IMR Bulletin Jun 1992 - Kementerian Kesihatan Malaysia

KANDUNGAN
CONTENTS
Teknik-Teknik Diagnosis Penyakit Malaria ..................................................
Penyakit Cryptosporidium di Malaysia ......................................................
Satu Teknologi Imunoasai, MEIA .....................................................................
Kemudahan Ujian HIV di Makmal Rujukan AIDS Kebangsaan, IMR .........
Ringkasan-Ringkasan Penerbitan IMR ...........................................................
Tesis Ph.D ............................................................................................................
Anugerah Saintis Muda IMR dan Teknologis Perubatan IMR ......................
Mesyuarat Kongres Asia Keenam Pemakanan 1991 ......................................
Program Pengawasan Keresistan Antibiotik Kebangsaan ............................
National Antibiotic Resistence Surveillance Programme .............................
Diagnostic Techniques in Malaria ................................................................
Cryptosporidiosis Among Malaysians ............................................................
A Novel Immunoassay Technology. the MEIA ...............................................
HIV Testing Facilities at the National AIDS Reference La boratoy. IMR .....
Abstracts of some IMR Publications .............................................................
Ph.D Thesis .....................................................................................................
IMR Young Scientist and IMR Medical Technologist Awards .......................
The Sixth Asian Congress of Nutrition 1991.................................................
KETERANGAN GAMBAR KULIT
LEGENDS FOR COVER P U T E
Malaria:
- pembawa penyakit malaria
Anopheles mosquito - vector of malaria.
1. Nyamuk Anopheles
2. Splenomegali - satu ciri biasa jangkitan malaria
Splenomegaly - a common feature of malaria infection
dilihat dalam filem darah nipis.
3. Peringkat 'ring' PZasmodiztm fakipui-iz~i~z
Plasrnodimn falciparum ring stage seen in thin blood film.
LEMBAGA PENYUNTING
EDITORIAL BOARD
Pengerusi:
Dato' Dr M . Jegathesan
Penyunting:
Encik Chong Hen Kee
Ahli:
Dr. Chiang Geok Lian
Cik Chin Yuet Meng
Puan Josephine L. Fernandez
Encik Joseph B. Lopez
Dr. Karen Lai Peng Foon
Encik Mohd Zainuldin Taib
Dr. Normaznah Yahaya
Dr. Zainah Sa'at
Teknik-Teknik Diagnosis Penyakit Malaria
Patricia Lim Kim Chooi
Malaria masih merupakan salah satu di antara
penyakit-penyakit penting yang dihidapi manusia.
Di Malaysia, penyakit malaria terus menjadi
satu rnasalah kesihatan tnasyarakat yang
mengakibatkan morbiditi dan kadang-kadang
adalah parasit
mortaliti. Plas~~zodiz~m,falczpa~~z~?n
yang terpenting.
Aspek yang penting untuk pengurusan dan
pengawalan penyakit malaria ialah untuk
membuat diagnosis infeksi ini secara cepat dan
tepat. Kebolehan untuk mengesan parasit malaria
di dalam manusia adalah prosedur penting untuk
kedua-dua diagnosis individu dan juga kajian
epidemiologi. Pemeriksaan mikroskopi filem darah
untuk mengesan parasit malaria merupakan
kaedah pengesanan parasit yang utama. Iiaedah
ini adalah spesifik dan sensitif kerana dapat
mengesan parasitemia kurang daripada 0.00019h
(Bruce-Chwatt, 19841, tetapi juruteknik yang
terlatih diperlukan bagi memeriksa setiap smear
darah. Ia juga memakan masa, mahal dan tidak
begi'tu sesuai untuk kajian epidemiologi yang
besar.
Perkembangan terbaru dalam diagnosis parasit
malaria ialah teknik quantitatif buffy coat (QBC)
untuk ujian pantas bagi parasit malaria melalui
pemerhatian langsung sampel darah yang telah
dicentrifuge di dalam tiub QBC (Paray et 01,
1990). Ujian QBC dapat mengesan paras
parasitemia serendah 0.00005%. Kajian oleh IPP
bagaimanapun menunjukkan yang ujian ini kurang
superior daripada kaedah filem darah. Tarnbahan
lagi, ujian ini tidak boleh mengkuantitat
parasitemia secara mudah dan adalah mahal
untuk dikendalikan bagi kajian epidemiologi
pang besar.
Selama tempoh beberapa tahun sebilangan ujian
serr>lngi telah dihcnti~khagi mengeyan samada
antibodi malaria atau antigen plasmodium di
dalam sera pesakit-pesakit malaria. Asai serologi
bagi mengesan antibodi adalah lebih berguna
sebagai alat epidemiologikal untuk mengukur
dan rnengawasi endemisiti malaria, tahap transmisi
malaria, kesan kaedah kawalan lebih daripada
untuk diagnosis individu kerana kehadiran
antibodi dalam serum menggambarkan infeksi
masa lalu dan juga masa kini.
Ujian gel precipitasi secara tekniknya adalah
mudah dan tidak mahal, tetapi telah dibuktikan
secara relatifnya tidak sensitif d a n juga
memerlukan kepekatan antigen yang tinggi. Ujian
'indirect haemagglutinarion' CIHA) adalah di anlard
ujian-ujian terawal dibentuk bagi mengesan
antibodi malaria. Ujian ini mudah dan tidak
mahal serta jumlah sampel yang besar boleh
diproses dalam satu masa . Walau bagaimanapun,
ia kurang sensitif dalam mengesan infeksi awal.
Ujian indirect fluorescent antibndi (TFAT) telsh
dalam tahun-tahun kebelakangan ini merupakan
ujian yang paling diharapkan untuk mengesan
antibodi kerana sensitiviti dan spesifikasinya.
Kegunaannya sebagai a l a ~cpidcn~iulugikaltelah
ditunjukkan di Malaysia iMak et al, 1987). Ujian
ini telah dibuktikan berguna sebagai petunjuk
untuk pengalaman malaria dalam populasi, tahap
endemisiti dan transmisi, dan juga pengawasan
kaedah kawalan untuk malaria. Ujian ini
memerlukan mikroskop fluoresen, ini menjadikanny:2 tidak praktikal untuk kegunaan di
lapangan, dan juga pembacaan slaid oleh individuindividu adalah subjektif. Dengan pembentukan
asai 'enzyme-linked immunosobent' (ELISA),
kcputusail ujian buleh dilihat dengan mata kasar
dan ini menjadikannya berguna di lapangan. Ia
juga menghasilkan keputusan yang objektif dan
boleh disepara automasikan dan dipiawaikan
bagi menguji jumlah sampel yang besar dalam
satu masa (Bidwwell and Voller, 1981).
Pendekatan yang alternatif untuk mikroskop
cahaya bagi diagnosis kehadiran plasmodia dalam
darah manusia ialah pengesanan antigen parasit
atau asid deoxyribonucleic (DNA) parasit.
Pengenalan bioteknologi dalam tahun-tahun
kebelakangan ini telah membolehkan penggunaan
Antibodi monoklonal yang dihasilkan terhadap
peringkat aseksual dalam darah dengan spesifisiti
antibodi monoklonal dan probe DNA Jalarn
yarlg jclas akan bergurla untuk diagnosis antigen
diagnosis malaria.
plamodium dalam serum penyakit malaria.
Antibodi monoklonal yang begitu telah digunakan
dalam ELISA dan asai imunoradiometri (IRMA)
untuk mengesan antigen kedua-dua asai ini
menunjukkkan sensitiviti yang baik dan IRMA
menujukkan korelasi yang baik dengan
Teknologi 'recombinant DNA' telah membawa
kepada pembentukan probe DNA bagi P.
falcipariunz dan P. ~&mh:untuk diagnosis infeksi
manusia dan vektor nyamuk. Tahap parasitemia
yang bolch dikcsan olch probe-probe ini ialah
parasitemia dengan kebolehan untuk mcngcsan
lebih kurang 0.0001%, iaitu bersamaan dengan
sensitiviti pemeriksaan filem darah. Pendekatan
lain pula rnenggunakan probe yang spesifik
untuk species untuk mengesan RNA ribosom
(rRNA) parasit malaria oleh kerana probe yang
mengesan sasaran ini berkemungkinan lebih
parasit malaria serendah 2.4 parasit bagi setiap
lo8 sel darah merah. Antibodi monoklonal yang
dibentuk terhadap P.ji;llcipawm dan P. cynomolgi
di IPP juga telah menunjukkan spesifisiti dan
sensitiviti yang baik dalam 'sandwich-ELISA'
untuk mengesan antigen (Lim et a l , 1992). Tugas
scnsitif kerana bilangan salinan scqucncc sasaran
seterusnya untuk
lebih tinggi dan heterogenous. Bagaimanapun,
kaedah ini belum lagi diuji untuk sarnpel dari
pesakit-pesakit, dan soalan tentang kestabilan
rRNA sasaran untuk sanlpel-sampel di lapangan
perlu dijelaskan. Potensi penggunaan probeprobe DNA sebagai altenatif kepada pemeriksaan
immunobinding' menggunakan monoklonalmonoklonal tersebut akan membolehkan
pembentukan ujian lapangan yang pantas untuk
kajian seroepidemiologi.
filem darah memberiksln beberapa kclcbihan
terutanlanya untuk tinjauan yang besar ke atas
penduduk di kawasan bermalaria. Pada masa
kini, kebanyakan probe DNA memerlukan label
radioaktif dan ini menjadikannya tidak praktikal
sama ada untuk kegunaan klinikal atau di
lapangan. Justeru itu adalah perlu untuk mencari
kaedah untuk melabel probe DNA b u k a n
menggunakan bahan radioaktif. Pada masa
sekarang kajian sedang dijalankan di IPP bagi
membentuk probe DNA dengan label bukan
radioaktif bagi parasit malaria daripada manusia
dan monyet untuk digunakan sebagai alat
diagnosis dan seroepidemiologi.
Perkembangan penting yang lain ialah pengenalan
teknik hibridoma untuk penghasilan antibodi
monoklonal. Teknik ini sudah digunakan secara
meluas bagi menghasilkan antibodi rnonoklonal
terhadap berbagai-bagai peringkat hidup parasit
malaria untuk mengenali parasit, diagnosis dan
kajian-kajian imunologi. Antibodi monoklonal
terhadap protein circumsporozoit parasit malaria
telah digunakan untuk menentukan prevalen
nyamuk yang terinfeksi, beban sporozoitnya
dan status species sporozoit yang menginfeksi.
mcmbcntuk asai
'dot
Rujukan
Bidwell DE, Voller A (1981). Malaria diagnosis
by enzyme-linked immunosorbent assays.
Brit Med J 252: 1747-1745.
Bruce-Chwatt LJ (1984). DNA probes for malaria
diagnosis. Lancet 1: 795.
