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Gehaltsbestimmung von Hyaluronsäure
Wissenschaft und Technik Originale Arzneimittelwesen · Gesundheitspolitik · Industrie und Gesellschaft Gesetz und Recht Barbara Weber und Joanna Ruppel Zu den Konsequenzen für die Haftung von Arzt, Apotheker und pharmazeutischem Unternehmer Labor L+S AG, Bad Bocklet Dr. Tanja Eisenblätter Korrespondenz: M. Sc. Barbara Weber, Labor L+S AG, Mangelsfeld 4,5,6, 97708 Bad BockletGroßenbrach, Germany; e-mail: barbara.weber@labor-ls.de Hogan Lovells International LLP, Hamburg n ZUSAMMENFASSUNG n ABSTRACT Generika dieser Originalarzneimittel Generika und Biosimilars sind bekannte Kategorien von NachMit gängigen Methoden wie HPLC oder der Carbazol-Methode Conventional methods, such HPLC or the carbazole method sind as identische Kopien des Originalahmerarzneimitteln, die sowohl im Hinblick auf ihre Zulassung als lässt sich der Gehalt von Hyaluronsäure (HA) nur indirekt über are used to determine the content of hyaluronic acid indirectly produktes, und für den GenerikaherauchAbbauprodukte auf ihre Austauschbarkeit aus gutem Grunde unterschiedlichen deren (Monomere und Oligomere) bestimmen. through their degradation products (monomers and oligomers). steller stellt der Herstellungsprozess Deshalb wurde eine neue, einfache undbilden schnellesie turbidimetrinew, hinreisimple and rapid turbidimetric method using bovine Regelungen unterliegen. Indes die Realität Anicht in der Regel of keine Herausforderung sche Methode zur Gehaltsbestimmung vonlassen nativer die Hyaluronserum albumin hyaluronic acid in chend ab, denn beide Kategorien Besonderheiten von for the determination dar. products, Gleichermaßen einfach ist es, säure in pharmazeutischen und medizinischen Produkten in pharmaceutical and medical like liquid and gel-like Non-Biological Complex Drugs Ziel (imder Folgenden: außer based on Dorfman nachzuweisen, sich OriginalarzAnlehnung an Dorfman [15] entwickelt. Arbeit war NBCD) die formulations [15] wasdass developed. The obGenerikum Betracht.von Beidiversen diesenEinflussfaktoren Arzneimitteln mit komplexen chemischen Austestung und Grenzen der jective of this work wasneimittel to test theund factors influencingqualitativ the unddetermine quantitativ entsprechen, Methode sowie ist die die Ermittlung des Hyaluronsäure-Gehalts turbidimetric method and the content of native also Strukturen Herstellung eines identischeninNachahmerpräfesten, flüssigen halbfesten Rezepturen. Die Problem Methode erwies acid ininsolid, bioäquivalent semi-solid and liquid The sind.formulations. Die Tatsache, parates nur und bedingt möglich. Dieses wurde hyaluronic von der EMA sich im Konzentrationsbereich von 0,1 bis 0,7 mg/ml als linear method revealed to be linear from 0.1 mg/ml to 0.7 mg/ml dass die Reproduzierbarkeit des Hereinem „Reflection paperInkubationszeit on non-clinical studies for generic nanop(mit R ≥ 0,995). Als optimale mit bovinem (R ≥ 0.995). The incubation time with bovineebenso serum albumin stellungsprozesses unproblearticle iron (BSA) medicinal applications“ Serumalbumin wurdenproduct 10 min ermittelt. Währendfür diegenerische was set Eisenpräto 10 min. While the use of hyaluronic acid with matisch wie die Identifizierungsmög1) Verwendung Hyaluronsäure mit unterschiedlichen Moledifferent weights showed a little Im molecular Folparate mitvon Nanopartikel-Charakteristik jüngst erkannt. lichkeit ist, only bildet die effect Basis on fürtheden kularmassen eine geringe Auswirkung auf die turbidimetrische turbidimetric method, the method highly depends on pH: too Zulassungsprozess von Generika genden soll erläutert werden, worum es sich bei den NBCD handelt, Methode hatte, zeigte sich die Methode stark pH-abhängig: zu acid or basic pH values of the hyaluronic acid samples had a 4) mit „small wie diese rechtlich einzuordnen sind und welche haftungsrechtsaure oder basische pH-Werte der Hyaluronsäure-Proben hatnegative impact on the reaction. Themolecules“. pH value of 5.3 revealed to Ein Beispiel für turbidimetric ein klassisches ten einen negativen Einfluss die und Reaktion. Als optimaler pH- Abgabe be optimal method. The lichen Folgen sich fürauf Arzt Apotheker bei der vonfor the turbidimetric Molekül mit einer einfachen Wert wurde 5,3 ermittelt. Die turbidimetrische Methode war method was robust against the influence of slight variationsMolelike NBCD-Similars ergeben. külstruktur ist manufacturers), das Aspirin (Acetylsagegenüber der Veränderung von Reaktionsbedingungen, wie various reagents (different batches and differC9H8Otime verschiedenen Reagenzien (unterschiedlichen Chargen und ent BSA concentrations,licylsäure)-Molekül, temperatures and standing of ei4, mit Hersteller),1 .unterschiedlichen Reagenzien-Konzentrationen, analytical solutions. So the turbidimetric method represents an Struktur von chemisch hergestellten ner Größe von 180 Dalton und insZ um B e g r i f f d e r Temperaturen und der Lagerdauer von analytischen Lösungen, alternative2) to conventional methods for the quantification of Die Oripatentfreien Arzneimitteln. gesamt 21 Atomen. Sowohl KompleNo n - B i o l o g i c a l C o m p l e x robust. Somit stellt die turbidimetrische Methode eine Alterhyaluronicauf acideiner in liquidxität and als gel-like ginalarzneimittel basieren auchproducts. räumliche Struktur dieDr u g sMethoden Simi larfür s die Quantifizierung native zu gängigen von Molekülstruktur mit gut ses Moleküls sind einfach und defieinfachen ( N Bin CD - S i m i lund a r s)gelartigen Produkten dar. Hyaluronsäure flüssigen definierten physiko-chemischen Ei- niert. NBCD-Similars bezeichnen eine Ka- genschaften, sind also „small mole- 1 . E i n l e i t u n g tegorie von Nachahmerpräparaten, die sich in das herkömmliche Schema von Biosimilars und Generika nicht einfügen lässt. Sie stellen eine neue Form von ähnlichen Arznneimitteln K E Y Wdar, O Rdie D keine S Generika, aber auch keine Biosimilars sind: . Hyaluronsäure . Gehaltsbestimmung 1.1 Generika . Turbidimetrische MeHerkömmliche Generika sind Nachthode mit BSA ahmerpräparate kleinmolekularer . Analytische Methode 1) EMA/CHMP/SWP/100094/2011. Pharm. Ind. 78, Nr. 5, 750–757 (2016) Pharm. Ind. 74, Nr. 2, 266–276 (2012) Pharm. 78, Nr. 5, 750–757 © ECVInd. Cantor Verlag,• (2016) Aulendorf (Germany) · Editio Weber undVerlag, RuppelAulendorf TBSA (Germany) © ECV • Editio Cantor 750 und defiBiosimilars cules“3), die mit bekannten Hyaluronsäure (HA) ist1.2ein hochmolekulares MucoAnders ist dies bei biologisch pronierten Methoden relativ einfach und polysaccharid, das aus b-D-Glucuronsäure und N-Aceduzierten Stoffen, den Biologicals identisch hergestellt werden können. tyl-b-D-glucosamin besteht [1]. Das Molekulargewicht und Kopien,der denalternierenBiosimilars. der HA kann abhängig vonihren der Anzahl 5 Als Biosimilars bezeichnet bio2) Rehmann, AMG, 3. Aufl., Dalton denVorbem. Disaccharideinheiten zwischen 10 und 106man 4. Abtechnologisch hergestellte Nachschnitt, Rn. 37. Laut Richtlinie 2001/83/ variieren [2, 3].EGIm menschlichen Körper liegt HA als Salz5) „Arzneimittel, die die gleiche qualitative und ahmerpräparate von in Form von Natriumhyaluronat vor und wirdBiologicals sowohl in , quantitative Zusammensetzung von WirkZellen, alswie auch in den Zellzwischenräumen prostoffen und die gleiche den Darreichungsform EMA/CHMP/SWP/100094/2011, Introducdas Referenzarzneimittel aufweisen undkommt deren in4) der duziert. Sie oberen Hautschicht, der Epition. Bioäquivalenz mit dem Referenzarzneimittel dermis, und in der darunter liegenden Dermis, gefolgt durch geeignete Bioverfügbarkeitsstudien 5) Nach dem Verständnis der EMA. Man der von Nabelschnur dem nachgewiesen wurden“.von Muskeln und Skelett, spricht auch Biologika oderund Biopharma3) Moleküle gelten als „klein“, wenn siedes nichtAugeszeutika. Im Folgenden der Glaskörper vor [4]. Ebenso wird wirddurchgängig HA in den mehr als 500 Atome haben. Begriff Biologicals Zellen der inneren Gelenkkapsel imverwendet. Knie gebildet, ge- 11 Pharm. Ind. 78, Nr. 5, 750–757 (2016) Eisenblätter · Non-Biological Complex Drugs Similars © ECV • Editio Cantor Weber und Verlag, Ruppel Aulendorf • TBSA (Germany) Zur Verwendung mit freundlicher Genehmigung des Verlages / For use with permission of the publisher Turbidimetrische Methode (TBSA) Generikum, Biosimilar, zur Gehaltsbestimmung von NBCD-Similar – eine neue Kategorie Hyaluronsäure von Nachahmerpräparaten Arzneimittelwesen · Gesundheitspolitik · Industrie und Gesellschaft Gesetz und Recht Pharm. Ind. 74, Nr. 2, 266–276 (2012) Pharm. 