociales Premisas fundamentales para la elaboración del calendario reproductivo Conclusiones Control de la actividad reproductiva mediante el tratamiento con melatonina Traducción de la señal del fotoperiodo en un mensaje hormonal Utilización práctica de la melatonina para mejorar la reproducción ovina Inicio de un plan reproductivo Un caso práctico ¿Cómo empezamos? ¿Qué posibilidades tenemos? Posibilidades de calendarios reproductivos considerando la oveja o el rebaño como referencia Modo de aplicación de la melatonina Protocolo de utilización de los implantes de melatonina Análisis general de resultados Factores que modifican la respuesta a la melatonina 7. Diagnóstico de gestación en ovinos Nutrición Edad Asociación de implantes de melatonina con el tratamiento clásico de sincronización (esponja vaginal más eCG) Tratamientos con melatonina en moruecos Posibles efectos negativos del tratamiento con melatonina Generalidades Técnicas de diagnóstico Diagnóstico de gestación mediante la determinación de los niveles de progesterona Diagnóstico de gestación a través de la ecografía 8. Manejo del semen e inseminación artificial Posibles mecanismos de acción de la melatonina Obtención del semen En hipotálamo e hipófisis En el ovario Sobre el embrión Evaluación del semen Análisis rutinario Conclusiones Métodos de control del ciclo sexual. Progestágenos y prostaglandinas Breve recordatorio del ciclo sexual para comprender los tratamientos hormonales Tratamientos basados en el uso de progesterona y progestágenos Volumen y aspecto Concentración Motilidad Viabilidad Técnicas basadas en el uso de colorantes Técnicas no basadas en el uso de colorantes Análisis no rutinarios (funcionalidad espermática) Estudio de la capacitación espermática Detección de cambios relacionados con procesos apoptóticos Pautas de manejo Las corderas Tiempos claves en los tratamientos con progestágenos Manejo y conservación del semen Separación del plasma seminal y selección de espermatozoides Conservación del semen Tratamientos basados en el uso de prostaglandinas Uso combinado de progestágenos y prostaglandinas Semen fresco Semen refrigerado Semen congelado Inicio Andador del Palacio de Larrinaga, 2 - 50013 Zaragoza - España Planteamientos para la elección del ritmo reproductivo Sistemas reproductivos: la intensificación Calendarios reproductivos Anterior Anterior ! Tel.: 976 46 14 80 ! Fax: 976 42 30 00 Siguiente ! pedidos@grupoasis.com LA EDITORIAL DE LOS VETERINARIOS Inseminación artificial ovina Bases de un programa de mejora genética Inseminación exocervical Inseminación intrauterina Fases de un programa de mejora Testaje de machos Parámetros genéticos Metodología BLUP Catálogo de reproductores Progreso genético 9. Tecnología de la reproducción Producción in vitro de embriones Extracción de ovocitos Maduración in vitro Fecundación in vitro Cultivo de embriones in vitro Aplicaciones de la producción de embriones in vitro Organización de un plan de mejora El cruzamiento en la especie ovina ¿Cruzamiento o selección? Base genética del cruzamiento Tipos de cruzamiento en la ganadería ovina Producción de embriones in vitro a partir de animales prepúberes Producción de individuos idénticos a partir de un sólo embrión Clonación Animales transgénicos Obtención de células madre embrionarias para investigación Cruce mejorante Cruce absorbente Cruce industrial Cruce en doble etapa Razas sintéticas 11. Bibliografía Producción in vivo de embriones Objetivos e importancia de las técnicas MOET Tratamiento de sincronización Aumento del potencial ovulatorio Fecundación y recuperación de embriones Posibilidades de mejora de la eficacia de las técnicas MOET Alternativas a las inyecciones repetidas de FSH Recuperación de ovejas al final de su vida productiva Mejora de la eficacia de los