Lim PKC, Mak JW, Yong HS (1992). Detection
of circulating plasmo - dial antigens in human
sera by sandwich-ELISA with monoclonal
antibodies. Southeast Asian J Z'rop Med H-yg
23: 735-739.
Mak JW, Lim PKC, Tan MAJA, Lam PLW, Noor
Rain A, Selvadurai GD, Hanjeet K (1987).
Parasitological and serological surveys for
malaria among the inhabitants of an aborigine
village and a n adjacent Malay village. Actn
TTOP 44: 83-89.
Parzy D, Raphenon B, Martet G, Nicholas P,
T u u ~ eJE, Baudon D, Lecalnus JL (1990).
Quantitative Buffy Coat Test (QBC Test)
Monofluo Kit Falciparum. Comparative value in
the rapid diagnosis of malaria. Medicine
Tropicale 50: 97-101.
-
-
Penyakit Cryptosporidium di Malaysia
Karen La i Peng Foon
Cryptosporidium adalah protozoa coccidia yang
biasa terdapat pada haiwan vertebrata. Spesiesspesies C'yptosporidium adalah berkaitan diantara
satu sama lain tetapi Cryptosporidium pamum
adalah hanya satu spesies yang menyebabkan
penyakit pada manusia. Infeksi ini adalah zoonotik
dan haiwan seperti reptilia, burung, kuda, anak
lembu, babi dan kucing bertindak sebagai hos
perumah. Jangkitan protozoa ini adalah melalui
terhadap penyakit ini dan pembaharuan di dalam
teknik pendiagnosaan. Penemuan terbaru
melaporkan Cpptospomdzum boleh menyebabkan
sindrom kolestatik yang disebabkan oleh
kolangitis sklerosis dan papilari sterosis
terutamanya pada pesakit AIDS.
Bagaimanapun pengetahuan tentang infeksi ini
sangat kurang di Malaysia. Pada 1987, satu
kajian di kalangan pesakit-pesakit pediatrik di
wad gastroenteritis, Hospital Klang menunjukkan
kekerapan Cyptosporidium ialah 4943. Kajian lain
dibuat di Hospital Universiti menunjukkan
najis-ke-mulut atau melalui kontaminasi air
minuman. Organisma ini tidak dapat dimatikan
ole11 klorin d a n tidak tertapis dengan
menggunakan penapisan air biasa untuk bekalan
air ke rumah-rumah.
kckcrapannya ialah 2.1%. Kajian di Kelantan
pula menunjukan 11.5% adalah positif di kalangan
kanak-kanak yang berumur 7 tahun ke bawah
yang dimasukkan ke hospital di sebabkan oleh
cirit-birit. UI dalam komuniti di Kelantan,
dikalangan kanak-kanak yang mengalami ciritbirit, 10.6% dari contoh najis yang diperiksa
didapati mengandungi infeksi Cryptosporidium.
Kemungkinan organisma ini penting sebagai
agen aetiologikal yang menyebabkan cirit-birit
di kalangan kanak-kanak di negara ini. Di negara
Organisma ini boleh menjadi komensal atau
pengambil peluang (opportunistic) dan ia boleh
bertindak sebagai benigna atau palogen yang
mengancam kehidupan bergantung kepada status
immuniti individu itu. Kadar pembawa yang
tinggi didapati di kalangan pesakit yang tiada
gejala (asimptomatik) yang menjalani pemeriksaan
gastroduodenoskopi untuk penyakit-penyakit
yang lain.
ini juga tiada angka yang menunjukkan kekerapan
Cyptosporidium biasanya terdapat pada kanakkanak terutamanya dari golongan sosioekonomi
yang rendah. Cyptosporidium menyebabkan cirithirit yang tenik dikalangan kanak-kanak yang
mengalami hipogammaglobuline~niadan yang
kekurangan daya pertahanan t u b u h
(immunodificient) serta pesakit-pesakit AIDS.
akibat dari infeksi ini di kalangan pesakit yang
mempunyai sindrom kurang daya tahan tetapi
kajian turut dibuat bagi kes-kes yang positif.
Secara umum, tiada kemoterapi atau
imunoterapi yang spesifik terhadap
Cyptosporidium yang telah dikenal pasti tetapi
ubat-ubat tertentu seperti Octeotide laitu analog
somatostatin, Zidovudine, Halofuginone lactate,
Spiramicin, Azithromycin serta sebahagian
Sulphonamides seperti Sulfadimethoxin dan
Sulfamethadine, telah memberikan hasil yang
menggalakan. Dalam keadaan biasa gejala-gejala
penyakit akan pulih seperti biasa dalam beberapa
hari s a h j a tetapi di kalangan mcrcka yang
mempunyai immune sistern yang tidak normal,
gejala-gejala penyakit ini boleh berlarutan.
Ia juga biasa b w j a ~ ~ g k kepada
it
pengembara-
pengembara yang pergi ke negara-negara yang
kurang maju. Beberapa kawasan di USA dan
England dilaporkan sebagai kawasan epidemik
bagi Cyptosporidium. Transmisi di sini adalah
disebabkan oleh kontaminasi air minuman dengan
najis binatang.
Kepentingan Cryptosporidium sebaga~ agen
patogen hanya dikenalpasti sejak 8 tahun
kebelakangan ini disebabkan oleh kepekaan
3
Disebabkan kepentingannya sebagai penyebab
cirit-birit baru sahaja di temui maka kajian
t e r h a d a ~ n ~belum
a
dibuat secara menyeluruh
di makmal-makmal'di Malaysia. Memandangkan
ubat yang berkesan mungkin didapati tidak
lamalagi,diagnosamakn~alberkaitandengan
organisma ini perlu dilakukan terhadap semua
kes cirit-birit di kalangan kanak-kanak dan pes.&t
yang kurang daya tahan. Teknik pencelupan
Ziehl-Neelsen yang diubahsuai biasa digunakan
,,tuk
menjadikan organisma ini rnerah pad2
smer najis dan menjadikannya nludah dilihat di
bawah mikroskop kampaun. Teknik
immunofloresens dengan menggunakan slat
kelengkapan ujian berbentuk kit boleh diperolehi.
Satu Teknologi Imunoasai Baru, MEIA
Joseph B Lopez
Ekoran kerja-kerja permulaan Yallow dan Berson
pada tahun 19601,teknik imunoasai telah terus
berkembang dengan pesat. h i telah menghasilkan
berbagai jenis variasi dari teknik asal bagi kerjakerja mengukur sesuatu bahan analit pada takat
kepekatan yang terendah di dalam c e c a i r
biologikal. I m u n o a s a i t e r d a h u l u y a n g
menggunakan label radioisotop (oleh itu dikenali
sebagai radioimunoasai, RIA) adalah amat sukar
untuk dijalankan dan juga imunoasal in1 selalu
memberi keputusan yang tidak tepat. Kemajuan
berikutnya pula membawa kepada peningkatan
ketepatan imunoasai dengan masa ujian yang
lebih singkat. Tetapi ianya masih t e t a p
menggunakan radioisotop yang mempunyai
potensi berbahaya.
Peristiwa penting yang berlaku pada awal tujuh
puluhan bagi teknik ini ialah penggunaan enzim
bagi menggantikan radioisotop. Ini adalah h a d
gagasan penyelidik-penyelidik Sweden iaitu
Engvall dan Perlmann',3. Penggunaan enzim
menjadi lebih menarik memandangkan ianya
lebil~selama~,~cagerl-reagenyang digunakan
mempunyai separuh hayat yang lebih panjang
dan tidak memerlukan alatan yang mahal untuk
mengesan hasil akhir ujian. Enzim alkalin fosfatase
dan horseradish peroksidase kerap digunakan
untuk teknik enzim - imunoasai (EIA) ini.
Iicperluan untuk menjalankau uji.d11 ke alas
bilangan sampel yang banyak dalam masa yang
singkat pula telah menghasilkan imunoasai secara
automasi terutamanya bagi teknik EIA. Dalam
tahun tujuh puluhan, sejenis teknik yang serupa
iaitu teknik Enzim Multiplied Imunoasai (EMIT,
Syva. Corp., USA) bagi bidang Kimia Klinikal
tclah dihasilkan. Ia merupakan satu kejayaau
dalam bidang ini walaupun ianya hanya terhad
kepada kerja-kerja mengukur molekul-molekul
kecil seperti dadah. Penghujung tahun lapan
puluhan pula mempamerkan perkembangan
canggih teknik EIA berautomasi penuh yang
menggunakan instrumentasi pada keseluruhan
perjalanan assei. Salah satu darinya ialah
mikropartikcl cnzim imunoasai (MEIA)*.
Teknologi MEIA menggunakan mikropartikel
submikron yang diselaputi molekul tertangkap
(antigen, antibodi atau partikel virus) yang khusus
bagi bahan yang hendak diukur. Kawasan
permukaan yang luas dan jarak difusi yang
kecil antara bahan analit dan fasa pejal telah
menghasilkan peningkatan assei kinetik dan
penyingkatan masa inkubasi. Ini membolehkan
ujian dapat dijalankan dcngan pantas.
Selepas inkubasi, campuran reaksi antara partikelpartikel mikro dan bahan analit dipindahkan ke
dalam matrik fiber kaca lengai di mana partikel
mikro akan bercantum secara tak berbalik.
Komplek imuno ini akan terlekat pada fiberfiber kaca manakala bendalir-bendalir reaksi
disalur melalui rongga-rongga yang terdapat di
dalam matrik. Komplek imuno pada rnatrik fiber
kaca bolch dikcsan dcngan pcnggunaan konjugat
yang telah dilabel dengan enzim alkalin fosfatase.
Enzim ini boleh katalis reaksi hidrolisi 4methylumbelliferone. Kadar penghasilan 4methylumbelliferone, iaitu sejenis hasil pendafluor,
adalah sekadar kepada kepekatan bahan analit
di dalam sampel yang diuji.
Alat-alat yang digunakan untuk sistem assei ini
ialah dari Abbott IMX (Abbot Diagnostics, N
Chicago, USA). Sistem ini bolch digunakan untuk
mengukur bahan analit seperti peptid dan hormon
steroid, petanda-petanda tumor, protin lain dan
partikel-partikel virus serta antibodi. Alat ini
mudah digunakan, mempunyai automasi penuh
dan tidak memerlukan tenaga manusia melainkan
proses untuk mernasukkan sampel. Essei IMX
boleh menjalankan ujikaji sebanyak 24 sampel
pesakit-pesakit secara serentak dan mengambil
masa antara 35-45 minit bergantung kepada
jenis bahan analit. Manakala ujian RIA dan EIA
yang dijalankan secara manual mengambil masa
antara beberapa jam hingga 3 hari bagi tiap-tiap
kumpulan yang diuji.
Rujukan
1. Yallow RS and Berson SA. J Clin Invest
39, 1157, (1960).
E
and
Perlmann
~mmunochemistly8, 871, (1971).
2. Engvall
P.