78, Cantor Nr. 5, 750–757 (2016) (Germany) © ECV ·Ind. Editio Verlag, Aulendorf © ECV • Editio Verlag,• TBSA Aulendorf (Germany) WeberCantor und Ruppel 2 7511 Pharm. Complex Ind. 78, Nr. 5, 750–757 Eisenblätter · Non-Biological Drugs Similars(2016) • TBSA Weber und Ruppel © ECV • Editio Cantor Verlag, Aulendorf (Germany) Zur Verwendung mit freundlicher Genehmigung des Verlages / For use with permission of the publisher Generikum, Biosimilar, NBCD-Similar – eine neue Kategorie von Nachahmerpräparaten langt durch Diffusion aus der Synovialflüssigkeit in den kubationszeiten, NaCl-Konzentrationen, pH-Werte der Gelenkknorpel und verleiht ihm dadurch Elastizität und Probe und Molekularmassen von HA auf die TBSA-MeStabilität [5]. thode vorgenommen werden. Zusätzlich sollte die RoHyaluronsäure kann von tierischen Produkten, wie bustheit der Methode anhand variierender Standzeiten dem Glaskörper des Rinderauges und Hahnenkämmen von Puffer und Lösungen, unterschiedlicher Chargen gewonnen werden [6]. Da die aus tierischen Produkten und Hersteller von BSA sowie unterschiedliche BSA-Konerhaltene HA Allergien hervorrufen kann, werden seit zentrationen überprüft werden. einigen Jahren biotechnologische Verfahren eingesetzt, bei denen die Substanz durch Mikroorganismen gewon2 . M a t e r i a l un d M e t hode n nen wird, z. B. durch Fermentation von Streptococcus zooepidemicus [4, 7, 9–13]. ZuHA den Konsequenzen für die Haftung von Arzt, Apotheker und pharmazeutischem Unternehmer 2.1 Material hat im Körper eine Vielzahl von Funktionen, wie Die hier verwendete HA (0,07, 0,42, 0,8, 2,1, 3,0 und 4,0 MDa) stammte z. B. Tanja ein hohes Wasserbindungsvermögen. Eines der be- von HTL Biotechnology (Javené, Frankreich). NaH PO ·2H O, Na HPO , Dr. Eisenblätter 2 4 2 2 4 kanntesten Beispiele hierfür ist der Glaskörper des Auges, KH2PO4, CH3COONa·3H2O, P2O5, CH3COOH, NaCl, HCl, NaOH und Hogan Lovells International LLP, Hamburg bei dem 1–2 % HA 98 % Wasser binden. In wässriger H2SO4 wurden von Fluka (Darmstadt, Deutschland) bezogen. BSA Lösung bildet HA eine gelartige Struktur aus. Die hohen wurde zum einen von der Firma Sigma-Aldrich (Darmstadt, Deutschviskoelastischen Eigenschaften der in Wasser gelösten HA land) und zum anderen von der Firma Amresco (Fountain Parkway, Generika dieser Originalarzneimittel Generikavor und Biosimilars sind bekannte Kategorien von USA)Nacherworben. beruhen allem auf der Ausbildung von HA-Ketten. sind identische Kopien des Originalahmerarzneimitteln, die sowohl im Hinblick auf ihre Zulassung als Bereits eine 1 %-ige Lösung besitzt eine gelartige Konsisund für den Generikaher2.2 Herstellung von Stammlösungen auchDiese auf ihre Austauschbarkeit auszugutem tenz. Eigenschaften machen HA einem Grunde wertvol- unterschiedlichen produktes, steller stellt derTBSA-Methode Herstellungsprozess Zur Erstellung der Standardgeraden für die und für die len Biopolymer, das zunehmend in pharmazeutischen, Regelungen unterliegen. Indes bilden sie die Realität nicht hinreiin der Regel keine Herausforderung Untersuchung von Produkten wurde für alle Versuche eine HA-Stammkosmetischen undbeide medizinischen Produkten eingesetzt chend ab, denn Kategorien lassen die Besonderheiten von dar. von Gleichermaßen einfach ist bei es, 0,99 mg/ml hergestellt. Lediglich wird, z. B. als Wirkstoff zur Behandlung von Arthrose lösung mit einer Konzentration Non-Biological Complex Drugs (im Folgenden: NBCD)der außer Überprüfung des linearen Kalibrierbereichs wurde eine Konzentranachzuweisen, dass sich Originalarzoder bei der Wundheilung. tion von 1,98 mg/ml verwendet. Dafür und wurdeGenerikum der HA-Rohstoff zuvor 6 h neimittel qualitativ Betracht. Arzneimitteln mit komplexen AufgrundBei derdiesen vielfältigen Einsatzmöglichkeiten steigtchemischen O ) getrocknet und auf einen pHbei 105 °C über Phosphorpentoxid (P 2 5 und quantitativ entsprechen, also Strukturen ist die Herstellung eines identischen Nachahmerpräder Bedarf nach zuverlässigen Methoden zur HA-QuantiWert von 5,3 eingestellt. bioäquivalent sind. Die Tatsache, parates nur bedingt möglich. Dieses fizierung in diversen Formulierungen wie Problem Tabletten,wurde Kap- von der EMA in dass die Reproduzierbarkeit des Herseln und„Reflection Lösungen. Für dieon Quantifizierung HA-Geeinem paper non-clinical des studies for generic nanop2.3 Durchführung der TBSA-Methode stellungsprozesses ebenso unproblehalts gibt es bereits einigeproduct Methoden, die vorwiegend Je 0,5 mlEisenpräder verdünnten Standardlösungen, die aus der Stammlösung article iron medicinal applications“ für auf generische matisch wie die Identifizierungsmögder Bestimmung von Abbauprodukten der HA beruhen. hergestellt wurden, und die Probelösungen wurden mit 0,5 ml 0,02 M parate mit Nanopartikel-Charakteristik jüngst erkannt.1) Im Follichkeit ist, bildet die Basis für den Zu den gängigsten Methoden zählen die Carbazol-Metho- Natriumphosphatpuffer (pH 6,8–7,0, enthält 0,08 M NaCl) gemischt und Zulassungsprozess von Generika genden soll erläutert werden, worum es sich bei den NBCD handelt, BSA (0,2 g) wurde4)in 200,0 ml Acede und die Hochleistungsflüssigkeitschromatographie bei 37 °C im Wasserbad inkubiert. mit „small molecules“. wie diese einzuordnen und welche haftungsrechttatpuffer pH 3,75 gelöst. Nach 5 min Inkubation bei 37 °C wurden 5 ml (HPLC). Beirechtlich beiden Methoden erfolgtsind die GehaltsbestimEin Beispiel ein klassisches Nach 10 für min Inkubationszeit bei lichen Folgen sich für Arzt und Apotheker bei der Abgabe von (2,0 mg/ml) zugegeben. mung nicht an nativer HA sondern an deren Abbaupro- BSA-Lösung Molekül mit einer einfachen Mole37 °C wurde die Absorption bei 600 nm am UV/VIS-Spektralphotometer dukten. NBCD-Similars ergeben. külstruktur ist das Aspirin (Acetylsabestimmt. Während bei der Carbazol-Methode HA von Schwefel- (Varian, Cary 50 Conc, Deutschland) Die Konzentration vonlicylsäure)-Molekül, HA in den Proben (Kapseln, O4, mit Gel, eiC9H8Tabletten, säure zu ihren Monomeren (Uronsäuren) abgebaut wird, Gelenkspritzen) wurde aus derGröße Absorption der Proben gegen die insAbStruktur von chemisch hergestellten ner von 180 Dalton und . Z um B e g r i fder f d eHA r vor der HPLC-Gehaltserfolgt 1die Hydrolyse sorption 2) der Standardlösungen berechnet. Die Kalibriergerade wurde Die Ori- gesamt patentfreien Arzneimitteln. 