tratamientos de superovulación en el anestro Conclusiones Congelación de embriones 10. Manejo de los rendimientos reproductivos Selección. Descripción práctica de la puesta en marcha de un plan de mejora genética Introducción Papel de la mejora genética en la producción animal Inicio Andador del Palacio de Larrinaga, 2 - 50013 Zaragoza - España Anterior Anterior ! Tel.: 976 46 14 80 ! Fax: 976 42 30 00 Siguiente ! pedidos@grupoasis.com Detección de celos La introducción de moruecos provistos de arneses marcadores se utiliza habitualmente en las explotaciones ovinas para determinar la aparición del celo y consecuentemente el inicio de la pubertad. La observación de las marcas en la zona lumbar de los animales permite identificar las corderas en celo. Ecografía La ultrasonografía transrectal con sondas de alta resolución (7,5 MHz) es una técnica no invasiva de gran efectividad, que posibilita la observación directa de los folículos y cuerpos lúteos en el ovario (fig. 10). A diferencia de la laparoscopia, la técnica ecográfica no requiere anestesia ni el ayuno previo de los 48 Laparoscopia La técnica laparoscópica permite visualizar in situ los ovarios y detectar la presencia de cuerpos lúteos (indicativos de la aparición de ovulaciones, fig. 9). Las endoscopias se deben realizar, al menos, cada 15 días a partir de los 5 meses de edad en corderas nacidas en primavera y a partir de los 8-9 meses de edad en las nacidas en otoño. A pesar de la efectividad de esta técnica, su utilización se ve limitada por la imposibilidad de realizar exploraciones rutinarias. Estudio del perfil de secreción de progesterona animales, y permite una ejecución de las exploraciones de forma rutinaria, con una mayor periodicidad. F CL CL La determinación de las concentraciones plasmáticas de progesterona, por radioinmunoanálisis (RIA) o enzimoinmunoanálisis (EIA), en muestras de sangre recogidas periódicamente (1-2 veces por semana), a partir de los 5 meses de edad en corderas nacidas en primavera, y de los 8-9 meses en las nacidas en otoño, permite obtener una información precisa y objetiva del comienzo de la actividad ovulatoria. La ausencia de ciclos de progesterona (concentraciones basales: < 0,5 ng/ml) durante el periodo prepuberal seguido de la aparición de ciclos regulares de progesterona, como reflejo de la actividad de los cuerpos lúteos, indican el comienzo de la pubertad (fig. 11). La aplicación de métodos fiables que permitan conocer el momento en el que se establece la pubertad supone una herramienta de gran valor tanto para estudios básicos como aplicados. Pueden ser utilizados los siguientes métodos: Métodos para determinar el inicio de la pubertad Figura 9. Laparoscopia e imagen de ovarios con cuerpos lúteos (CL) y folículos (F). MANEJO REPRODUCTIVO EN GANADO OVINO Inicio CL Curva de progesterona REGRESIÓN DEL CUERPO LÚTEO PUBERTAD (ACTIVIDAD CÍCLICA OVULATORIA) FORMACIÓN DEL CUERPO LÚTEO Y SECRECIÓN DE PROGESTERONA CL F Figura 10. Ecografía transrectal e imagen de ovarios con cuerpos lúteos (CL) sin cavidad (arriba) y con cavidad (abajo) y folículos (F). F CL Anterior Anterior Siguiente 49 Figura 11. Monitorización del comienzo de la pubertad: ausencia de ciclos de progesterona durante el periodo prepuberal y aparición de ciclos regulares de progesterona como reflejo de la actividad del cuerpo lúteo (Santiago-Moreno et al., 2003). OVULACIÓN PERIODO PREPUBERAL LA CORDERA Pubertad en la oveja 50 días 33 días 16 días M1 M2 M3 52 55 86 Nº animales 46,2 1,14 40,4 70 Al inicio de la década de los 90, diferentes autores recomendaban que la colocación de los implantes tuviera lugar al menos 2 meses antes del inicio de la estación natural de reproducción de la raza considerada, como momento óptimo del año para el inicio del tratamiento con melatonina. Ello suponía