3, Engvall E and Perlmann P. J f m r n u n 109,
129, (1972).
4. Fiore MD, Mitchell JE, et al. Clin Chem
34, 1726, (1988).
Kemudahan Ujian H N di Makmal Rujukan
AIDS Kebangsaan
Randel Fang
Kemudahan-kemudahan bagi pendiagnosan
Human Immunodeficiency Virus (HIV) telah
ditubuhkan di Bahagian Virologi, Institut
Penyelidlkan Perubatan (IPP) dalam tahun 1985.
Sejak itu, peranan unit ini telah diperluaskan
dan diperkembangkan. Dalam tahun 1987,
Kementerian Kesihatan Malaysia (KKM) telah
mengiktirafkan IPP sebagai Makmal Rujukan
AIDS Kebangsaan (NARL) dan Makmal HIV
merupakan salah satu komponen utama
kemudahan baru ini.
Kemudahan-kemudahan yang ditawarkan oleh
NARL bagi diagnosa HIV boleh dibahagikan ke
dalam 3 kategori umum: saringan, pengesahan
dan penyelidikan. NARL berkhidmat sebagai
salah satu pusat saringan bagi pihak KKM. Walau
bagaimnnnpun, in berlainnn dnri pusat-pusat
saringan yang lain di mana ujian diagnosa HIV
yang dijalankan oleh NARL tidak terhad kepada
ujian saringan yang telah dipilih sahaja. Buat
masa kini, NARL secara rutin menggunakan dua
jenis ujian saringan iaitu, teknik ujian recombinant
competitive enzyme linked immunosorbent dan
ujian agglutination menggunakan partikel sintetik.
Protokol ini sentiasa diulangkaji dan dikemaskini.
Selain dari kedua-dua ujian ini, NARL juga terlibat
dalam penilaian kit-kit/protokol-protokol saringan
yang baru dan salah satu fungsi NARL ialah
menilai Kit diagnosa HIV baru sebelum ia
diperkenalkan ke pasaran tempatan.
Selain dari menjalankan ujian-ujian saringan
HIV, NARL juga berfungsi sebagai makmal yang
tunggal di negara ini yang telah diarahkan untuk
mcnjalankan ujian pengesahan HIV bagi keskes yang disyaki HIV positif. Pada masa ini
protokol pengesahan NARL termasuk menjalankan
beberapa ujian-ujian saringan untuk menguji
semula sera-sera yang telah dirujuk sebagai
HIV positif. Jika ujian-ujian ulangan didapati
positif, ujian teknik Western blot dijalankan.
NARL iuga menggunakan ujian Immunofluorescent
(IF) sebagai essei pengesahan tambahan tetapi
penggunaan essei ini telah diberhentikan. NARL
juga boleh mengesahkan sama ada pesakit
menghidapi HIV-1 atau HIV-2.
Asai-asai yang telah disebut di atas adalah untuk
mengesan antibodi kepada HIV di dalam pesakit.
Bagaimanapun pada peringkat awal jangkilan
HIV, antibodi tidak boleh dikesan. Bagi situasi
seperti ini, NARL boleh mengesan kehadiran
virus dengan mengesan HIV antigen menggunakan
teknik ELISA di dalam sera pesakit yang disyaki
telah berjangkit virus HIV. NARL juga sedang
dalam proses mengasaskan ujian polymerase
chain reaction (PCR) untuk mengesan HTV
Dari sini dapat dilihat bahawa NARL menawarkan
ujian-ujian yang terperinci bagi diagnosa jangkitan
HIV di rlegala irli clan melupakan bahagian
penting dalam langkah negara mengawasi
penyebaran penyakit berbahaya AIDS.
'Soil-transmitted helminthiases' mengikut
taburail eilulik kawasan setinggail di Kuala
Lumpur.
Hanjeet K, Lai PF, Ow Yang CK and
Mathias RG.
Trop Biomed 1991; 8 : 33-37
'Soil-transmitted helminthiases' adalah merupakan
salah satu jangkitan cacing yang utama di negaranegara dunia ketiga. Secara umumnya kelaziman
penduduk Malaysia mengalami jangkitan ini ialah
lebih kurang 40%. Kajian keatas kadar jangkitan
ini adalah menekankan kepada kumpulan ethnik.
Ianya dijalankan di 43 buah kampung setinggan
yang melengkungi kawasan 25 lcm di Kuala
Lumpur.
Populasi rangka sampel yang diambil ialah
1 4 , 3 6 7 . Kadar respon yang diterima
keseluruhannya ialah 69%. Dengan menggunakan
anggaran status ethnik penduduk, kawasan kajian
telah dibahagikan kepada 3 kumpulan
berdasarkan nisbah kepada kumpulan ethnic
Cina.
Dari jumlah 9863 contoh najis yang diambil,
5,746 (58%) didapati mempunyai sekurangkurangnya 1 jenis cacing. Kadar jangkitan yang
tertinggi ialah diperingkat umur 11-15 tahun
(74%) dan yang terendah ialah 0-5 tahun (47%).
Didapati terdapat kesan variasi di dalam kadar
jangkitan apabila populasi penduduk dikawal
mengikut status ethnik. Kadar jangkitan oleh
setiap jenis cacing telah dibandingkan mengikut
kumpulan umur dan status ethnik dan didapati
telah menurun kepada lebih kurang 30% disetiap
kumpulan manakala kadar anggaran status
kumpulan ethnik Cina telah bertambah. Keputusan
yang didapati mengikut analisa statistik
menggunakan secara chi-square ialah (p<0.01).
Kadar jangkitan 58% yang didapati daripada
keseluruhan survei ini adalah tinggi daripada
yang diar~ggarkandi Malaysia. Merr~andangkan
populasi kajian, ini memang telah dijangkakan.
Di samping pembangunan, kadar 'soil-transmitted
helminthiases' penduduk di kawasan setinggan
di Malaysia tidaklah menunjukkan banyak
perubahan semenjak 10 tahun yang lalu.
Pendidikan kesihatan yang intensif,
p c ~ s k i t a r a nyang bersih dan program rawatan
cacing mungkin dapat membawa perubahan
masa depan kepada kajian 'soil-transmitted
helminthiases'. Kumpulan ethnik hendaklah
diambilkira semasa perancangan program
kawalan dibuat.-
Keberkesanan tiga pyrethroids terhadap
Leptotrombidium fletcheri
(Acari:
Trombiculidae) yang dijangkiti dan yang
tidak dijangkiti oleh tifus skrub
Ho TM and Salleh Ismail
JMed Entornol1991; 28: 776-779
Toksisiti tiga jenis pyrethroid, d-phenothrin,
decamethrin dan permethrin terhadap tungau
LeptotrombidizrmJletcheri (Womersky & Heaslip)
telah diuji dimakmal. Kajian mengenai daya
ketahanan tungau yang berjangkit dan yang
tidak berjangkit dengan kuman skrub tifus, telah
dilakukan. Teknik bioassei yang digunakan ialah
teknik pipet Pasteur. Keputusan yang diperolehi
telah dianalisa dengan ujian-t, log-probit dan
analysis varian. Ketiga-tiga racun serangga tersebut
menunjukkan kesan yang berbeza terhadap
tungau. Racun serangga yang paling berkebar~
ialah d-phenothrin, diikuti dengan decamethrin
dan permethrin. Keputusan analysis menunjukkan
tiada perbezaan yang bermakna terhadap daya
ketahanan diantara tungau yang berjangkit dan
yang tidak berjangkit. Analisa oleh log-probit
menunjukkan bahawa tungau paling sensitif
kepada kcpckatan d-phenothlin yang bertambah
dan terkurang sensitif kepada permethrin.
Keputusan Kajian menunjukkan bahawa ketigatiga racun serangga yang diuji, berpotensi sebagai
bahan untuk pengawalan vektor L.Jletcheri.Hasil
kajian ini menunjukkan bahawa pada masa
hadapan, biosassei bolehlah dilakukan dengan
tungau tidak bcrjangkit sahaja, tindakan ini alran
mengurangkan jangkitan tifus skrub di samping
pekerja yang menjalankan bioassei itu. Tungau
yang dikumpul di medan tidak perlu diasingkan
kepada yang berjangkit dan yang tidak, sebelum
menjalankan bioassei.
.
Percubaan dilapangan ke atas perbandingan keberkesanan malathion dan
resigen dengan kaedah ULV ke atas aedes
aegypti.
Fermentasi BaciZZus tburigiensis Malaysia
untuk penggunaan secara besar-besaran B.
th ~r njgiensis H - 14 ialah penghasilan agen ini
dalam kuantiti yang besar seboleh-bolrhnya
dengan menggunakan hahan-bahan buangan
tempatan dengan perbelanjaan yang kecil, maka
kajian yang dijalankan ini dilaksanakan untuk
menyiasat p o l a kinetik p e r t u m b u h a n B.
thtlrigiensis H-14 isolat Malaysia (dinamakan
sebagai IMR-BT-8) dalam herbagai media buangail
dan untuk mengenalpasti b a h a n yang ses~lai
untuk pengeluaran. Kajian fermentasi telah
dijalankan dalam balang goncang 1 liter
mengandungi media huangan yang djbancuh
dengan perlgguricarlg bcrputal pada 30 C. Pada
selang masa berkala, 2ml sampel dikeluarkan
untuk penentuan ciri-ciri pertumbuhan. Hasil
fermentasi terakhir telah dituai, ditulinkan dan
keupayaannya telah ditentukan melalui bioassai
dengan nyamuk. Lima jenis bahan buangan
iaitu bahan buangan ltelapa yang diparut halus,
buangan l a c a n e soya sisa minyak kelapa sawit.
buangan ikan (sisa ikan bilis? dan bran beras
telah dikaji. Dalam media nutrien paiwai dan
buaiigan kacailg soya, IMR-BT-8 mengambil masa
I ~
Dalam buangan kclapa
37 j a ~ ~L lI I ~ ~ Lmatang.
parut, buangan ikan dan bran beras, bakteria
mengambil 28 jam, 26 jam dan 126 jam masingmasing untuk inatang. Endotoksin dituai daripada
media nutrien piawai pada 55 jam dan 50 jam
daripada buangan kacang soya, buangan kelapa
parut dan ikan. Endotoksin hanya dapat dituai
150 jam selepas inokulasi daripada media bran
beras. Bagaimanapun tiada pertumbuhan bakteria
dikesan dalam sisa minyak kelapa sawit.
Perkembangan sporulasi sebagaiinana dipcrhatikan di hawah mikrosliop menunjukkan
bahawa endotoksin telah disintisiskan antara
8 - 24 jam dalam piawai penapai kacang soya,
buangan kelapa dan ikan. Toksin tersebut hanya
disintisiskan 26 jam selepas inokulasi dalam
bran beras. Perubahan pH media penapai juga
dicatatkan. Bergantung kepada media yang
digunakan, endotoksin tersebut dituai pada suatu
julat pH 5 . 5 - 8.5. Dalam ha1 pengeluaran
endotoksin dan biojisim, Buangan ikan merupakan
media yang sesuai untuk pengeluaran secara
besar besai-an IMR-BT 8.
serotip isolat H-14, suatu agen kawalan
mikrobial nyamuk dengan menggunakan
bahan buangan tempatan.