21 Atomen. Sowohl KompleNo n B i o l o g i c a l C o m p l e xHydrolyseschritt bestimmung enzymatisch. Dieser macht dabei im auf Bereich von 0,1 xität bis 0,7als mg/ml aufgenommen. Als Systemeigginalarzneimittel basieren einer auch räumliche Struktur Dr u g s empfindlich Simi lar s gegenüber Veränderungen nungstest wurde ein Korrelationskoeffizient der Standardgeraden diebeide Methoden von einfachen Molekülstruktur mit gut ses Moleküls sind einfach und defi( N Boder C D -Reaktionsbedingungen. S i m i l a r s) der Matrix Zur Umgehung R ≥ 0,995 festgelegt. Bei den folgenden Versuchen wurde HA mit einer definierten Ei- niert. dieser Problematik wurde eine alternative Methode physiko-chemischen zur Molekularmasse von 0,8 MDa (3.1–3.3) und 3,0 MDa (3.4, 3.6) verwendet. NBCD-Similars bezeichnen eine Kagenschaften, sind also „small moleGehaltsbestimmung von HA entwickelt, die das3) gesamte, , diesomit mit bekannten und defi1.2 Biosimilars tegoriehydrolysierte, von Nachahmerpräparaten, cules“und nicht Makromolekül erfasst Anders ist dies bei biologisch pronierten Methoden relativ einfach und die sich in das herkömmliche nicht denjenigen Störfaktoren unterliegt, die sich bei 3. Ergebn i s s e u n dStoffen, D i s k u sden s i o nBiologicals duzierten identisch hergestellt werden können. Schema von Biosimilars und Geneden anderen Methoden aus dem Hydrolyseschritt ergeund linearen ihren Kopien, den Biosimilars. rika nicht einfügen lässt. Sie stellen 3.1 Überprüfung des Kalibrierbereichs ben. Als Biosimilars bezeichnet man bioeine neue Form von ähnlichen Arz2) Rehmann, AMG, 3. Aufl., Vorbem. 4. Ab-wurde der Konzentrationsbereich, in dem Nachfolgend Die turbidimetrische Methode mit BSA (TBSA) beruht technologisch hergestellte Nachneimitteln dar, die keine Generika, Rn. Ausbil37. Laut Richtlinie 2001/83/ EG zwischen Absorption und HA-KonzenProportionalität dabei wie von Dorfman [15] beschriebenschnitt, auf der 5) „Arzneimittel, die die gleiche qualitative und , ahmerpräparate von Biologicals aber auch keine Biosimilars sind: trationvon besteht, dung eines nicht löslichen Komplexes von HA mit einem quantitative Zusammensetzung Wirk- ermittelt. Es wurde der Bereich von 0,1 und die gleiche Darreichungsform bis 2,0 mg/ml wie betrachtet. Als Akzeptanzkriterium wurde Protein (Rinderserumalbumin, BSA) der stoffen turbidimetrisch 4) EMA/CHMP/SWP/100094/2011, Introduc1.1 Generika Referenzarzneimittel hierbei aufweisenein und Korrelationskoeffizient deren von R ≥ 0,995 festerfasst wird. Der Komplex entsteht durchdas elektrostatische tion. Bioäquivalenz mit dem Referenzarzneimittel Herkömmliche Generika sind Nachgelegt. Wechselwirkung der langen HA-Ketten durch und geeignete BSA unter Bioverfügbarkeitsstudien 5) Nach dem Verständnis der EMA. Man ahmerpräparate nachgewiesen Abbildung 1 zeigt,spricht dass bei Konzentration größer sauren Bedingungen.kleinmolekularer In dem nachfolgenden Beitrag wurden“. sollaucheiner von Biologika oder Biopharma3) Moleküle gelten als „klein“, wenn siedie nicht zeutika. Im Folgenden wird durchgängig der 0,7 mg/ml Absorptionswerte nicht mehr proportional ten neben der Festlegung des linearen Kalibrierbereichs, 1) EMA/CHMP/SWP/100094/2011. mehr als 500 Atome haben. Begriff Biologicals verwendet. anstiegen. Lediglich im Bereich Untersuchungen zur Auswirkung unterschiedlicher In- zu den Konzentrationen Wissenschaft und Technik Originale Arzneimittelwesen · Gesundheitspolitik · Industrie und Gesellschaft Gesetz und Recht Zu den Konsequenzen für die Haftung von Arzt, Apotheker und pharmazeutischem Unternehmer Abbildung 1: Auftragung der Absorption (A600nm) gegen die HA-Konzentration zur Er- Dr. Tanja Eisenblätter mittlung des linearen Kalibrierbereichs (Quelle: alle Abbildungen von B. Weber, J. Ruppel / Labor L+SLLP, AG).Hamburg Hogan Lovells International Generika dieser Originalarzneimittel Generika und Biosimilars sind bekannte Kategorien von Nachsind identische Kopien des Originalahmerarzneimitteln, die sowohl im Hinblick auf ihre Zulassung als auch auf ihre Austauschbarkeit aus gutem Grunde unterschiedlichen produktes, und für den Generikahersteller stellt der Herstellungsprozess Regelungen unterliegen. Indes bilden sie die Realität nicht hinreiin der Regel keine Herausforderung chend ab, denn beide Kategorien lassen die Besonderheiten von dar. Gleichermaßen einfach ist es, Non-Biological Complex Drugs (im Folgenden: NBCD) außer nachzuweisen, dass sich Originalarzneimittel und Generikum qualitativ Betracht. Bei diesen Arzneimitteln mit komplexen chemischen und quantitativ entsprechen, also Strukturen ist die Herstellung eines identischen Nachahmerpräparates nur bedingt möglich. Dieses Problem wurde von der EMA in bioäquivalent sind. Die Tatsache, dass die Reproduzierbarkeit des Hereinem „Reflection paper on non-clinical studies for generic nanopstellungsprozesses ebenso unproblearticle iron medicinal product applications“ für generische Eisenprämatisch wie die IdentifizierungsmögAbbildung 2: Linearer Kalibrierbereich der TBSA-Methode mit einem Korrelationskoefparate mit Nanopartikel-Charakteristik jüngst erkannt.1) Im Folfizienten von R = 0,997. lichkeit ist, bildet die Basis für den Zulassungsprozess von Generika genden soll erläutert werden, worum es sich bei den NBCD handelt, mit „small molecules“.4) wie diese rechtlich einzuordnen sind und welche haftungsrechtEin Beispiel für ein klassisches lichen Folgen sich für Arzt und Apotheker bei der Abgabe von Molekül mit einer einfachen MoleNBCD-Similars ergeben. 1 . Z um B e g r i f f d e r No n - B i o l o g i c a l C o m p l e x Dr u g s Simi lar s ( N B C D - S i m i l a r s) Struktur von chemisch hergestellten patentfreien Arzneimitteln.2) Die Originalarzneimittel basieren auf einer einfachen Molekülstruktur mit gut definierten physiko-chemischen Eigenschaften, sind also „small molecules“3), die mit bekannten und definierten Methoden relativ einfach und identisch hergestellt werden können. külstruktur ist das Aspirin (Acetylsalicylsäure)-Molekül, C9H8O4, mit einer Größe von 180 Dalton und insgesamt 21 Atomen. Sowohl Komplexität als auch räumliche Struktur dieses Moleküls sind einfach und definiert. NBCD-Similars bezeichnen eine Ka1.2 Biosimilars tegorie von Nachahmerpräparaten, Anders ist dies bei biologisch prodie sich in das herkömmliche duzierten Stoffen, den Biologicals Schema von Biosimilars und Geneund ihren Kopien, den Biosimilars. rika nicht einfügen lässt. Sie stellen Als Biosimilars bezeichnet man bioeine neue Form von ähnlichen Arz- 2) Rehmann, AMG, 3. Aufl., Vorbem. 4. Abtechnologisch hergestellte Nachneimitteln dar, die keine Generika, schnitt, Rn. 37. Laut Richtlinie 2001/83/ EG Abbildung 3: Einfluss der Inkubationszeit auf diedie Absorption unterschiedlichen HA-Konzentrationen von „Arzneimittel, die gleichebei qualitative und ahmerpräparate von Biologicals5), aber auch keine Biosimilars sind: 0,1–0,7 mg/ml. quantitative Zusammensetzung von Wirkstoffen und die gleiche Darreichungsform wie 4) EMA/CHMP/SWP/100094/2011, Introduc1.1 Generika das Referenzarzneimittel aufweisen und deren von 0,1–0,7 mg/ml kann die geforderte Bedingung für den methodik ausreichenden Genauigkeit kann für weitere tion. Bioäquivalenz mit dem Referenzarzneimittel Herkömmliche Generika sind NachKorrelationskoeffizient von R ≥ 0,995 eingehalten werden Versuche Linearität im Bereich 0,1–0,7 mg/ml angegeeignete Bioverfügbarkeitsstudien 5) Nach dem von Verständnis der EMA. Man ahmerpräparate kleinmolekularer durch nachgewiesen wurden“.nommen werden. (Abb. 2). spricht auch von Biologika oder Biopharmagelten als „klein“, wenn sie nicht zeutika. Im Folgenden wird durchgängig der Die Kalibriergerade (Abb. 2) weist einen3) Moleküle Korrelations1) EMA/CHMP/SWP/100094/2011. mehr als 500 Atome haben. Begriff Biologicals verwendet. koeffizienten von R = 0,997 auf. Mit einer für die VersuchsPharm. Ind. 74, Nr. 2, 266–276 (2012) Pharm. 