que en países ubicados en latitudes superiores a la nuestra, tal es el caso del Reino Unido, el momento más adecuado para el inicio del tratamiento estuviera en torno al solsticio de verano (junio-julio); sin embargo, en nuestro país, donde las razas ovinas inician su periodo de actividad reproductiva con antelación a las ubicadas pulsátil de LH entre los días 40-60 desde el inicio del tratamiento (Bittman et al., 1985); otros autores han considerado que se requieren al menos 35 días desde el inicio del tratamiento hasta la introducción de los moruecos, de manera que el protocolo recomendado del producto comercial (implantes subcutáneos con 18 mg de melatonina) indica que los moruecos deberían ser introducidos a los 40 días del inicio del tratamiento y, en todo caso, no antes del día 30 y no después del día 50. Resultados recientes de nuestro grupo de investigación han mostrado que si la cubrición se inicia a los 33 días tras la colocación del implante puede haber una cierta penalización tanto de la fertilidad como de la fecundidad en relación a una introducción posterior de los moruecos (tabla 2); por tanto, la recomendación final sería no iniciar la cubrición antes de los 40 días tras el inicio del tratamiento con melatonina. Llaman la atención los resultados obtenidos tras la colocación de los implantes en diciembre-enero, en torno al solsticio de invierno. La lógica dice que no deberían ser efectivos, pues en dicho momento es cuando la oveja está experimentando los días más cortos del año. No obstante, los resultados obtenidos en el seno de nuestro grupo de investigación, tanto a nivel experimental, con ovejas ovariectomizadas y tratadas con estradiol, como a nivel comercial con ovejas enteras, muestran claramente el efecto positivo del tratamiento con melatonina en ese momento, lo que indica que la oveja es capaz de responder a un tratamiento que le proporciona una información de días incluso más cortos que los del solsticio de invierno y que, por tanto, en ese momento todavía no se ha iniciado la insensibilidad a los días cortos que dará lugar al inicio del anestro estacionario. A nivel de explotación, el tratamiento con melatonina en enero mejora ligeramente la fertilidad y la prolificidad, de manera que el aumento global de la fecundidad es en latitudes superiores, el tratamiento con melatonina debería iniciarse antes, en torno al equinoccio de primavera (marzo-abril). De hecho, la efectividad de los implantes parece reducirse notablemente cuando el inicio del tratamiento tiene lugar a partir de mayo, salvo quizás en la raza Lacha y otras que se encuentran ubicadas en la cornisa norte y oeste del país, que presentan una superior estacionalidad sexual que el resto y en las que estaría justificado un cierto retraso en el momento de la colocación del implante. b 78,2ª 1,16 89,5ª Fecundidad (%) b 1,2 Prolificidad 67,3ª 72,1ª Fertilidad (%) Letras diferentes en la misma columna indican diferencias significativas (P<0,05). Intervalo implante-machos Lote Tabla 2. Resultados reproductivos de ovejas Rasa Aragonesa tras la aplicación de implantes subcutáneos de melatonina en primavera, en función del intervalo entre el inicio del tratamiento e introducción de los moruecos: 50 (M1), 33 (M2) o 16 (M3) días (adaptado de Argote et al., 2005). MANEJO REPRODUCTIVO EN GANADO OVINO Inicio 0 20 40 60 80 100 1 88a 1,86 ± 0,05ª 1,63 ± 0,07ª Fertilidad (%) Prolificidad Fecundidad 1,02 ± 0,07b 2 3 M C 4 Finalmente, se recomienda que los moruecos permanezcan con las ovejas un periodo de tiempo equiparable a la duración de dos ciclos sexuales (en torno a 35 días). De este modo, el subsiguiente periodo de cubriciones presenta un desarrollo similar al de un Siguiente 71 En función de lo señalado con anterioridad, el ganado ovino de nuestro país recibe los