Penilaian kahak pra- dan pos-bronkoskopi,
11. Indra and P. Pissanuvas
Soz~rhenstAsiauJ Trop Med Pub Hlth 1991;
22:102-107
Percubaarl dilapangari ela ah dijalankan di dua
kawasan Majlis Perbandaran Petaling Jaya untuk
mengesan perbandingan terhadap keberkesanan
penggunaan racun serangga yang sekarang ini
digunakan iaitu malathion 96% TG dan YdCun
serangga yang baru iaitu Resigen keatas nyamuk
Aedes Aegjpti - pembawa denggi. Mesin Leco
HT) 1JT.V tclah d i p ~ n a k a ndi dalam pcrc~lhazn
ini. Bagi malathion, kadar aliran yang digunakan
ialah 90 ml/minit pada kelajuan kenderaan 8
kph dan bagi Resigen, kadar aliran ialah 200
ml,/lninit pada kelajuan kellderaan yallg sama.
Ae. neglpti dewasa ditempatkan di dalatn sangkar
yang berukuran 1' x 1' x 1' yang diperbuat
daripada kain jaring dan jentik-jentik ditempatkan
di dalam rnangkuk plastik yang berukuran 8 cm
garispusat dan 5 cm tinggi, dan mengandungi
200 ml air. Tiga buah sangkar diletakkan di
dalam setiap lima buah rumah; satu ditempat
letak kereta, satu dibilek rehat dan satu dibahagian
dapur. Jarak purata sangkar-sangkar itu dari
tepi jalan ialah 9 m, 13 m dan 18 m. Operasi
ULV ini bcrmula antara pukul 6.00 p.m. dan
6.30 p.m. Mangkuk-mangkuk d m sangkar-sangkar
itu diambil setelah tempoh setengah jam
d i d e d a h k a n k e p a d a racun serangga d a n
diperhatikan kemortalannya setelall 24 jam.
'Ovitraps' diletakkan di dalam rumah-rumah itu
s e t e l a h sangkar-sangkar- diarnbil d a n
pembiakannya diperiksa setiap minggu. Malathion
yang lebih berkesan memberikan kadar
kemortalan yang lebih tinggi jika dibandingkan
dengan Resigen. Kadar kemortalan Ae. aegypti
diluar rumah adalah lebih tinggi daripada di
bilik rehat dan bahagian dapur.
Lee HL and Seleena P.
Soz~theastAsian. J Trop Med Pub Hlth 1991;
22:108-112
Bacilltls t h ~ ~ r i g i e m serotip
is
H14 adalah satu
agen kawalan mikrobial nyamuk dan lalat hitam
yang sangat berkesan. Kekhususannya,
b i o p e m e c a h a n , d a n ketoksikan larvanya
meluaskan penggunaannya dalam pengawalan
vektor. Oleh kerana salah satu daripada keperluan
basuhan bronkial dan berusan bronkial dalam
diagnosis paru-paru
Pillay B, Aziah A Mahyuddin and Intan Ahmad.
]be tkznzily Physzcian 1991; 3:25-27
Lapan puluh enam orang pesakit yang disyaki
menghidap kanser paru-paru primer d a n
dirujukkan ke Pusat TB Negara untuk pemeriksaan
bronkoskopi gentian-optik telah dipilih dalam
kajian ini. Kajian bertujuan untuk menentukan
nilai relatif pelbagai jenis spesimen sitologi dari
saluran pernafasan pesakit dalam menentukan
diagnosis dan mcngenal pasti faktul-faktui yang
mempengaruhi kelupasan sel-sel malignan. Kahak
pra-bronkoskopi dan berusan bronkial paling
kerap menunjukkan sel-sel diagnostik. Manakala
tumor hilar daripada bronkus besar, skuamos
dan sel kecil jenisanaplastik pula paling kerap
menggelupaskan sel-sel. Kajian menonjolkan
keberkesanan kaedah-kaedah sitologi dalam
diagnosis kasinoma bronkogenik. Penilaian
sitologi mungkin satu-satunya k a e d a h
mengesahkan diagnosis apabila keputusan analisis
tidak dapat dirumuskan daripada biopsi. Dalam
penyiasatan seseorang pesakit yang disyaki
menghidap karsinoma paru-paru, kahak 'deep
cough-up' yang baik harus diperiksa terlebih
dahulu untuk menentukan diagnosis sebelum
pesakit terpaksa melalui prosedur-prosedur seperti
bronkoskopi.
Penghasilan antibodi monoklonal untuk
menentang bisa ular Naja naja kaouthia.
Noor Rain A., Ambu S and Mak JW.
Trop Biomedicine 1991; 8:117-122
Rawatan kepada keracunan bisa ular bergantung
rapat kepada ketepatan identifikasi jenis ular.
Pemajuan kepada huraian yang lebih khusus
dan sensitif boleh diperolehi dengan menggunakan antibodi monoklonal yang khusus. Dalam
kajian ini dua antibodi monoklonal (CV2D8 dan
C V l E 9 ) telah dihasilkan terhadap bisa
monocellate. Kedua antibodi monoklonal (IgG
sub kclas) bcrtindak dcngan berat molekul tinggi
73 Kd berkuasa tarikan dengan antigen bisa
ular senduk. Kajian reaksi-silang dengan antigen
bisa ular yang lain menunjukkan bahawa
monoklonal ini adalah khusus kepada monocellate
bisa senduk (Najd naja kaouthia) dan adalah
bermanfaat sebagai bahanuji untuk pendiagnosaan.
Imun respons kepadaMycobaterium leprae dalam
manusia yang sihat dan pesakit kusta
Haruinder Kaur Gill
mrsa&
+V
..
Dianggarkan ada di antara 10 hingga 12 juta kes
kusla di dunia l ~ a r iini. Kawalan kusta melalui
pengesanan kes dan rawatan telah tidak berjaya
dilakukan. Justeru, peningkatan program kawalan
yang sedia wujud dan penemuan strategi alternatif
adalah perlu. Vaksinasi ialah salah satu strategi
alternatif yang boleh terokai dalam kawalan
kusta.
Tujuan kajian ini ialah untuk nlenyiasat respons
imun, humoral dan juga sel mediated, kepada
vaksinasi dengan vaksin M. leprae armadillo yang
dibunuh dengan suhu tinggi, ke atas sukarelawan
sihat yang tinggal di negara tidak endemik.
Disamping itu, kajian ini juga membuat penyelidik
respons kepada M , lepvne di kalangan pesakit
kusta, sebagai perbandingan.
Kesan vaksinasi dengan vaksin M. lepme armadillo
yang terbunuh, kc atas s u k a l r l a w a ~ l yang
bervaksinasi BCG diantara 23 ke 29 tahun, dikaji.
Sukarelawan ini dimasukkan ke dalam 4 kumpulan
secara rambang dan diberikan dos vaksin menaik
di antara kumpulan iaitu 1.5 x lo7, 5 x lo7,
1.5 x 108dan 5 x 108bacilli. Satu kumpulan kontrol
yang tidak disuntik vaksin juga dikaji.
Respons imun sel-mediated kepada vaksin ini
diukur in uivo melalui "skin test". Respons "skin
test" kepada antigen M.lepme larut (MLSA) dan
PPD (Ujian Mantoux; PPL) ialah protin dari
filtrat kultur M. tziberculosis~diukur sebelum dan
3 bulan selepas vaksinasi mtlnunjukkan yang
kumpulan-kumplilan yang menerima tigz dos
vaksin tertinggi menampakkan peningkatan
respons yang jelas kepada MLSA. Tidak banyak
perbezaan, dilihat pada respons kepada PPD,
yang tinggi sebelum dan selepas vakisinasi. Ini
adalah sesuatu yang dijangka kerana sukarelawan
ini telah divaksinasi dengan BCG sebelumnya.
I'emeriksaan proliferasi ( u k u r a n imuniti
selmediated 21.1 rlztro) llmfosit dari mereka yang
divaksin, sebagai respons kepada antigen MLSA
dan PPD melihatkan garnbaran yang sama.
Peningkatan jelas pada respons proliferatif kepada
MLSA dilihat pada kumpulan yang mendapat
dua dos vaksin yang vaksin tertinggi tiga bulan
selepas divaksinasi dan sepanjang jangkamasa
setahun kalian.
Kajian respons sel-mediated kepada vaksinasi
s e t e r ~ ~ s n y ac l i p ~ r ~ a n j a n g k a nd e n g a n
penghasilan klon T sel dari 5 orang sukarelawan
yang telah menerima dua dos vaksin tertinggi.
Teknik mengklon sel T menlbolehkan satu-satu
sel '1'yang mempunyai ciri-ciri tertentu dibiakkan
dengan secukupnya untuk kajian seterusnya.
Sejumlah 42 klon T sel dibiakkan dan 11 dari
klon ini mempunyai respons kepada M. l e p r a ~
dan tidak kepada PPD atau BCG. Lima daripada
klon yang spesifik kepada M. leprne mempunyai
respons kepada protin M. leprae 18KD. Semua
klon ini merupakan fenotip CD4+ dan ada
beberapa yang mengeluarkan Interleukin-2 dan
Interferon-gamma dan ada yang sitoksik kepada
makrofaj jika M. lepme ada bersama.
ini
Respons humoral kepada vaksinasi di kalangan
sukarelawan ini juga dikaji. Walaupun dua
kumpulan yang menerima dos vaksin terendah
tidak menghasilkan tahap antibodi yang tinggi
sehingga satu tahun selepas divaksinkasi, dua
kumpulan yang menerima dos vaksin tertinggi
menghasilkan peningkatan titer antibodi enam
bulan selepas divaksinasi.
Respons irnun kepada M . lepms di kalangan
pesakit kusta juga dikaji. Pemeriksaan respons
limfoproliferatif di kalangan pesakit lepromatus
yang telah lama dirawat (>20 tahun) (TLL) dan
yang tidak dirawat CULL) menunjukkan yang
beberapa pesakit TLL mempunyai r e s p o n s keparla
M . lepme. 13 klon T sel yang dibiakkan dari 2
daripada pesakit ini menggunakan teknik piawai
dan dibandingkan dengan 5 klon T sel yang
dibiakkan dari pesakit kusta tuberkuloid (TT).
7 di antara klon ini dikaji secara lebib terperinci,
dan adalah didapati yang sementara kesemua
klon TT mempunyai respons hanya kepada M.
lepme, 3 diantara klon TLL mcmpunyai respons
yang spesifik kepada M. leprae dan satu daripada
klon ini menunjukkan "broad cross-reactivity"
kepada mikobakteria lain. Kesemua klon ini
adalah dari fenotip CD4+.