78, Nr. 5, 750–757 © ECVInd. Cantor Verlag, (2016) Aulendorf (Germany) · Editio • TBSA Weber undVerlag, RuppelAulendorf © ECV • Editio Cantor (Germany) 752 31 Pharm. Ind. 78, Nr.Drugs 5, 750–757 (2016) Eisenblätter · Non-Biological Complex Similars © ECV • Editio Cantor Weber und Verlag, Ruppel Aulendorf • TBSA (Germany) Zur Verwendung mit freundlicher Genehmigung des Verlages / For use with permission of the publisher Generikum, Biosimilar, NBCD-Similar – eine neue Kategorie von Nachahmerpräparaten Arzneimittelwesen · Gesundheitspolitik · Industrie und Gesellschaft Gesetz und Recht den sieben Kalibriergeraden mit HA-Konzentrationen im Bereich von 0,1–0,7 mg/ml bei unterschiedlichen Salzkonzentrationen aufgenommen. Die einzelnen Kalibrierpunkte mit Salzkonzentrationen von 0,5–5,0 mol/L wurden in Abb. 4 dargestellt. Die Erhöhung der NaCl-Konzentration hatte einen vernachlässigbaren Einfluss auf die TBSA-Methode. Unter der Annahme einer Interaktion der positiv geladenen Gruppen des BSAs mit den NaCl-Ionen wurde die Bildung des Komplexes von HA und BSA kaum beeinflusst [14]. Zur Untersuchung des Einflusses der Inkubationszeit nach Zugabe von BSA-Lösung auf die Absorption, wurden Inkubationszeiten von 5–240 min gewählt und die Absorption von vier Kalibrierlösungen (0,1–0,7 mg/ml) gemessen. Die Absorption stieg aufgrund der Bildung des Komplexes aus HA und BSA bei Inkubationszeiten zwischen 5–20 min auf ein Maximum an (Abb. 3). einer Inkubationszeitfür vondie 30 Haftung min verringerten sichApotheker und pharmazeutischem Unternehmer ZuAbden Konsequenzen von Arzt, die gemessenen Absorptionswerte, auf ein von der HA- 3.4 Einfluss unterschiedlicher pH-Werte der Konzentration unabhängiges Minimum bei einer Inku- Probe Dr. Tanja Eisenblätter bationszeit von 240 min. Der vorgegebene Korrelations- Um den Effekt unterschiedlicher pH-Werte der Probe auf Hogan Lovells International LLP, Hamburg koeffizient von R ≥ 0,995 konnte ab einer Inkubationszeit die TBSA-Methode zu testen, wurde der HA-Standard bei unterschiedlichen pH-Werten untersucht. Dazu wurde von 20 min nicht mehr erreicht werden (Tab. 1). Auf Grundlage dieser experimentellen Ergebnisse ein HA-Standard in 0,3 M Phosphatpuffer gelöst und Generika dieser Originalarzneimittel Generika und Biosimilars sind bekannte Kategorien von Nachwurde eine geeignete Inkubationszeit von 10 (R = 0,998) auf die pH-Werte 2 und 4 mit 1 M H2SO4 und 6, 8 und sind identische Kopien des Originalahmerarzneimitteln, die sowohl im Hinblick auf ihre Zulassung als bzw. 15 min (R = 0,997) ermittelt. Die Inkubationszeit 10 mit 50–52 % (w/v) NaOH eingestellt. Fünf Kalibrierproduktes, und für den Generikaherauch auf ihre Austauschbarkeit aus gutem Grunde unterschiedlichen geraden im Konzentrationsbereich von 0,1 bis 0,7 mg/ml wurde daraufhin, aufgrund der kürzeren Versuchsdauer, steller stellt der Herstellungsprozess wurden aufgenommen. auf 10 min festgesetzt. Regelungen unterliegen. Indes bilden sie die Realität nicht hinreiin der Regel keine Herausforderung Abbildung dass der pH-Wert einen Einfluss auf chend ab, denn beide Kategorien lassen die Besonderheiten von 5 zeigt,dar. Gleichermaßen einfach ist es, 3.3 Effekte unterschiedlicher Natriumchloriddie Genauigkeit der HA-Quantifizierung mittels TBSANon-Biological Complex Drugs (im Folgenden: NBCD) außer nachzuweisen, dass sich OriginalarzKonzentrationen Methode hat. Es wurde erwartet, dass bei niedrigen pHneimittel und Generikum qualitativ Betracht. Bei diesen Arzneimitteln mit komplexen chemischen Um den Einfluss verschiedener Salzkonzentrationen im Werten die Carboxylgruppen der Glucuronsäure in HAund quantitativ entsprechen, also Strukturen ist die Herstellung eines identischen NachahmerpräProdukt auf die TBSA-Methode zu überprüfen, wurde die Molekülen nicht mehr negativ geladen vorliegen und sind. Die Tatsache, parates nur bedingt möglich.(NaCl) DiesesimProblem wurde von derKomplexbildung EMA in bioäquivalent Natriumchlorid-Konzentration Natriumphoskeine zu Stande kommt. Jedoch konnte dass die Reproduzierbarkeit des Herphatpuffer von 0,5 bis 5,0 mol/L variiert. Insgesamt offenbar noch bei allen untersuchten pH-Werten ein einem „Reflection paper on non-clinical studieswurfor generic nanopstellungsprozesses ebenso unproblearticle iron medicinal product applications“ für generische Eisenprä- matisch wie die Identifizierungsmögn Tab emit lle Nanopartikel-Charakteristik 1 parate jüngst erkannt.1) Im Follichkeit ist, bildet die Basis für den Zulassungsprozess vonvonGenerika genden soll erläutert werden, worum es sich bei den NBCD handelt, Übersicht über die Korrelationskoeffizienten (R) der Kalibriergeraden bei Inkubationszeiten 4) mit „small molecules“. wie diese welche J.haftungsrecht5–240 minrechtlich (Quelle:einzuordnen alle Tabellensind vonund B. Weber, Ruppel / Labor L+S AG). Ein Beispiel für ein klassisches lichen Folgen sich für Arzt und Apotheker bei der Abgabe von Molekül mit60 einer einfachen MoleInkubationszeit [min] 10 15 20 30 40 50 120 240 NBCD-Similars ergeben.5 külstruktur ist das Aspirin (AcetylsaR 1,000 0,998 0,997 0,994 0,994 0,992 0,992 0,961 0,885 0,786 licylsäure)-Molekül, C9H8O4, mit eiStruktur von chemisch hergestellten ner Größe von 180 Dalton und ins1 . Z um B e g r i f f d e r patentfreien Arzneimitteln.2) Die Ori- gesamt 21 Atomen. Sowohl KompleNo n - B i o l o g i c a l C o m p l e x ginalarzneimittel basieren auf einer xität als auch räumliche Struktur dieDr u g s Simi lar s einfachen Molekülstruktur mit gut ses Moleküls sind einfach und defi( N B C D - S i m i l a r s) definierten physiko-chemischen Ei- niert. NBCD-Similars bezeichnen eine Ka- genschaften, sind also „small mole1.2 Biosimilars tegorie von Nachahmerpräparaten, cules“3), die mit bekannten und defidie sich in das herkömmliche nierten Methoden relativ einfach und Anders ist dies bei biologisch proSchema von Biosimilars und Gene- identisch hergestellt werden können. duzierten Stoffen, den Biologicals und ihren Kopien, den Biosimilars. rika nicht einfügen lässt. Sie stellen Als Biosimilars bezeichnet man bioeine neue Form von ähnlichen Arz- 2) Rehmann, AMG, 3. Aufl., Vorbem. 4. Abtechnologisch hergestellte Nachneimitteln dar, die keine Generika, schnitt, Rn. 37. Laut Richtlinie 2001/83/ EG „Arzneimittel, die die gleiche qualitative und ahmerpräparate von Biologicals5), aber auch keine Biosimilars sind: 1.1 Generika Herkömmliche Generika sind Nachahmerpräparate kleinmolekularer 1) EMA/CHMP/SWP/100094/2011. 4) EMA/CHMP/SWP/100094/2011, Introduction. 5) Nach dem Verständnis der EMA. Man spricht auch von Biologika oder Biopharmazeutika. Im Folgenden wird durchgängig der Begriff Biologicals verwendet. Abbildung 4: Kalibrierpunkte wurden für jede NaCl-Konzentration im Bereich von 0,5-5,0 mol/L dargestellt. Pharm. Ind. 74, Nr. 2, 266–276 (2012) Pharm. 78,Cantor Nr. 5, 750–757 (2016) (Germany) © ECV ·Ind. Editio Verlag, Aulendorf © ECV • Editio Verlag,• TBSA Aulendorf (Germany) WeberCantor und Ruppel 4 quantitative Zusammensetzung von Wirkstoffen und die gleiche Darreichungsform wie das Referenzarzneimittel aufweisen und deren Bioäquivalenz mit dem Referenzarzneimittel durch geeignete Bioverfügbarkeitsstudien nachgewiesen wurden“. 3) Moleküle gelten als „klein“, wenn sie nicht mehr als 500 Atome haben. 