tratamientos con melatonina en diferentes momentos, pero siempre a lo largo del primer semestre del año. Los resultados muestran una cierta variabilidad en función de la raza, el momento del tratamiento y otros factores que serán analizados con posterioridad. No obstante, y en conjunto, casi siempre se observa un beneficio claro de los implantes sobre la fertilidad y sobre la prolificidad, en particular debido a un efecto de la melatonina tanto sobre la tasa de ovulación como sobre la supervivencia embrionaria. Es muy importante tener en cuenta que el propio mecanismo de acción del tratamiento con la hormona pineal no permite asegurar siempre un determinado grado o nivel de mejora de los parámetros reproductivos, aunque en ningún caso se ha descrito un efecto negativo del mismo. Todo ello ha determinado que el número de ovejas implantadas en nuestro país vaya aumentando año tras año. Análisis general de resultados efecto macho clásico, aunque con una mayor agrupación de los partos que en el caso de las ovejas no tratadas. También parece haber un aumento del número de ovejas paridas en los primeros 17 días tras la introducción de los moruecos, probablemente debido a un aumento de la ciclicidad previa a dicha introducción inducida por la propia melatonina (fig. 11). 0,36 corderos “extra”/oveja 1,39 ± 0,07ª 1,34 ± 0,07 1,50 ± 0,06b 67b 1,69 ± 0,05ª Letras diferentes indican diferencias significativas (P<0,05). M: melatonina; C: control. ÉPOCA INICIO TRATAMIENTO C 128 b 83ª 76b 22 Marzo 1,77 ± 0,04ª 150 M 159 C 0,30 corderos “extra”/oveja 156 29 Diciembre Nº de ovejas M Tabla 3. Mejora de los parámetros reproductivos tras el tratamiento con implantes subcutáneos de melatonina en ovejas Rasa Aragonesa en función del momento de la colocación del implante, el 29 de diciembre o el 22 de marzo (adaptado de Forcada et al., 2002). muy similar al conseguido con el tratamiento en marzo, el momento más habitual (tabla 3). Anterior Anterior LA OVEJA Control de la actividad reproductiva mediante el tratamiento con melatonina Figura 11. Porcentaje de ovejas Rasa Aragonesa paridas los primeros 17 días tras la introducción de los moruecos en función del momento de la colocación del implante: 1 de enero (1), 15 de febrero (2), 1 de abril (3) o 15 de mayo (4) (adaptado de Valares et al., 2003). M: melatonina; C: control. PORCENTAJE OVEJAS PARIDAS Día 0 = Celo OOCITO FECUNDACIÓN Día 1 Día 2 Ovulación 2 Cél. Ovario 4 Cél. Día 3 23-25 días 102 Más de 40 días Laparoscopia 14-21 días 120 días Último tercio de la gestación (100 días) Biopsia vaginal Determinación de niveles de proteínas específicas de la preñez (INFτ) Otros (poco prácticos) Observación de ubres Radiografía 60 días Palpación abdominal 95% 95% --- --- 98% --- Inicio 80-95% 90% 90-98% 24-25 (transabdominal) 28-30 días (transabdominal) 50-60 días 90% 95-100% 100% 18-20 días (transrectal) 24-25 días (transrectal) Desde la segunda mitad de gestación 90% 95-98% Desde 20-22 días 18-24 días Blastocisto Mórula Confianza (%) Día 6-7 Día 5 CUERNO UTERINO Momento idóneo de aplicación Ecografía tipo Doppler Ecografía Determinación de los niveles de P4 No retorno al celo Métodos Día 4 DIAGNÓSTICO DE GESTACIÓN EN OVINOS Tabla 1. Técnicas para realizar el diagnóstico de gestación en la oveja Figura 1. Esquema del desarrollo y tránsito del embrión en el tracto genital de una oveja (adaptado L. Barañao. Biotecnología en reproducción animal, 2007). MANEJO REPRODUCTIVO EN GANADO OVINO Anterior Anterior Siguiente Posibilidad de diagnósticos “falsos positivos”, es decir, que se consideren como hembras preñadas a hembras vacías con persistencia patológica del CL (ciclo estral prolongado, piometra, mortalidad embrionaria temprana) o con presentación de ciclo corto y siguiente ciclo vacía. Necesidad de personal idóneo para obtener