Kesi~npulandari kajian ini ialah vaksin M. leprae
armadillo yang dibunuh oleh suhu tinggi sudah
bersedia untuk diuji di negara endemik di mana
efikasinya a k a n d i u k u r b e r d a s a r k a n kem a m p u a n n y a m e m p e r t a h a n k a n diri dari
dihinggapi kusta. Di samping itu, kajian ini
merupakan fasa pertama dalam penggunaan
biologi molekular bagi menyingkap imunologi
selular penyakit kusta.
Anugerah Saintis Muda dan Teknologis
Perubatan IMR
Majlis penyampaian anugerah kepada pemenangpemenang Anugerah Saintis Muda dan Teknologis
pemenang, Jawatankuasa Pemilihan IMR telah
mengkaji semua kertas penyelidikan saintifik
Perubatan IMR telah dirasmikan oleh Ketua
yang telah diterbitkan dan menilai kertas ini
Pengarah Kesihatan Malaysia, Tan Sri Dr Abdullah
bin Abdul Rahman pada 9 Ogos 1991.
berdasarkan kecemerlangan saintifik, manfaat
hasil penyelidikan dan sumbangan kepada
pengetahuan atau maklumat baru.
Inilah kali pertama anugerah seumpama ini
diberikan oleh Institut. Anugerah ini adalah
untuk menghargai peranan penting kakitangan
Pemenang pertama Anugerah Saintis Muda IMR
tahun 1991 ialah En Lee Han Lim, kedua Dr
nr
makmal dan untuk menggalakkan saintis muda
Chiang Geak Lian d a n kctiga
dan teknologis makmal mempertingkatkan usaha
dalam penyelidikan yang dapat menyurnbang
ke arah perkhidmatan diagnostik yang lebih
baik bagi penjagaan kesihatan dan langkahlangkah pencegahan yang lebih berkesan dalam
program-program kawalan. Dalam pemilihan
Kaur Gill. Anugerah Teknologis Perubatan IMR
pula dimenangi oleh Cik Eng Kah Lee, tempat
kedua Cik Tan Geok Wah dan ketiga En Abdul
Kazak bin Mustaffa.
Surnbalzgan Ng Kok Han
Perp~enang-pemerzallgAnzgerah Saintis Mtldn
dun Teknologis Perzrbata~zIMR
Hsrvinder
Kongres Asia Keenam Pemakanan 1991
Kongres Pemakanan Asia diadakan setiap empat
tahun sekali dan Kongres yang pertama telah
diadakan di New Delhi pada tahun 1971 dan
kongres-kongres seterusnya di Manila, Jakarta,
Bangkok dan Osaka.
berkat dedikasi ahli-ahli dan bantuan kewangan
dan sokongan kumpulan-kumpulan penaja, Komiti
Penganjur telah berjaya mengatasi kebanyakan
rintangan yang telah dihadapi. NSM telah berjaya
mengadakan program saintifik yang seimbang
dan menarik bagi mencerminkan tema kongres
Pada Kongres 1987 di Osaka, Jepun, Persatuan
Pemakanan Malaysia (NSM) telah dengan
beraninya menyahut cabaran untuk menjadi tuan
rumah Kongres Pemakanan Asia yang Keenam.
Kongres ini telah diadakan di Pusat Dagangan
Dunia Putra, Kuala Lumpur pada 16-19 September,
1991. Memandangkan Persatuan ini masih baru
iaitu ditubuhkan pada tahun 1985 dengan hanya
mempunyai 300 orang ahli dan akaun bank
yang sedikit, tugas yang hendak dipikul ini
adalah amat mencabar. Walau bagaimanapun,
iaitu "Nutritional Challenges and Frontiers T o w a r d s
Year 2000".
Kongres ini telah dihadiri oleh 700 orang peserta
dari 45 buah negara dan bilangan negara yang
mengambil bahagian mungkin adalah yang
terbanyak berbanding dengan kongres-kongres
dari sebelumnya
P e n g a n j i ~ r - p e n g a n j u r juga
menaja penuh atau separuh bagi 50 orang peserta
asing. Ini dipercayai belum pernah terjadi di
kongres-kongres Pemakanan Asia yang terdahulu.
Ah11 Akzjlis Jazuntankuasa Perzganjur Iiorzgres P e t n n k n m n Asia Kcenam 1991
12
Program saintifik empat hari ini mengandungi 7
ucapan jemputan yang lengkap, 120 syarahan
simposium, 130 pclnbcntia~lgankvnlul~ikasibebas
dan 158 poster skop lengkap bagi program
saintifik. Oleh itu, empat sessi simposium/
komunikasi bebas terpaksa diadakan secara
serentak dalam sehari. Ini menyebabkan ahliahli komiti saintifik dan kumpulan odio-visual
menjadi amat sibuk.
Pada keseluruhannya, Kongres ini amat berjaya
di dalam pengurusan Kewangan dan juga kualiti
kandungan saintifiknya. Ini telah dicerminkan
,
dari maklumbalas positif yang diterima dari
peserta-peserta luar negara. Lapuran perjalanan
kongres ini boleh didapa~i di sekretaria~
NSM, d/a Bahagian Pemakanan, Institut
Penyelidikan Perubatan, Kuala Lumpur.
Kongres Pemakanan Asia yang ke Tujuh telah
dijadualkan akan diadakan pada September,
1995 di Beijing, China.
Sumbangan T o n y ~Kok
i Wai
I
I
Rancangan Pengawasan Keresistamran Antibiotik Kebangsaan 1991
Semenjak 1981, Bahag~anKaiikuman IPP telah menebirkan maklumat
corak kepekaan antibiotik bagi pencilan bakteria Klinikal dalam buletin ini
untuk manfrat doktor-doktor. Walau hagaimanapun data yang ditrrbitkan
pada mass lalu adalah daripada beberapa buah hospital yang mendapt
bantuan perkhidmatan IPP.
Di Uengkel Pertama Ahli Kajikuman Hospital yang diadakan pada h u h
September 1987telah diputuskanbahawa data in1haruslah lebih menyelun~h
dan langkah ini diteruskan sebagai Program Pmgamasan Keresistanan
Antibiotik Kebangsaan. Semua hospital-hospital besar bersetuiu menghancar
data mereka ke IPP, d m ringkasan maklumat keseluruhan yang diterima
ini akanditerbitkandidalamBuletin IPP dengan itn herrrrncan mrmainkan
peranan sebagai bank data mengawasi aliran corali keresistanan antibiotik
bagi pencilan-pencilan yang biasa terdapat di negara ini
--
Jadual I mmunjukkan kadar ke1-esistanansemua bakreria yang diasingkan
kepada beberapa antibiotik yang diuji di 15 buah makmal dalam bulan
Ogos dan September sahaja.Jadual I1 menunjukkan keresistanan bakteria
tertentu kepada antibiotik sepanjang tahun kerana cin-ciri seperti ini tidak
selalu berlaku. Apabila keresistanan seperti ini dikesan makmal-makmal
berkrnaan diliehendaki menghantar kultur ini ke IPP untuk disah dan
dikenalpasti.Tetapi malangnya makrnal-makmal berkenaangagal berbuat
demiliian, oleh rtu laporan mengena~keresistanan Netssenagonorrhoeae
terhadap spectinomycin, penicillin dan MRSA yang 'resistant' kepada
vancomycm mungkin tidak sepertl yang digambarkan. Kesilapan seperti
ini merupakan 'reknikal' sahaja oleh kerana makmal yang terlibat
mengenalpasti kuman yang tidak tepat atau menggunakan konsentrasi
antibiotikyang tidak hctul. Langkah-langkah yang pcrlu tclah pun diamhil
untuk mengurangkan kesilapan seperti ini. Pada keseluruhannya didapati
corak keresistanan antibiotik ridak banyak herubah berbanding tahuntahun lepas.
'l'able 1: NA'l'lONAL SUKVEILLANCE OF AN'l'lBlOTlC
PERCENTAGE OF ORGANISMS
I---I
Acirzetobacter spp
Citrobmter spp
Enterobacter spp
Escherichirr coli
Klebszella spp
Morgnrzella
?uo?gat~ii
Proteus spp
Psez~doirolnonus
aeruginosa
Pseudo~nonasspp
Snlmonella spp
Salmotzella Ophi
Shigellu spp
Sewaria spp
Staphylococcus
aureus
MRSA
Staph. epidetwkh
Coag. negative staph.
Group A strept.
Group B strept.
Strept.pnelmoniae
NOTE: N o - ?' /a of resistance
* - not confirmed
L
Nationat Antibiotic Resistance Surveillance Programme 1991
I
Since 1981, the Division of Bacteriology. IMR has been publishing the
Table I1 shows the resistance of specific bacteria to specfic antibiotics
antibiotic sensitivity pattcrna of rli~~ical
bactc~iali s d d t ~in
s this I,ullrlin fur
th~uughoutthc ycar as thc occurrcnccs of thcsc arc rare. Whcn such
the benefit of doctors, unfortunately, the data published in the past has
been that of a few district hospitals served hy the IMR.
resistance were detected the laboratories concerned were required
to send the strains to IMR for confirmation. Unfortunately this had
not been done all the time and therefore the report on spectinomycin
resistant Neisserin gonorrhoene, penicillin resistant Group A and B
At the first national meeting of hospital bacteriologists held in September
1987,it was decided that the data should be more comprehensive and take
the form of a National Antibiotic Resistance Surveillance Programme. All
general hospitals agreed to send their data to the IMR and the total
informationreceived would be published in this Bulletin. The IMR has thus
assumed the role of a data bank monitoring emerging trends in antibiotic
resistance amongst the common isolates in the country.
Table I shows the resistance rate of all bacteria isolated to various
antibiotics tested in the 15 laborzrtories for the months of August and
September only.
RESISTANCE (AUGUST-SEPTEMBER 1991)
RESISTANT T O ANTIBIOTICS
(No.)
-
Total No. tested against the antibiotic
streptococci and thc vancomycin resistant MRSA may not be trur. The6e
are most probably technical errors as those laboratories that did submit
such 'resistant' strains were shown to have either misidentified them or
used the wrong antibioticdisc strength. Continuous effort have been made
to minimise such errors. On the whole there has not been much changes
in the resistance wattcm of the various organisms compared to previous
years.
Table I1 - NATIONAL ANTIBIOTIC RESISTANCE SURVEY ON SPECIFIC BACTERIA (JAN-DEC 1991) % OF RESISTANCE
Hospitals
Organisms
S. aureus
(MRS~4)
-IPerlis
A. Setar
N. gonorrhoeae
(PPNG)
N. gonorrhoeae
(Spectinomycin R)
H. influenzea
(Chloramphenicol R)
H. influenzae
(Arnphicillin R)
S. pneumoniae
(Penicillin R
relativzly R)
S. typhi
(Chlorarnphenicol R)
V. Cholerae
(TetracyclineR)
Gp. A Strept.