7531 Pharm. Complex Ind. 78, Nr. 5, 750–757 Eisenblätter · Non-Biological Drugs Similars(2016) • TBSA (Germany) Weber und Ruppel © ECV • Editio Cantor Verlag, Aulendorf Zur Verwendung mit freundlicher Genehmigung des Verlages / For use with permission of the publisher Generikum, Biosimilar, NBCD-Similar – eine neue Kategorie von Nachahmerpräparaten 3.2 Effekte von unterschiedlichen Inkubationszeiten Wissenschaft und Technik Originale Arzneimittelwesen · Gesundheitspolitik · Industrie und Gesellschaft Gesetz und Recht Zu den Konsequenzen für die Haftung von Arzt, Apotheker und pharmazeutischem Unternehmer Dr. Tanja Eisenblätter Hogan Lovells International LLP, Hamburg Abbildung 5: Auswirkung von unterschiedlichen pH-Werten der HA-Probe auf die TBSA-Methode. Die Korrela- tionskoeffizienten (R) und die Steigungen der Kalibriergeraden (b) wurden gegen die unterschiedlichen pH-Werte aufgetragen. Generika dieser Originalarzneimittel Generika und Biosimilars sind bekannte Kategorien von Nachsind identische Kopien des Originalahmerarzneimitteln, die sowohl im Hinblick auf ihre Zulassung als auch auf ihre Austauschbarkeit aus gutem Grunde unterschiedlichen produktes, und für den Generikahersteller stellt der Herstellungsprozess Regelungen unterliegen. Indes bilden sie die Realität nicht hinreiin der Regel keine Herausforderung chend ab, denn beide Kategorien lassen die Besonderheiten von dar. Gleichermaßen einfach ist es, Non-Biological Complex Drugs (im Folgenden: NBCD) außer nachzuweisen, dass sich Originalarzneimittel und Generikum qualitativ Betracht. Bei diesen Arzneimitteln mit komplexen chemischen und quantitativ entsprechen, also Strukturen ist die Herstellung eines identischen Nachahmerpräparates nur bedingt möglich. Dieses Problem wurde von der EMA in bioäquivalent sind. Die Tatsache, dass die Reproduzierbarkeit des Hereinem „Reflection paper on non-clinical studies for generic nanopstellungsprozesses ebenso unproblearticle iron medicinal product applications“ für generische Eisenprä- matisch wie die Identifizierungsmögparate mit Nanopartikel-Charakteristik jüngst erkannt.1) Im Follichkeit ist, bildet die Basis für den Zulassungsprozess von Generika genden soll erläutert werden, worum es sich bei den NBCD handelt, mit „small molecules“.4) wie diese rechtlich einzuordnen sind und welche haftungsrechtEinTBSA-Methode. Beispiel für Die ein klassisches Abbildung 6: Auswirkung des HA-Molekulargewichts die HA von Quantifizierung mittels lichen Folgen sich für Arzt und Apotheker bei derauf Abgabe Korrelationskoeffizienten und die Steigungen der Kalibriergeraden wurden gegen die Molekularmassen HA Molekül mit einervon einfachen MoleNBCD-Similars ergeben. aufgetragen. külstruktur ist das Aspirin (Acetylsalicylsäure)-Molekül, C9H8O4, mit eiStruktur von chemisch hergestellten ner Größe von 180 und ins. Z um B eHA g r und i f f dBSA e r ausgebildet werden. Als zeigt hingegen Komplex1zwischen eine geringere Steigung derDalton Kalibrierfunk2) Die Oripatentfreien Arzneimitteln. gesamt 21 Atomen. Sowohl No n - B i ozwischen l o g i c a l einer C o m pmöglichst lex Kompromiss hohen Steigung tion. Um diesen Effekt zu verdeutlichen wurden inKompleAbb. 7 auf einer der xität alsmit auch räumliche Struktur dieDr u g s Simi s der Kalibriergeraden undlar einem möglichstginalarzneimittel hohen Korre- basieren die Kalibriergeraden HA unterschiedlichen Moleeinfachen Molekülstruktur mit gut ses Moleküls sind einfach und defi( N B C D - S (R i m≥i l 0,995) a r s) wurde für die TBSA-Me- kulargewichten dargestellt. lationskoeffizienten definierten physiko-chemischen Ei- dass niert.das HA-Molekulargewicht die thode ein pH-Wert von 5,3 beim Phosphatpuffer gewählt. Die Erkenntnis, NBCD-Similars bezeichnen eine Ka- genschaften, sind TBSA-Methode also „small molein einem weiten Größenbereich nur in und defi1.2Maß Biosimilars tegorie von unterschiedlicher Nachahmerpräparaten, cules“3), die mit bekannten 3.5 Einfluss Molekularmassen einem vernachlässigbaren beeinflusst, bestätigt die Anders dies bei biologisch pronierten Methoden relativ einfach und die sich in das herkömmliche von HA Ergebnisse von Queslati [14]. ist Diese verwendeten ein anduzierten Stoffen, den Biologicals identisch hergestellt werden können. Schema von Biosimilars und GeneUm die Auswirkung von unterschiedlichen molekularen deres Trübungsreagenz (Cetyltrimethylammoniumbround ihren den Biosimilars. rika nicht einfügen Sie stellen Massen der HA auf dielässt. Absorption zu untersuchen, wurde mid), kamen aber ebenfalls zu Kopien, dem Schluss, dass das Als Biosimilars bezeichnet bioeine neue Form von ähnlichen Arz2) Rehmann, für HA mit 0,07, 0,42, 0,8, 2,1, 3,0 und 4,0 MDa im Bereich Molekulargewicht die Methode nicht beeinflusst.man TheoAMG, 3. Aufl., Vorbem. 4. Abtechnologisch hergestellte Nachneimitteln dar, die keine Generika, schnitt, Rn. 37. Laut Richtlinie EG Verstärkung der Wechselwirkungen von von 0,1 bis 0,7 mg/ml je eine Kalibriergerade aufgenomretisch2001/83/ wäre eine 5) „Arzneimittel, die die gleiche qualitative und ahmerpräparate von Biologicals aberInauch Biosimilars sind: men. Abb.keine 6 wurden die Steigungen und die Korrelati- HA und BSA mit zunehmender molekularer Größe von , quantitative Zusammensetzung von Wirk- onskoeffizienten der jeweiligen Kalibriergeraden zu erwartenwie gewesen, da mehr negative Ladungen an stoffen und gegen die gleiche HA Darreichungsform 4) EMA/CHMP/SWP/100094/2011, Introduc1.1 Generika Molekularmassen von dasHA Referenzarzneimittel aufweisen und deren die unterschiedlichen aufgetra- der Oberfläche des Polymers vorliegen sollten und sich tion. Bioäquivalenz mit dem Referenzarzneimittel Herkömmliche Generika sind Nachgen. dadurch größere Komplexe bilden könnten [14]. Offendurch geeignete Bioverfügbarkeitsstudien 5) Nach dem Verständnis der EMA. Man ahmerpräparate kleinmolekularer Die Ergebnisse zeigen, dass die Molekularmasse der sichtlich spielt dieser spricht Effektauch bei von derBiologika TBSA-Methode aber nachgewiesen wurden“. oder Biopharma3) Moleküle wenn sie nicht zeutika. Im Folgenden wird durchgängig der HA im Bereich von 0,42–4,0 MDa keinen Einflussgelten aufals „klein“, erst bei Molekularmassen unter 0,42 MDa eine Rolle. Die1) mehr 500MDa Atome haben. Begriff verwendet. die EMA/CHMP/SWP/100094/2011. Steigung der Kalibriergerade hat. Die HA mitals0,07 ses Ergebnis erwies sich alsBiologicals besonders interessant, da es Pharm. Ind. 74, Nr. 2, 266–276 (2012) Pharm. 78, Nr. 5, 750–757 © ECVInd. Cantor Verlag,• (2016) Aulendorf (Germany) · Editio Weber undVerlag, RuppelAulendorf TBSA (Germany) © ECV • Editio Cantor 754 51 Pharm. Ind. 78, Nr. 5, 750–757 (2016) Eisenblätter · Non-Biological Complex Drugs Similars © ECV • Editio Cantor Weber und Verlag, Ruppel Aulendorf • TBSA (Germany) Zur Verwendung mit freundlicher Genehmigung des Verlages / For use with permission of the publisher Generikum, Biosimilar, NBCD-Similar – eine neue Kategorie von Nachahmerpräparaten Arzneimittelwesen · Gesundheitspolitik · Industrie und Gesellschaft Gesetz und Recht Zu den Konsequenzen für die Haftung von Arzt, Apotheker und pharmazeutischem Unternehmer Dr. Tanja Eisenblätter Hogan Lovells International LLP, Hamburg GenerikaAbbildung und Biosimilars sind bekannte Kategorien von Nach7: Kalibriergeraden der HA deren Molekularmassen von 0,07-4,0 MDaGenerika variierten.dieser Originalarzneimittel sind identische Kopien des Originalahmerarzneimitteln, die sowohl im Hinblick auf ihre Zulassung als produktes, und für den Generikaherauch auf ihre n Tab e lle 2 Austauschbarkeit aus gutem Grunde unterschiedlichen steller stellt der Herstellungsprozess Regelungen unterliegen. Indes bilden sie die Realität nicht hinreiin mg/ml, der Regel(Molekularmasse keine Herausforderung Berechnung desbeide Gehalts von HA-Proben mitBesonderheiten c=0,15, 0,20, 0,35, von chend ab, denn Kategorien lassen die von 0,55, 0,60 dar. Gleichermaßen einfach ist es, 2,1 MDa) gegenComplex die entsprechende Kalibriergerade (2,1außer MDa). Non-Biological Drugs (im Folgenden: NBCD) nachzuweisen, dass sich Originalarzneimittel 0,344 und Generikum qualitativ Betracht. Bei diesen Arzneimitteln mit komplexen chemischen Theoretische Konzentrationen der HA-Proben [mg/ml] 0,147 0,196 0,540 0,589 und quantitativ entsprechen, also Strukturen ist die Herstellung eines