resultados fiables. Requiere un laboratorio, equipos adecuados y que la técnica sea puesta a punto. Inconvenientes Toma de muestras rápida y limpia. Realización del diagnóstico a partir de los 20-22 días de gestación. Alta especificidad para detectar animales no preñados. Ventajas El fundamento de este método de diagnóstico se basa en que, en hembras gestantes, el CL se mantiene en el ovario y continúa secretando P4 a lo largo de casi la totalidad de la gestación. La concentración de los niveles de P4 se puede determinar utilizando suero, plasma y/o leche. Aunque existen diversas técnicas de laboratorio, en la actualidad se utilizan técnicas inmunológicas como radioinmunoanálisis (RIA) y/o enzimoinmunoanálisis (ELISA), ya que ambas combinan alta especificidad con alta sensibilidad. Diagnóstico de gestación mediante la determinación de los niveles de progesterona Técnicas de diagnóstico En la actualidad, los métodos de elección para un diagnóstico precoz son la determinación de los niveles de P4 en plasma y la ultrasonografía (ecografía), ya que presentan un balance adecuado entre rapidez, funcionalidad y fiabilidad. Sin embargo, el hecho de que la ecografía se realice en tiempo real y sin necesidad de análisis de laboratorio es una ventaja determinante. de manera más temprana (tabla 1), de modo que su aplicación dentro de un programa de intensificación reproductiva es fundamental. 103 Figura 2. Equipo de ultrasonografía para diagnóstico por imagen. Los equipos de ultrasonografía constan de un transductor (o sonda) y de un cuerpo que integra un monitor de TV y un osciloscopio electrónico (fig. 2). Se requiere personal capacitado en la identificación de las imágenes para obtener resultados fiables. El coste del equipo es relativamente alto. Inconvenientes Diferenciación de patologías con CL persistente. Determinación del número de embriones. Determinación de la viabilidad embrionaria por latido cardiaco y tamaños. Realización del diagnóstico a partir de los 18-20 días de gestación. Alta especificidad para detectar hembras preñadas y vacías. Ventajas La ecografía de modo B o ultrasonografía es una técnica que permite obtener una imagen dinámica de los órganos reproductivos mediante un método no invasivo. Utiliza ondas de sonido de alta frecuencia, medidas en megahercios (1MHz= 1.000.000 de ondas por segundo), para producir imágenes de los tejidos blandos y de los órganos internos. Diagnóstico de gestación a través de la ecografía DIAGNÓSTICO DE GESTACIÓN EN OVINOS Aplicador del semen. Lector de bolos. 142 Baño maría. Tanque de semen congelado (-196 ºC). PREPARACIÓN DEL SEMEN SUJECIÓN DE LOS ANIMALES EQUIPO • Liberación de la oveja. • Inseminación. Carrusel de inseminación: • Tres camillas giratorias, colocación de la oveja. MANEJO REPRODUCTIVO EN GANADO OVINO Endoscopio de 7 mm. De óptica 0 º: • Unido a cable de fibra óptica. Bombona y manómetro de CO2: • Para insuflar CO2, produce neumoabdomen y aisla el útero del resto de las vísceras. Inicio Fuente de luz: • Origen de la luz, transmitida al endoscopio por el cable de fibra óptica. Trocar de 5 mm: • Utilizado para la introducción del aplicador del semen. • del endoscopio. • Utilizado para la introducción Trocar de 7 mm: • Doble vía. Válvula para gas CO2. APLICACIÓN DEL SEMEN Anterior Anterior Colocación final. Sujeción de las patas delanteras. Sujeción de las patas traseras. SUJECIÓN DE LOS ANIMALES OPERACIONES PREVIAS CON EL SEMEN 143 • Montaje del áspic (vaina con aguja para la colocación del semen en el útero). Montaje del aplicador: • Colocación de la pajuela descongelada. Descongelación en el baño maría: • 60 ºC durante 5 segundos. • Proceso rápido. Extracción del semen congelado: • Selección del macho. TÉCNICA Inseminación artificial ovina MANEJO DEL SEMEN E INSEMINACIÓN ARTIFICIAL