(Penicillin R)
Gp. B Strept
(Penicillin R)
% of resistance
Total No. of isolates tested
- not confirmed
Nc.
-
()
-
*
Penang
K. Bahn
K. Trg.
Kuantan
Kelang
K Lumpur
Seremban
Malacca
K. Kinabalu
IMR
All
Hospital
Diagnostic Techniques in Malaria
Patricia Lim Kim Chooi
Malaria is still one of the most important diseases
affecting humankind. In Malaysia, malaria
continues to be an important public health
problem causing considerable morbidity and
sometimes mortality. Plasmoditrnz falcipar~mis
the most important parasite.
An important aspect in the management and
control of malaria is the ability to diagnose the
infection rapidly and accurately. The ability to
detect malarial parasites in humans is an important
procedure both for individual diagnosis as well
as in epidemiological studies. Microscopic
examination of blood films for malarial parasites
has been the main method of parasite detection.
This method is both specific and sensitive as
parasitemia of less than 0.0001% can be detected
(Bruce-Chwatt, 1984),but a well-trained technician
is required to examine each blood smear. It is
also time-consuming, expensive and not very
suitable for large scale epidemiological studies.
A recent development in the diagnosis of malarial
parasites is the Quantitative Buffy Coat Test
(QBC Test) for the rapid diagnosis of the malarial
parasite by direct observation of centrifuged
samples of blood in QBC tubes (Parzy et al., 1990).
The QBC test could detect levels of parasitaemia
as low as 0.00005%. Studies conducted by the
IMR however, showed this cesL to be less superior
than the blood film method. In addition, this
test cannot quantitate parasitaemia easily and is
also expensive to perform for large-scale
epidemiological studies.
Over the years a number of serological tests has
been developed for the detection of either malarial
antibodies or plasmodia1 antigens in sera of
malaria patients. Serological assays for antibody
detection are more useful as epidemiological
tools to assess and monitor malaria endemicity,
the level of malaria transmission and the impact
of control measures rather than for individual
diagnosis as the presence of malarial antibodies
in the serum reflects past as well as current
infections.
The gel precipitation test is technically simple
and inexpensive, but has been shown to be
relatively insensitive a n d requires high
concentrations of antigens. The indirect
hemagglutination test (IHA) is one of the earliest
test developed for the detection of malarial
antibodies. This test is simple and inexpensive
and a large number of samples can be processed
at a time. However, it lacks sensitivity in detecting
early infections.
The indirect fluorescent antibody test (IFAT)
has in recent years been the most promising
test for malarial antibody detection due to its
sensitivity and specificity. Its usefulness as an
epidemiological tool has been demonstrated in
Malaysia (Mak et al., 1987). This test has proved
useful as an indicator of malaria experience of a
population, level of endemicity and transmission
as well as in the monitoring of control measures
for malaria. However, the need for a fluorescent
microscope renders this test impraclical in [he
field, and reading of the slides by human
individuals leads to subjective results. With the
subsequent development of the enzyme-linked
immunosorbent assay (ELISA), test results can
be read visually making it useful in the field. It
also yields objective results and can be partially
automated and standardized for tcsLi11g a large
number of samples at one time (Bidwell and
Voller, 1981).
An alternative approach to light microscopy for
the diagnosis of the presence of plasmodia in
human blood is the detection of parasite antigens
or parasite deoxyribonucleic acid (DNA). .The
introduction of biotechnology in recent years
has facilitated the use of monoclonal antibodies
and DNA probes in malaria diagnosis.
Recombinant DNA technology has led to the
development of P. falciparum and P. uivax
DNA probes for the diagnosis of infections in
human blood and mosquito vectors. The level
of parasitaemia detectable by these probes is
approximately 0.0001% which is similar to the
sensitivity of blood film examination. Another
approach utilizes species-specific probes for
detecting ribosomal RNA (rRNA) of malaria
parasites as probes detecting this target may
show increased sensitivity due to the high copy
number of target sequences a n d their
heterogeneity. However, this method has yet to
be tested on patient samples, and the question
of stability of target rRNA in field samples
needs to be addressed. The potential use of
DNA probes as an alternative to blood film
examination offers several advantages especially
for large scale surveys of malarious populations.
Currently most of the DNA probes require radiolabelling thus rendering them impractical for
either clinical or field use. It is therefore necessary
to find methods for the non-radioactive labelling
ur DNA prubes. AL presenl, studies are being
carried out at the IMR to develop non-radioactive
labelled DNA probes of human and simian
malaria parasites for use as diagnostic and seroepidemiological tools.
sera of malaria patients. Such monoclonal
antibodies have been used in the ELISA and
the immunoradiometric assay (IKMA) for antigen
detection. Both these assays showed good
sensitivity and the IRMA showed good correlation
with parasitaemia with the ability to detect as
few as 2.4 malaria parasites per lo8 red blood
cells. Monoclonal antibodies developed against
P.falcipamm and P. cynomolgi at the IMR have
also shown good specificity and sensitivity in
the sandwich-ELISA for antigen detection (Lim
et al., 1992). Further work to develop dot immunobinding assays using these monoclonals will
facilitate the development of rapid field tests
for seroepidemiological studies.
References
Bidwell DE, Voller A (1981). Malaria diagnosis
by enzyme-linked immunosorbent assays. Brit
Med J 282: 1747-1748.
Bruce-Chwatt LJ (1984). DNA probes for malaria
diagnosis. Lancet 1: 795.
Lim PKC, Mak JW, Yong HS (1992). Detection
of circulating plasmodia1 antigens in human
sera by sandwich-ELISA with monoclonal
antibodies. Southeast Asian J Trop Med Hyg
23: 735-739.
Another important development is the introduction
of the hyb~idumat c c l ~ ~ ~ i q
lur
u e~11cproduclion
of monoclonal antibodies. This technique has
been widely employed to produce monoclonal
Mak JW, Lim PKC, Tan MAJA, Lam PLW, Noor
antibodies against different stages of the malarial
Rain A, Selvadurai GD, Hanjeet K (1987).
parasite for parasite identification, diagnosis
Parasitological and serological surveys for malaria
and immunological studies. Monoclonal antibodies
among the inhabitants of an aborigine village
to the circumsporozoite proteins of malaria
and an adjacent Malay village. Acta Trop
i ~ ~ e 44: 83-89.
parasites have been used tu d e t c r ~ ~ ~he
prevalence of naturally infected mosquitoes,
their sporozoite load and the species status of
Parzy D, Raphenon B, Martet G, Nicholas P ,
the infecting sporozoite.
Touze JE, Baudon D, Lecamus JL (1990).
Quantitative Buffy Coat Test (QBC Test)
Monoclonal antibodies produced against asexual
Monofluo Kit Falciparum. Comparative value in
blood stages with defined specificities will be
the rapid diagnosis of malaria, Medicine Tropicale
uscful for diagnosis of plasmodia1 antigem in
50: 97-101.
Cryptosporidiosis Among Malaysians
Karen Lai Peng Foon
Cvyptosporidium is a coccidian protozoon which
is commonly found in vertebrates.
Cryptosporidium species may be closely related
to each other but only Cyptosporidium paruunz
is the one usually responsible for infection in
man. The infection is zoonotic and animals like
reptiles, birds, horse, calf, pig, and cat act as
reservoir hosts. It is transmitted via the faecaloral route or through contaminated drinking
water. The organism is not killed by chlorine
nor can it be filtered out using the conventional
treatment for water supply to homes.
The organism can be a commensal or an
opportunistic, acting as benign or hostile lifethreatening pathogen, depending on the immune
status of the person. High asymptomatic carrier
rate was found among patients undergoing
gastroduodenoscopy for other diseases.
Cqptosporidium is generally common in children
of the low socioeconomic group. It causes
severe
diarrhoea
in
children
with
hypogammaglobulinaemia a n d cellular
immunodeficiencies and in AIDS patients. It is
also a traveller's disease as adults often come
down with diarrhoea from this infection after a
trip to a less developed country. hp~demicof
this infection has been reported in USA and in
England mainly through water contaminated
with animal faeces.
Its importance as a pathogen only came to light
within the past 8 years, due to increase awareness
of this parasitic disease and improvement in
diagnostic techniques. Recently Cyptosporidium
has been reported to cause cholestatic syndrome
characterised by sclerosing cholangitis and
papillary stenosis in AIDS patient.
There is little information about this infection in
Malaysia. A study among paediatric patients
from the gastro-enteritis ward of the Klang
general hospital in 1987 showed a 4% prevalence
of Cvyptospovidiz~m. Another study done at
University Hospital showed a 2.1% prevalence.
A recent study in Kelantan showed 11.5% positives
among young children of seven years and below
admitted into hospital because of diarrhoea.
Among children with diarrhoea in the community
in Kelantan, 10.6% of those submitted stools
samples were infected with Cqptosporidium. This
organism may be an important aetiological agent
of diarrhoea among children in this country.
There are no figures on the prevalence of the
infection among patients with immunodificiency
syndrome in this country but positive cases
have been diagnosed among them.
In general, no specific chemotherapy nor
immunotherapy for Cyptosporidiun~infection has
been identified but promising results have been
achieved with certain drugs namely Octreotide
which is a somatostatin analogue, Zidovudine,
Halofuginone lactate, Spiramicin, Azithromycin
and some Sulphonarnides like Sulfadimethoxin
and Sulfamethadine. In most cases the symptoms
and infection resolve after a few days, but
among those predisposed by other diseases,
both symptoms and infection often persist for
long periods.
This protozoon is not routinely diagnosed in
our clinical laboratories as its importance as a
cause of diarrhoea has only being recognised
recently. In view of the facts that many of the
diarrhoeal cases in our hospitals are caused by
this organism and that an effective drug may be
soon available, laboratory investigation for this
organism should be carried out for all diarrhoeal
cases among young children and immunodeficient
patients. The modified Ziehl-Neelsen srdining
technique is most commonly employed to stain
the organisms red in faecal smears making them
readily observed under a compound microscope.
Immunofluorescent technique using a commercial
kit is available.
A Novel Immunoassay Technology, the MEIA
Joseph B Lopez
Following the erminal work of Yallow and
Berson in 1960 , immunoassays have followed
a path of explosive growth. This has resulted in
many variants of the original technique for the
measurement of a n a l ~ t e spresent i n very small
concentrations in biological fluids. Early
immunoassays used radioisotopes as label (and
were therefore called radioimmunoassays, RIA),
were tedious and often imprecise. Later
refinements saw better precision and shorter
assay times but persisted in the use of potentially
hazardous radioisotopes.