identischen NachahmerpräMittelwert A600nm HA-Proben (2,1 MDa) 0,292 0,413 0,783 1,160 1,249 bioäquivalent sind.0,557Die Tatsache, parates bedingtProbe möglich. Mittelwertnur Konzentration [mg/ml]Dieses Problem wurde von der EMA 0,140 in 0,198 0,366 0,600 dass die Reproduzierbarkeit des HerStandardabweichung [mg/ml] 0,0015 0,0019 0,0025 0,0043 0,0046 einem „Reflection paper on non-clinical studies for generic nanopstellungsprozesses ebenso unprobleWiederfindung [%] 94,78 100,68 106,34 103,18 101,91 article iron medicinal product applications“ für generische Eisenprä- matisch wie die Identifizierungsmögparate mit Nanopartikel-Charakteristik jüngst erkannt.1) Im Follichkeit ist, bildet die Basis für den Zulassungsprozess Generika genden soll erläutert werden, worum es sich bei den NBCD handelt, die Möglichkeit eröffnet, einen HA-Referenzstandard mit ließ sich kein Zusammenhang zwischen von Wiederfindung 4) mit „small molecules“. wie diese rechtlich einzuordnen sind und welche haftungsrechteinem Molekulargewicht zwischen 0,42–4 MDa zu etaund molekularer Masse der Kalibriergeraden erkennen, Beispiel fürdass ein die klassisches lichen Folgen sich für Arzt und Apotheker bei der vongeschlussfolgertEinwerden blieren, der zum Testen von HA-Produkten, mit beliebi-Abgabe so dass kann, molekuMolekül mit einer einfachen Molegen Molekularmassen zwischen 0,42–4 MDa geeignet ist. lare Masse im Bereich von 0,42–4,0 MDa keinen Einfluss NBCD-Similars ergeben. külstruktur ist das Aspirin (AcetylsaUm zu überprüfen, welchen Einfluss die Auswertung auf die Wiederfindung hat. licylsäure)-Molekül, C9H8O4, mit eieiner Probe mit einer Kalibriergeraden mit anderen MoStruktur von chemisch hergestellten ner Größe von 180 Dalton und ins1 . Z um auf B e gdie r i f fWiederfindung der der TBSA-Methode lekularmassen hat, wurde zu- 3.6 Robustheit 2) Die Oripatentfreien Arzneimitteln. gesamt 21 Atomen. Sowohl KompleNo ndie - B iWiederfindung o l o g i c a l C o mmehrerer p l e x HA-Proben mit un- Zur Untersuchung der Robustheit der Methode wurde der nächst ginalarzneimittel basieren auf einer xität als auch räumliche Struktur dieDr u g sKonzentrationen Simi lar s terschiedlichen (0,15, 0,20, 0,35, 0,55 und Einfluss unterschiedlicher Chargen und Hersteller von einfachen Molekülstruktur mit gut ses Standzeit Moleküls von sindPuffern einfachund und defi(NBC D - S idie m i lgleichmolekulare a r s) BSA ermittelt sowie die Lösun0,60 mg/ml) gegen Kalibriergerade definierten physiko-chemischen Einiert. (2,1 MDa) ermittelt. Die Wiederfindungen lagen zwischen gen und die Mengen an BSA variiert. Bis auf die Variation NBCD-Similars bezeichnen Ka- genschaften, mole- war die TBSA-Methode gegenüber all der „small BSA-Menge 95–106 % (Tab. 2), wobei dieeine Abweichungen vom 100 sind %- also 3) , die mit bekannten und defi- robust. 1.2Bei Biosimilars tegorie von Nachahmerpräparaten, cules“ Erhöhung der BSA Menge Wert der Abflachung der Kalibrierkurve bei höheren Kon- diesen Faktoren Anders nierten Methoden relativ einfach und die sich in das herkömmliche in der BSA-Lösung erhöht ist sichdies zwarbeidiebiologisch Steigung proder zentrationen geschuldet sind. duzierten Stoffen, den identisch hergestellt werden können. Schema von Biosimilars und GeneKorrelatiIm Anschluss wurden HA-Proben (2,1 MDa) mit den Kalibriergeraden, aber der Grenzwert für denBiologicals ihren Kopien, den rika nichtKalibriergeraden einfügen lässt. der Sie stellen Kalibriergeraden mit Biosimilars. R ≥ 0,995 anderen HA ausgewertet (0,42, 0,8, onskoeffizienten derund Als Biosimilars bezeichnet man bioeine neue Form von ähnlichen Arz2) Rehmann, AMG, Vorbem.nicht 4. Ab-mehr eingehalten werden (Ergebnisse nicht konnte 3,0 und 4,0 MDa) und die Wiederfindung berechnet. Da3. Aufl., technologisch hergestellte Nachneimitteln dar, die keine Generika, schnitt, Rn. niedrig 37. Laut Richtlinie 2001/83/ EG dargestellt). die Wiederfindungen bei 0,15 mg/ml stets sehr 5) „Arzneimittel, die die gleiche qualitative und , ahmerpräparate von Biologicals aber auch keine Biosimilars sind: waren, wurden nur Proben im Konzentrationsbereich quantitative Zusammensetzung von Wirkstoffen und die und gleiche Darreichungsform wie 3.7 HA-Quantifizierung in unterschiedlichen von 0,20–0,60 mg/ml verglichen. Die Mittelwerte 4) EMA/CHMP/SWP/100094/2011, Introduc1.1 Generika das Referenzarzneimittel aufweisen und deren Standardabweichungen der Wiederfindungen der HA- Produkten tion. Bioäquivalenz mit dem Referenzarzneimittel Herkömmliche Generika sind Im Vordergrund stand einedem Gehaltsbestimmung von HA Proben (2,1 MDa) betrugen fürNachdie Auswertung mit den durch geeignete Bioverfügbarkeitsstudien 5) Nach Verständnis der EMA. Man ahmerpräparate kleinmolekularer nachgewiesen wurden“. in flüssigen und gelartigen Produkten wie Augentropfen Kalibriergeraden für 0,42 MDa 100,00 ± 2,76, für 0,8 MDa spricht auch von Biologika oder Biopharma3) Moleküle gelten als „klein“, sie nicht zeutika. Im Folgenden wird erfolgte durchgängig der und wenn Gelenkspritzen. Die Quantifizierung gegen 100,52 ± 2,14, für 2,1 MDa 102,73 ± 2,06, für 3,0 MDa 99,41 1) mehr als 500 Atome haben. verwendet. des Biologicals produkteigenen HA-Rohstoffs. ± EMA/CHMP/SWP/100094/2011. 2,65 und für 4,0 MDa 101,83 ± 2,67 (Abb. 8). Allgemein eine KalibriergeradeBegriff Pharm. Ind. 74, Nr. 2, 266–276 (2012) Pharm. 78,Cantor Nr. 5, 750–757 (2016) (Germany) © ECV ·Ind. Editio Verlag, Aulendorf © ECV • Editio Verlag,• TBSA Aulendorf (Germany) WeberCantor und Ruppel 6 7551 Pharm. Complex Ind. 78, Nr. 5, 750–757 Eisenblätter · Non-Biological Drugs Similars(2016) • TBSA Weber und Ruppel © ECV • Editio Cantor Verlag, Aulendorf (Germany) Zur Verwendung mit freundlicher Genehmigung des Verlages / For use with permission of the publisher Generikum, Biosimilar, NBCD-Similar – eine neue Kategorie von Nachahmerpräparaten Wissenschaft und Technik Originale Arzneimittelwesen · Gesundheitspolitik · Industrie und Gesellschaft Gesetz und Recht Zu den Konsequenzen für die Haftung von Arzt, Apotheker und pharmazeutischem Unternehmer Dr. Tanja Eisenblätter Hogan Lovells International LLP, Hamburg Generika dieser Originalarzneimittel Generika und Biosimilars sind bekannte Kategorien von Nachsind identische Kopien des Originalahmerarzneimitteln, die sowohl im Hinblick auf ihre Zulassung als auch auf ihre Austauschbarkeit aus gutem Grunde unterschiedlichen produktes, und für den Generikahersteller stellt dermit Herstellungsprozess Abbildung 8: Mittelwerte der Wiederfindungen von Proben mit Konzentrationen von 0,2-0,6 mg/ml den Regelungen unterliegen. Indes bildenbei sieAuswertung die Realität nicht gegen hinreizugehörigen Standardabweichungen der Proben Kalibriergeraden HA deren in derder Regel keineMoleHerausforderung kularmassen von 0,42-4,0 variierten. chend ab, denn beide Kategorien lassen die Besonderheiten von dar. Gleichermaßen einfach ist es, Non-Biological Complex Drugs (im Folgenden: NBCD) außer nachzuweisen, dass sich Originalarzneimittel und Generikum qualitativ Betracht. Bei diesen Arzneimitteln mit komplexen chemischen Die Produkte wurden auf eine HA-Konzentration von kein Einfluss auf die TBSA-Methode bei der Gehaltsund quantitativ entsprechen, also Strukturen ist die Herstellung eines identischen Nachahmerprä0,2 mg/ml verdünnt, so dass der Kalibrierbereich auf bestimmung von Produkten mit unterschiedlichen parates nur bedingt wurde NaCl-Konzentrationen. von der EMA in bioäquivalent sind. Die Tatsache, 0,1–0,3 mg/ml eingeengtmöglich. werden Dieses konnte. Problem Der pH-Wert dass die Reproduzierbarkeit des Herder Probenlösungen nachondem Lösen der studies Produkte Der pH-Wert einem „Reflection lag paper non-clinical for generic nanop- hingegen hatte starken Einfluss auf die stellungsprozesses ebenso unprobleinarticle 0,3 M Phosphatpuffer 5,3 undapplications“ somit im optimalen Empfindlichkeit HA-Quantifizierung mittels der iron medicinalbei product für generische Eisenprä-der matisch wie die IdentifizierungsmögBereich der TBSA-Methode. Bei den Augentropfen konn- TBSA-Methode. Das liegt zum einen daran, dass bei ei1) parate mit Nanopartikel-Charakteristik jüngst erkannt. Im Follichkeit ist, bildet die Basis für den ten Wiederfindungen von 97,8–103,4 % und bei den Ge- nem saurem pH-Wert, wie es beim BSA in BSA-Lösung Zulassungsprozess von + Generika genden soll erläutert werden, es%sich bei den der NBCD handelt, lenkspritzen Wiederfindungen von worum 97,1–100,3 ermittelt Fall ist, die Aminogruppen protoniert (NH 3 ) vorliemit „small molecules“.4) wie diese rechtlich einzuordnen sind und welche haftungsrechtwerden. Die TBSA-Methode konnte damit zuverlässig zur gen. Zum anderen hat das Salz der HA eine hohe negative Ein Beispiel für ein klassisches lichen Folgen sichvon fürHA Arzt Apotheker bei der Abgabe von Ladungsdichte und liegt auch bei niedrigen pH-Werten in Gehaltsbestimmung in und flüssigen und gelartigen Molekül mit einer einfachen Moleseiner deprotonierten Form vor und hat somit ein hohes Produkten angewendet werden. NBCD-Similars ergeben. külstruktur ist das Aspirin (AcetylsaFür feste und halbfeste Produkte wie Tabletten und Bindungsvermögen für Kationen oder positiv geladene licylsäure)-Molekül, C9H8O4, mit eiGrupKapseln zeigte sich hingegen, dass spezifische Probenauf- Gruppen. Durch die Interaktion der protonierten Struktur von chemisch hergestellten ner Größe von 180 Dalton und ins1 . Z um B e entwickelt g r i f f d e r werden müssen, bei de- pen des 2)BSAs und deprotonierten Gruppen der HA entarbeitungsverfahren patentfreien Arzneimitteln. Die Ori- gesamt 21 Atomen. Sowohl Komplen - B i oMatrixkomponenten l o g i c a l C o m p l e x abgetrennt nen No störende werden, stehen elektrostatische Komplexe, die eine Trübung verginalarzneimittel basieren auf einer xität als auch räumliche Struktur dieu g s Simi lar um die HADrvollständig für s die Reaktion mit bovinem ursachen [16]. Bei der Untersuchung von Proben mittels einfachen Molekülstruktur mit gut ses Moleküls sind einfach und defi( N B Cverfügbar D - S i m i l azur s) der TBSA-Methode, sollte daher nach Lösung der Probe Serumalbumin machen. definierten physiko-chemischen Ei- niert. der pH-Wert überprüft werden. NBCD-Similars bezeichnen eine Ka- genschaften, sind also „small moleBezüglich der Molekularmasse ließ sich feststellen, 3) 1.2 Biosimilars tegorie von Nachahmerpräparaten, cules“ , die mit bekannten und defidass diese nur einen geringen Einfluss auf die Absorptio4 . F az i t nierten Methoden relativ einfach und Anders ist dies bei biologisch prodie sich in das herkömmliche nen hat. Ein Ziel könnte daher sein, einen ReferenzstanSchema von Biosimilars und Gene- identisch hergestellt werden können. duzierten Stoffen, den Biologicals Die TBSA-Methode ist eine neue, einfache und schnelle dard für die HA-Analytik (in Ph. Eur. Qualität), der für und ihren Kopien, den Biosimilars. rika nicht einfügen lässt. Sie stellen Methode, mit der es möglich ist den HA-Gehalt in flüssi- diverse HA-haltige Produkte eingesetzt wird, zu etablieAls Biosimilars bezeichnet man bioeine neue Form von ähnlichen Arz- 2) Rehmann, AMG, 3. Aufl., Vorbem. 4. Abgen und gelartigen Produkten zu bestimmen. Sie stellt ren. technologisch hergestellte Nachneimitteln dar, die keine Generika, schnitt, Rn. 37. Laut Richtlinie 2001/83/ EG Darüber hinaus wurde die Robustheit der Methode5) eine Alternative zu gängigen Methoden für die HA-Quan„Arzneimittel, die die gleiche qualitative und ahmerpräparate von Biologicals , aber auch keine Biosimilars sind: veränderten Reaktionsbedingungen untertifizierung in pharmazeutischen und medizinischen Pro- gegenüber quantitative Zusammensetzung von Wirkstoffen und die gleiche sucht. Darreichungsform wie der Einfluss unterschiedlicher CharDabei wurde dukten dar. 4) 1.1 Generika Introducdas Referenzarzneimittel aufweisen und deren BSA, der Standzeit von Puffern In der vorliegenden Arbeit wurde die spektralphoto- gen und Hersteller vonEMA/CHMP/SWP/100094/2011, tion. Herkömmliche Generika sind Nach- Bioäquivalenz mit dem Referenzarzneimittel und Lösungen sowie variierender Mengen der an EMA. BSA auf metrische TBSA-Methode auf mögliche Einflussfaktoren geeignete Bioverfügbarkeitsstudien 5) Nach dem Verständnis Mandie ahmerpräparate kleinmolekularer durch nachgewiesen wurden“.TBSA-Methode ermittelt. Alle Ergebnisse zeigen, dass die untersucht. spricht auch von Biologika oder BiopharmaMoleküle gelten als „klein“, wenn sie nicht zeutika. Im Folgenden wird durchgängig der TBSA-Methode gegenüber diversen Einflussfaktoren über Im Hinblick darauf zeigte sich nur ein3) sehr geringer 1) EMA/CHMP/SWP/100094/2011. mehr als 500 Atome haben. Begriff Biologicals verwendet. Einfluss mit steigender NaCl-Konzentration und somit einen weiten Konzentrationsbereich stabil war. Pharm. Ind. 74, Nr. 2, 266–276 (2012) Pharm. 78, Nr. 5, 750–757 © ECVInd. Cantor Verlag, (2016) Aulendorf (Germany) · Editio • TBSA (Germany) Weber undVerlag, RuppelAulendorf © ECV • Editio Cantor 756 71 Pharm. Ind. 78, Nr.Drugs 5, 750–757 (2016) Eisenblätter · Non-Biological Complex Similars © ECV • Editio Cantor Weber und Verlag, Ruppel Aulendorf • TBSA (Germany) Zur Verwendung mit freundlicher Genehmigung des Verlages / For use with permission of the publisher Generikum, Biosimilar, NBCD-Similar – eine neue Kategorie von Nachahmerpräparaten Arzneimittelwesen · Gesundheitspolitik · Industrie und Gesellschaft Gesetz und Recht [5] Paul S, Chondrogene Differenzierung mesenchymaler Knochenmarkstammzellen mittels bioaktiver Poly-e-caprolactone Scaffolds, [Dissertation] Tierärztliche Hochschule Hannover 2011. 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Microbial cell sind identische Kopien des Originalahmerarzneimitteln, die sowohl im Hinblick auf ihre Zulassung als factories 2011;10:99. undand fürcharacterization den Generikaher[13] Reddy J, Karunakaran KT, Purification of n L I T E R A T U R auch auf ihre Austauschbarkeit aus gutem Grunde unterschiedlichen produktes, hyaluronic acid produced by stellt Streptococcus zooepidemicus strain n T abe lle 2 steller der Herstellungsprozess Regelungen bilden sie method die Realität nicht3523-7. hinreiJ. BioSci. Biotech. 2013;2(3):173–9. [1] Chen Q Y-H.,unterliegen. Establishment ofIndes CTAB Turbidimetric to inHarscoat-Schiavo der Regel keine Herausforderung [14] Oueslati C, Rondags E, Meunier S, determine hyaluronic acid content in fermentation broth. Carbochend ab, denn beide Kategorien lassen die Besonderheiten vonN, Leblanc P,dar. Gleichermaßen einfach ist es, Kapel R, et al., CTAB turbidimetric method for assaying hyaluronic hydrate polymers 2009;78(1):178–81. Non-Biological Complex Drugs Folgenden: NBCD) außer acid in complex environments and under cross-linked form. Carnachzuweisen, dass sich OriginalarzJr, Hopfinger AJ, (im Conformational Analysis of [2] Potenzone R, Hopfinger bohydrate polymers 2014;112:102–8. Glycosaminoglycans. III. Arzneimitteln Conformational Properties of Hyaluronic chemischen neimittel und Generikum qualitativ Betracht. Bei diesen mit komplexen Theoretische Konzentrationen derPolymer HA-Proben [mg/ml] 0,147 0,196 0,344Methods0,540 0,589 [15] Dorfman A, Mucopolysaccharidases. in Enzymology, Acid and Sodium Hyaluronate. Journal, 1978;(2):81–199. und quantitativ entsprechen, also Strukturen Herstellung eines identischen Nachahmerprä1955;1:166–73. [3] Liu L, Liu Y,ist Li J,die Du G, Chen J, Microbial production of hyaluronic Mittelwert A600nm HA-Proben (2,1 MDa) 0,292 0,413 0,783 1,160 1,249 bioäquivalent sind. Die J,Tatsache, acid: current state, challenges, and perspectives. Microbial cell [16] der Lenormand H, Tranchepain F, Deschrevel B, Vincent The hyaparates nur bedingt möglich. Dieses Problem wurde von EMA in Mittelwert Konzentration Probe [mg/ml] 0,140 0,198 0,366 0,557 0,600 factories 2011;1:10–99. luronan-protein complexes at low ionic strength: how the hyaludass die Reproduzierbarkeit des HerStandardabweichung [mg/ml] 0,0015 0,0043albumin. 