B
A significant milestone in the development of
immunoassays was the introduction of enzymes
to replace radioisotopes, in the early seventies,
a brai~lcl~ild
of Swedish researchers Engvall and
perlmann233. This had the obvious attractions
of safety, reagents with longer shelf-lives and
end-point signals which did not require the use
of expensive instruments. Alkaline phosphatase
and horseradish peroxidase are the labels
commonly used in enzyme-immunoassay (EIA).
The need to handle large numbers of samples
rapidly and reliably, povided the impetui for
the automation of immunoassays. EIAS, in
particular, a p p e a r e d amenable t o this
development. In clinical chemistry the
development of the homogenous EnzymeMultiplied Immunoassay Technique (EMIT, Syva
Corp., USA) in the seventies was a signifirant
step in this direction, though its use was confined
to the measurement of mostly small molecules
such as drugs. The late eighties saw the
development of elegant, fully-automated ElAs
with dedicated instrumentation. One of these
was the micro-particle enzyme immunoassay
(MEIA)~.
The MEIA technology uses submicron
microparticles coated with a capture molecule
(antigen, antibody or viral particle) specific for
the analyte bei11g mcasu~-cd.The large surface
area and the small diffusion distances between
analyte and solid phase result in increased asssay
kinetics and decreased incubation times enabling
assays to be performed rapidly.
After incubation of the microparticles and analyte,
the reaction mixture is transfered to an inert
glass fibre matrix to which the microparticles
bind irreversibly.The immune complex is retained
by the glass fibres while the reaction flows
rapidly through the large pores in the matrix.
The detection of the immune complex on the
glass fibre matrix is accomplished with an alkaline
phosphatase labeled conjugate that catalyzes
the hydrolysis of 4-methylumbelliferone. The
rate at which the 4-methylumbelliferone, a
fluoresce111producl, is generaled on h e rnalrix
is proportional to the concentration of the analyte
in the test sample.
The instrument used for this assay system is the
Abbott IMx (Abbott Diagnostics, N Chicago,
USA). The system can be used to measure
commonly assayed analytes such as peptide
and steroid hormones, tumour markers, other
proteins and viral particles and antibodies. The
instrl~mentis simple tn operate, fiilly alltomated
and, with the exception of loading samples, no
human intervention is required. The IMx can
assay up to 24 patient samples per analyte-run,
wlth each run, depending on the analyte, taking
about 35-45 minutes. Manual RIAs and EIAs, by
comparison, may take anything from a few
hours to up to 3, days per batch.
References
1. Yallow RS and Berson SA. J Clin I;izuest
39, 1157, (1960).
2.
Engvall
E
and
Perlmann
Immunochemistr?/ 8, 871, (1971).
3.
Engvall E and Perlmann P. JImnzun 109,
129, (1972).
4.
Fiore MD, Mitchell JE, et al. Clin Chem
34, 1726, (1988).
P.
HIV Testing Facilities at the National AIDS
Reference Laboratory, IMR
Randel Fang
Facilities for the diagnosis of the Human
Immunodeficiency virus (HIV) were established in
the Division of Virology, lnstitutefor Medical Kesearch
(IMR) in 1985. The role of this particular unit was
gradually expanded and improved upon, and in
1987, the Ministry of Health (MOH) designated the
IMR as the National AIDS Reference Laboratory
(NARL) with the HIV laboratory forming a major
component of this new facility.
The facilities offered by the NARL for HIV diagnosis
can be broadly divided into 3 categories: screening,
confirmatory and research. The NARL serves as one
of the designated screening centres for antibodies to
HIV on behalf of the MOH. However, it differs from
the other screening centres by not limiting to the use
of only a preselected screening assay. In its current
protocol, the NARL utilises two different screening
assays routinely,a recombinant competitive enzyme
linked immunosorbent assay (ELISA) technique, an
agglutination assay using synthetic particles. This
protocol is subjected to constant review and update.
In addition to using these two techniques, the NARL
is engaged in ongoing evaluations of new screening
protocols/kits, and, has as one of its functions, the
evaluation of all new HIV diagnostic kits prior to
their introduction in the local market.
In addition to carrying out HIV screening assays,the
NARL also currently functions as the only laboratory
in the country that is authorised to confirm the HIV
status of suspected HIV positive patients.The NAWs
confirmatory protocol currently involves the retesting
of all referred HIV suspected positive sera by several
screening assays and then testing all repeatedly
positive sera by the Western blot (WB) technique.
It also uses an Immunofluorescent (IF) test as an
additional confirmatory assay, but this procedure
has since been discontinued. The NARL is also able
to provide differential confirmatory diagnosis as to
whether the patient is suffering from an HIV-1 or
HIV-2 infection.
The assays described thus far are to detect the
presence of antibodies to HIV in a patient. However,
there is a period of time, usually immediately after
infection, where antibodies to HIV cannot be
detected. In such situations, the NARL is also able to
determine if the virus is present in the patient with
the detection of HIV antigen in the serum of
suspected patients by the ELISA technique. The
NARL is also in the process of establishing a
polymerase chain reaction (PCR) test for the detection
of HIV.
As can be seen, therefore the NARL offers a
comprehensive range of tests for the diagnosis of
HIV infection in the country, and forms a vital part
of the nation's battle to control the spread of the
deadly disease of AIDS.
Soil-transmitted helminthiases in squatter
population around Kuala Lumpur by ethnic
distribution.
Hanjeet K, Lai PF, Uw Yang CK and Mathias KG.
Trop Biomed 1991; 8: 33-37
Soil-transmitted helminthiases is one of the major
worm infections in third world countries.The overall
prevalence of soil transmitted helminth infections in
the general population of Malaysia is approximately
40% This study emphasises on the rates of infection
by ethnic group. The study was conducted in 43
squatter villages located within a 25 km radius of the
Kuala Lumpur city centre.
The population in the sampling frame was 14,367.
The ovcrall response rate was 69%. Using lie
estimates of the ethnic status of the communities,
the study areas were divided into three groups
based on the proportion of Chinese ethnic group.
In a total of 9863 stool samples collected, 5,746
(58%) had at least one type of helminth present. The
infection rates by age w~erehighest in the 11-15years
old age groups (74%) and lowest in the 0-5 (47%).
However, we found a marked variation in infection
rates when the ethnic status of t h e pop~lations
in the
villages were controlled for. Infection rates by
individual helminth species is compared among
different age groups and ethnic status. There was
approximately a SOYOdecrease in infection rates in
each of the groups as the estimated rate of Chinese
ethnic status increased in the community. The
results were statistically significant by Chi square
(p<0.01). The overall infection rate of 58% in this
survey is higher than the estimate of 40% for
Malaysia. This is not unexpected, considering the
s~udypopulation. In spite of development, the rate
of soil transmitted helminthiasis did not show much
change in squatter populations of Malaysia over the
last 10 years.
Intensive health education, cleaner enviornment
and deworming programmes may bring a change in
the future trends of soil transmitted helminthiasis.
Ethnicity must not be forgotten while planning for
control programmes.
Efficacy of three pyrethreids against
Leptotrombidium
fletchri
(acari:
trombiculidae) infected and noninfected with
scrub typhus.
Ho TM and Salleh Ismail
JMed Entotno1 1991; 28: 776-779
Toxicities of three pyrethroids, d-phenothrin,
decamethrin, and permethrin, were evaluated in the
laboratory against Leptotrombidiunz jletcheri
( Womcrslcy & I Icaslip). Thc Susccptibiliticsbctwcen
populations of the species infected and noninfected
with scrub typhus were investigated. Bioassays for
the pyrethroids were conducted by the pasteur
pippette technique. Results were analysed by t-test,
one-way analysis of variance and log-probit
regression. The three pesticides exhibited different
toxicities to the chiggers. There were no significant
differences between susceptibilities of the infected
and noninfected population. Log-probit regression
lines indicated that the species was most sensitive to
increasing concentrations of d-phenothrin and least
sensitive to permethrin. The results show that the
three pesticides are potiential candidates for chemical
control of L.&tchcri. It may be possible in the future
to conduct sirnilarbioassays only with the noninfected
population, thus reducing risk of infectionto workers
conducting the bioassays. Similarly, there may not
be a need to separate field-collected chiggers into
the two population before performing the bioassays.
A field trial on the comparative effectiveness of
malathion and resigen by ULV application on
Aedes aegypti.
V. Indra and P. Pissanuvas
Southeast Asian J Trop ,Wed Pub Hlth 1991;
22:102-107
Field trials were conducted in two residential areas
of Petaling Jaya Municipality to determine the
comparative effectiveness of the currently used
insecticide malathion 96% TG and Resigen, a new
insecticide on Aedes neapti - vector of dengue.
The Leco HD ULV machine was used throughout
the trials. For the malathion the flow rate was 90 ml/
minute at a vehicle speed of 8kph and for Kesigen
the flow rate was 200 ml/minute at the same vehicle
speed. Adult Ae. aegypti were placed in 1' x 1' x 1'
cages of fine mesh cloth and larvae were placed in
plastic cups measuring 8cm in diameter and 5 cm in
height, containing 200ml of water. Three cages were
placed in each of the five houses; one in the porch,
one in the living room and one in the kitchen. The
average distance of the cages from the road edge
were 7,13and 18meters respectively. ULV operations
started between 6.00 pm and 6.30 pm. The test cages
and cups were removed after a half hour period of
exposure to insecticide and observed for mortality
after 24 hol~rs.Ovitraps were placed in the ho~ises
after the cages had been removed and checked
weekly for breeding. Malathion was more effective
giving higher mortality rates when compared with
Resigen. The mortality rate of adult Ae. ae~ypti
outdoor was higher than in the living room and
kitchen. Both insecticides did not show promising
larvicidal effects. The ovitraps whcn checked one
week after ULV operations showed that 50 % of the
traps were positive. From the above results it is
evident that for successful control during a dengue
epidemic, ground ULV application alone is
insufficient. Adult mosquitoes resting in corners and
under beds would not be killed by ULV application.
Thus ground ULV application combined with thermal
fogging, larviciding, source reduction and
environmental sanitation should be carried out
simiiltaneniisly
determination of growth characteristics. The final
fermented product was harvested, purified and its
potency was determined by bioassays with
mosquitoes. Five types of wastes, viz grated coconut
waste, soyabean waste, palm oil effluent, fishmeal
(remains of dried anchovy) and rice bran were
studied. In a standard nutrient broth and soya bean
waste, IMR-BT-8 took about 37 hours to mature. In
the grated coconut waste, fishmeal and rice bran,
the bacteria took 28 11, 26 h a11d 126 11 ~espectively
to mature. The endotoxin was harvested from the
standard nutrient broth at 55 h and at 50 h from
soyabean, grated coconut waste and fishmeal. The
endotoxin could only be harvested 150 h after
inoculation from rice bran medium. However, no
bacterial growth was detected in palm oil effluent.
The progress of sporulation as observed under
microscope showed that the endotoxin was
synthesized between 8-24 h in fermenting standard,
soya bean, coconut waste and fishmeal. The toxin
was only synthesized 26 h after inoculation in rice
bran. Variations in the pH of the fermenting media
were also noted. Depending on the media used, the
endotoxin was harvested at a pH range of 5.5-8.5.In
terms of endotoxin and biomass production,fishrneal
appeared to be a suitable medium for the mass scale
production of IMR-BT-8.
Evaluation of pre - and post - bronchoscopic
sputa, bronchial washings and bronchial
brushings in the diagnosis of lung cancer.
Fermentation of a Malaysian bacillus
thurirgiensis serotypeH-14 isolate,a mosquito
microbial control agent utilizing local wastes.
Lee HL and Seleena P.
Southeast Asian J Trop Med Pub Hlth 1791;
22:108-112
Bacillus thut-ingiensis serotype H-14 is a highly
promising microbial control agent of mosquitoes
and blackfly. Its specificity, biodegradibility and
larval toxicity have enhanced its widespread use in
vector control. Since one of the pre-requisites for
mass scale application of B thuringiensisH-14 is the
production of large quantities of this agent preferably
utilizing local wastes at low cost, this present study
was conducted to investigate the growth kinetic
pattern of a Malaysian isolate of B thuringiensis
H-14 (desigliated as IMR-BT-8) in various waste
media and to identify those wastes suitable for
production. Fermentation studies were conducted
in 1-liter shake-flasks containing the media and
agitated by a rotary shaker at 30 C. At periodic
intervals, 2-ml samples were withdrawn for the
Pillay D, Aziah A Mahyuddin and Intan Ahmad. n c
Family Physician 1991; 325-27
86 patients suspected of primary lung cancer, referred
to the National Tuberculosis Centre for fibreoptic
bronchoscopy, were selected for this study to
determine the relative value of the various types of
respiratory cytology material in establishing a
diagnosis and to identify the factors which influence
the exfoliation of malignant cells. Prebronchoscopic
sputa and bronchial bnishings were fni~ndto yield
diagnostic cells most frequently. Hilar tumours
arising from large bronchi, squamous and small cell
anaplastic types were found to exfoliate cells most
frequently. The study highlights the effectiveness of
cytologic methods in the diagnosis of bronchogenic
carcinoma. Cytologic evaluation may be the only
method of confirming the diagnosis whcn biopsy is
contraindicated. In the investigation of a patient
thought to have lung carcinoma, good "deep coughup" sputa shuld be first examined to prove a
diagnosis before subjecting him or her to procedure
like bronchoscopy.
Production of monoclonal antibodies against
Naja naja kaouthia venom.
two monoclonal antibodies (CV2D8 and CVlE9)
were produced against the monocellate venom.
Noor Kam, Ambu S and Mak J W Trop Biomedicine
1991: 8:117-122
Both monoclonal antibodies (IgG1 subclasses)
Treatment of
venom poisoning
On
the correct identification of the snake. The
development of more specific and sensitive assays
for antigen (venom) detection can be achieved by
using specific monoclonal antibodies. In this study
reacted with the 73 Kd high molecular weight
traction of the cobra venom antigen. Cross-reactivity
studies with
venom antigens showed that
these monoclonal are specific against the monocellate
cobra venom (Naja naja kaouthia) and
be
useful as diagnostic reagents.
Immune responses to Mycobacterium leprae in
healthy humans and leprosy patients
Haruinder Kaur Gill
It is estimated that there are between 10 to 12 million
cases of leprosy in the world today. The early
pl-umist: uT lcprusy curllrul through prompt case
detection and treatment has not been realized.
There is a need, therefore, to explore both
improvements in the existing control programme
and in alternative strategies for control. Vaccination
is one alternative strategy which could be employed
in the control of leprosy.
The examination of the proliferation (an in vitro
measure of cell mediated immunity) of lymphocytes,
from the vaccinees, in response to added antigens
such as MLSA and PPD revealed a similar picture. A
marked increase in the proliferative responses to
MLSA was observed in the groups which received
the two highest doses of vaccine three months after
vaccination and persisted for the study period of a
year.
The aim of this study was to examine the immune
responses, both humoral and cell-mediated to
vaccination with a heat killed, armadillo-derived AL
lepmevaccine in healthy volunteers living in a nonendemic contry.In addition,the study also examined
the responses to M. leprae in leprosy patients for
comparative purposes.
The study of this cell-mediated response to the
vaccination was further extended by establishing T
cell clones from 5 volunteers who had received the
two highest doses of vaccine. The technique of
cloning T cells provides a means of amassing
sufficient numbers of a particular T cell with a
uniquc spccificity for study. A total of 42 T cell
clones were raised and 11of these clones responded
to M. leprae and not to PPD or BCG. Five of these
M. leprae-specific clones responded to an 18Kd M.
leprae protein antigen. All of these clones were of
the CD4+ phenotype and a few of them were shown
to produce interleukin-2 and gamma-interferonand
to be cytotoxic for macophages in the presence of
M, leprae.
The effect of vaccination with a killed, armadillodzrived M. Ieprzw vauciilt: was studied in healthy,
BCG-vaccinated human volunteers aged between
23 and 29 years of age. The volunteers were
randomly assigned to 4 groups and given graded
doses of the vaccine ie. 1.5x lo7, 5 x lo7, 1.5x loX,
5 x lo8 bacilli. A non vaccinated control group was
also included in the study.
The cell mediated immune response to the vaccine
was measured i ~ zuiuo by the skin test. Skin test
responses to a soluble M Ieprneantigen (MLSA) and
to PPD (Mantoux test; PPD is a protein derived from
the culture filtrate of M. tuberculosis) measured
before and 3 months after vaccination showed that
the groups which recieved the three highest doses
of vaccine showed a marked increase in the responses
to MLSA. There was little change in their responses
toPPD, whichwere high before 2nd aft~rvgccinstion.
This was an expected finding as the volunteers had
. been vaccinated with BCG.
The humoral responses to vaccination were also
studied in these volunteers. While the two groups
which recieved the two lower doses of vaccine did
not develop any discernible levels of antibody up to
1 year after vaccination, the two groups which
received the higher doses of vaccine showed a
marked rise in antibody titre six months after
vaccination.
Immune responses to M. leprae were also studied
in leprosy patients. Examination of the
lymphnpmliferative responses of long-treated (>20
years) lepromatous leprosy patients (TLL) and
untreated lepromatous leprosy patients CULL)
revealed that a few TLL patients were able to
respond to M. leprae. Thirteen T cell clones were
raised from 2 of these patients using a standard
technique and compared with 5 T cell clones raised
from 2 tuberculoid leprosy ('IT)patients. Seven of
these clones were studied further and it was found
that while all the TT clones responded only to M.
leprae, 3 of the TLL clones responded specifically to
M leprae and one of these clones exhibited a broad
cross-reactivity to other mycobacteria. All these
clones were of the CD4+ phenotype.
This study concluded that the heat killed, armadilloderived M. leprae vaccine was ready for trial in an
endemic country where its efficacywill be monitored
by its ability to protect against leprosy. In addition,
this study and many others like it represent the first
phase of the application of molecular biology to the
elucidation of the cellular immunology of leprosy.
IMR Young Scientist and IMR Medical Technologist
Awards
In the selection of the winners, the IMR Selection
Committee reviewed all published scientific papers
submitted and considered the scientific excellence,
utilizability of the research findings as well as
contribution to new knowledge of the publications.
An award presenting ceremony for the winners of
the IMR Young Scientist and IMR Medical
Technologist A w a r d was officiated hy the nirectnr
General of Health Malaysia,Tan Sri Dr. Abdullah bin
Abdul Rahman on 9th August 1991. This is the first
time such awards are being given by the Institute.
'l'he creation of these awards 1s to show recognition
of the importmt roles played by the laboratory staff
and to motivate young scientists and laboratory
technologiststo greater efforts in research leading to
the development of better diagnostic services for
health care and more efficient interventionmeasures
for control programmes.
The winners of the IMR Young Scientist Award was
Mr. Lee Han Lim while the runners-up were Dr.
Chiang Geok Lian and Dr. Harvinder Kaur Gill. For
the IMR Medical Technologist Award, the winner
was Ms Eng Hah Tee a n d t h e runners-up were Ms.
Tan Geok Wah and Mr. Abdul Razak bin Mustaffa.
Contributed by Ng Kok Nan
Winuers of the I M Ibulzg Sciel~tistand
Medical Tech~tologistAwards
27
The Sixth ASIAN Congress of Nutrition 1991
Asian Nutrition Congresses have been held regularly
at four-yearly intervals, beginning with the First
Congress in New Delhi in 1971 and subsequently in
Manila, Jakarta, Bangkok and Osaka.
interesting scientific programme that reflected on
the theme of the Congress- "Nutritional Challenges
and Frontiers Towards Year 2000".
Thc Congrcss was attcnded by about 700 participants
At the 1987 Congress in Osaka, Japan, the Nutrition
Society of Malaysia (NSM) boldly undertook the
challenge to host the Sixth Asian Congress of
Nutrition. This event was held at the Putra World
Trade and Convention Centre, Kuala Lumpur, 16-19
September, 1991. Being a relatively young society,
having only been established in 1985,and with only
about 300 members and a meagre bank account at
the time, the task ahead for the NSM was indeed
formidable.However, thanks to its core of dedicated
from 45 countries, and the latter figure was probably
a record. The Organisers had also provided full or
partial sponsorship for about 50 foreign participants,
and this is believed to be without precedence for an
Asian Nutrition Congress.
members, and the financial assistance and support
holding of four simultaneous syrnposiumllfree
from NSM's co-sponsors, the Organising Committee
was able to overcome most of the obstacles
encountered and put together a balanced and
communicationsessions daily, and this kept members
of the Scientific Committee and the audio-visual
team very busy indeed.
-
The four-day scientific programme consisted of 7
plenary addresses, 120 symposium lectures! 130
free communications and 158 posters. The rich
scope of the scientific programme necessitated the
16 19 SEPTEMBER 1991
K U A L A LUWPUR
Some key nzembers o f t h e Orgntaising Cotnmittee of the 6th
ASIAN Congress of Nutritiotl 1991
28
On the whole, the Congress was a great success,
both in terms of financial management and scientific
quality content. This was reflected in the positive
feedbacks received from overseas participants. The
Proceedings of this Congress is currently available
at the NSM Secretariat, d o The Division of IIuman
Nutrition, Institute for Medical Research, Kuala
L~~Pu'.
The Seventh Asian Congress of Nutrition is scheduled
for September 1995 in Beijing, China,
Cofztribzrtedby Tony K. IV. 7.8
DTCFTAK OI FH PFRrFTAKAN NASTONAT. MAl.AYSlA RFRHAD.
IBU PEJABAT, KUALA LUMPW
Bangunan IMR - 1977
Bangunan IMR - 1901
Institu t Penyelidikan
Perubatan
(Institute for Medical
Research)
Jalan Pahang
50588 Kuala Lumpur
Malaysia