0,0046 einem „Reflection paper onR.,non-clinical studies for generic nanop[4] Chong B, Blank LM., Mclaughlin Nielsen LK, Microbial hyaluronidase activity is 0,0019 controlled by0,0025 the bovine serum Matrix stellungsprozesses ebenso Wiederfindung [%] 100,68 106,34 103,18 101,91 ronic acid production. Applied microbiology and biotechnology biology94,78 journal of the International Society for Matrix unprobleBiology article iron medicinal product applications“ für generische Eisenprä2005;66(4):341–51. 2009;28(6):365–72. matisch wie die Identifizierungsmög1) Zu den Konsequenzen für die Haftung von Arzt, Apotheker und pharmazeutischem Unternehmer Berechnung des Gehalts von HA-Proben mit c=0,15, 0,20, 0,35, 0,55, 0,60 mg/ml, (Molekularmasse von 2,1 MDa) gegen die entsprechende Kalibriergerade (2,1 MDa). parate mit Nanopartikel-Charakteristik jüngst erkannt. Im Follichkeit ist, bildet die Basis für den Zulassungsprozess von Generika genden soll erläutert werden, worum es sich bei den NBCD handelt, die Möglichkeit eröffnet, einen HA-Referenzstandard mit ließ sich kein Zusammenhang zwischen Wiederfindung mit „small molecules“.4) wie diese rechtlich einzuordnen welche haftungsrechteinem Molekulargewicht zwischen sind 0,42–4und MDa zu etaund molekularer Masse der Kalibriergeraden erkennen, Beispiel für ein klassisches lichen Folgen für Arzt und Apotheker der Abgabe vongeschlussfolgertEinwerden blieren, der zumsich Testen von HA-Produkten, mitbei beliebiso dass kann, dass die molekuMolekül mit einer einfachen Molegen Molekularmassen zwischen 0,42–4 MDa geeignet ist. lare Masse im Bereich von 0,42–4,0 MDa keinen Einfluss NBCD-Similars ergeben. külstruktur ist das Aspirin (AcetylsaUm zu überprüfen, welchen Einfluss die Auswertung auf die Wiederfindung hat. licylsäure)-Molekül, C9H8O4, mit eieiner Probe mit einer Kalibriergeraden mit anderen MoStruktur von chemisch hergestellten ner Größe von 180 Dalton und ins1 . Z um auf B e gdie r i f fWiederfindung der der TBSA-Methode lekularmassen hat, wurde zu- 3.6 Robustheit 2) Die Oripatentfreien Arzneimitteln. gesamt 21 Atomen. Sowohl KompleNo ndie - B iWiederfindung o l o g i c a l C o mmehrerer plex nächst HA-Proben mit un- Zur Untersuchung der Robustheit der Methode wurde der ginalarzneimittel basieren auf einer xität als auch räumliche Struktur dieDr u g sKonzentrationen Simi lar s terschiedlichen (0,15, 0,20, 0,35, 0,55 und Einfluss unterschiedlicher Chargen und Hersteller von einfachen Molekülstruktur mit gut ses Moleküls sind einfach und defi( N B Cgegen D - S i die m i lgleichmolekulare a r s) 0,60 mg/ml) Kalibriergerade BSA ermittelt sowie die Standzeit von Puffern und Lösundefinierten physiko-chemischen Ei- niert. (2,1 MDa) ermittelt. Die Wiederfindungen lagen zwischen gen und die Mengen an BSA variiert. Bis auf die Variation NBCD-Similars bezeichnen eine Ka- genschaften, sind also „small mole95–106 % (Tab. 2), wobei die Abweichungen vom 100 %- der BSA-Menge war die TBSA-Methode gegenüber all 1.2 Biosimilars tegorie von Nachahmerpräparaten, cules“3), die mit bekannten und defiWert der Abflachung der Kalibrierkurve bei höheren Kon- diesen Faktoren robust. Bei Erhöhung der BSA Menge die sich in das herkömmliche nierten Methoden relativ einfach und Anders ist dies bei biologisch proin der BSA-Lösung erhöht sich zwar die Steigung der zentrationen geschuldet sind. Schema von Biosimilars und Gene- identisch hergestellt werden können. duzierten Stoffen, den Biologicals Im Anschluss wurden HA-Proben (2,1 MDa) mit den Kalibriergeraden, aber der Grenzwert für den Korrelatiund ihren Kopien, den Biosimilars. rika nicht einfügen lässt. Sie stellen anderen Kalibriergeraden der HA ausgewertet (0,42, 0,8, onskoeffizienten der Kalibriergeraden mit R ≥ 0,995 Als Biosimilars bezeichnet man bioeine neue Form von ähnlichen Arz- 2) Rehmann, AMG, 3. Aufl., Vorbem. 4. Ab3,0 und 4,0 MDa) und die Wiederfindung berechnet. Da konnte nicht mehr eingehalten werden (Ergebnisse nicht technologisch hergestellte Nachneimitteln dar, die keine Generika, schnitt, Rn. 37. Laut Richtlinie 2001/83/ EG die Wiederfindungen bei 0,15 mg/ml stets sehr niedrig dargestellt). „Arzneimittel, die die gleiche qualitative und ahmerpräparate von Biologicals5), aber auch keine Biosimilars sind: waren, wurden nur Proben im Konzentrationsbereich quantitative Zusammensetzung von Wirkstoffen und die und gleiche Darreichungsform wie 3.7 HA-Quantifizierung in unterschiedlichen von 0,20–0,60 mg/ml verglichen. Die Mittelwerte 4) EMA/CHMP/SWP/100094/2011, Introduc1.1 Generika das Referenzarzneimittel aufweisen und deren www.reinraum-akademie.de Produkten Standardabweichungen der Wiederfindungen der HAtion. Herkömmliche Generika sind Nach- Bioäquivalenz mit dem Referenzarzneimittel Im Vordergrund stand einedem Gehaltsbestimmung von HA Proben (2,1 MDa) betrugen für die Auswertung mit den durch geeignete Bioverfügbarkeitsstudien 5) Nach Verständnis der EMA. Man ahmerpräparate kleinmolekularer AKADEMIE – Schulungen, Coachings nachgewiesen Produkten wieoder Augentropfen Kalibriergeraden fürFachseminare, 0,42 MDa 100,00 ± 2,76, für 0,8 wurden“. MDa in flüssigen und gelartigen spricht auch von Biologika BiopharmaCLEANROOM EXPERTS DAYS – Tagungen 3) Moleküle Chefredaktion: Claudius Arndt. Sekretariat: Below. Verlag: ECVgelten Verlag für sie Medizin GmbH,wird Baendelstockweg 20, alsCantor „klein“, wenn nichtund Naturwissenschaften zeutika. Im Folgenden durchgängig der und Gelenkspritzen. Die Quantifizierung erfolgte gegen 100,52 ± 2,14, für 2,1 MDa 102,73Gudrun ± 2,06, für 3,0 MDa· Editio 99,41 WISSENSPORTAL – TrendsTel.: und Innovationen 1) EMA/CHMP/SWP/100094/2011. 88326 Aulendorf (Germany). +49 (0) 75 25 94 00, Fax: +49 (0) als 75 25 94 01 80. e-mail: redaktion@ecv.de. http://www.ecv.de. Herstellung: Reemers Publishing Services mehr 500 Atome haben. Begriff Biologicals verwendet. ± 2,65/ Holzmann und für 4,0 MDa 101,83 (Abb. 8). Allgemein eine Kalibriergerade des produkteigenen HA-Rohstoffs. COMPETENCE CENTER – Reinraumwissen zum Anfassen GmbH Druck GmbH & Co. KG. ± Alle2,67 Rechte vorbehalten. Ein reiner Raum entsteht im Kopf Pharm. Ind. 74, Nr. 2, 266–276 (2012) Pharm. 78,Cantor Nr. 5, 750–757 (2016) (Germany) © ECV ·Ind. Editio Verlag, Aulendorf © ECV • Editio Cantor Verlag, Aulendorf (Germany) Eisenblätter · Non-Biological Complex Drugs Similars Weber und Ruppel • TBSA 1 757 Zur Verwendung mit freundlicher Genehmigung des Verlages / For use with permission of the publisher Generikum, Biosimilar, NBCD-Similar – eine neue Kategorie von Nachahmerpräparaten Es konnte gezeigt werden, dass die TBSA-Methode zum jetzigen Zeitpunkt für die HA-Gehaltsbestimmung von flüssigen und gelartigen Formulierungen anwendbar ist. Die HA-Gehaltsbestimmung von festen und halbfesten Rezepturen ist noch zu untersuchen bzw. sind die Bedingungen zur Probenaufarbeitung in produktspezifischen Validierungen festzulegen. Insgesamt erwies sich die TBSA-Methode als einfache Methode zur Gehaltsbestimmung von HA, die native HA erfasst und sich somit auch für Stabilitätsstudien einer Vielzahl von flüssigen Produkten eignet.
